李結(jié)敏 陳志忠 陳尚良 廖揚(yáng)勛 余文潮 盧少芬 梁劍鋒 李勛偉

[摘要]目的 研究丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）與甲型肝炎病毒（HAV）、庚型肝炎病毒（HGV）的關(guān)系，評(píng)估其在血液篩查中的價(jià)值。方法 隨機(jī)收集2017年1～12月肇慶地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行考察，檢測(cè)輸血五項(xiàng)[乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒抗體（Anti-HCV）、人類免疫缺陷病毒抗體（Anti-HIV）、梅毒螺旋體（TP）、人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒（Anti-HTLV）]均為陰性。將ALT正常（ALT≤50 U/L）的874份標(biāo)本作為對(duì)照組（其中393份標(biāo)本作為對(duì)照組1，481份標(biāo)本作為對(duì)照組2），ALT異常（ALT>50 U/L）的135份標(biāo)本作為研究組。采用核酸檢測(cè)技術(shù)（NAT）、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)輸血感染五項(xiàng)，采用速率法檢測(cè)ALT，采用ELISA方法檢測(cè)HAV-IgG、HGV-IgG?；仡櫺苑治?003～2017年肇慶市無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，考察HBsAg陽(yáng)性獻(xiàn)血者（2216例）、Anti-HCV陽(yáng)性獻(xiàn)血者（664例）中的ALT異常率。結(jié)果 對(duì)照組1和研究組標(biāo)本分別檢測(cè)HAV-IgG，對(duì)照組檢出352例（89.6%）陽(yáng)性，研究組檢出110例（81.5%）陽(yáng)性，研究組的HAV-IgG檢測(cè)陽(yáng)性率低于對(duì)照組1，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。對(duì)照組2和研究組標(biāo)本的HGV-IgG陽(yáng)性率均為0.0%。Anti-HCV陽(yáng)性獻(xiàn)血者標(biāo)本中的ALT異常率為109例（4.9%），高于HBsAg組的161例（24.2%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。2216例HBsAg陽(yáng)性者中，ALT異常109例（4.9%），664例Anti-HCV陽(yáng)性者中，ALT異常161例（24.2%），HBsAg陽(yáng)性者中，ALT異常率低于Anti-HCV陽(yáng)性者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 ALT與HCV有關(guān)聯(lián)，但經(jīng)特異性的ELISA和NAT檢測(cè)HCV后，ALT檢測(cè)再無(wú)益于改善HCV殘余風(fēng)險(xiǎn)。研究組的HAV-IgG陽(yáng)性率低于對(duì)照組，但HAV為非經(jīng)血液傳播疾病，也無(wú)助于改善血液安全殘余風(fēng)險(xiǎn)。

[關(guān)鍵詞]丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶；獻(xiàn)血者；血液篩查；殘余風(fēng)險(xiǎn)

[中圖分類號(hào)] R457.12 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2018）9（b）-0158-04

[Abstract] Objective To study the relationship between alanine aminotransferase （ALT） and hepatitis A virus （HAV） and hepatitis G virus （HGV） and to evaluate its value in blood screening. Methods Blood samples from unpaid blood donors in Zhaoqing area from January to December 2017 were randomly collected， and five bloods transfusion tests （hepatitis B virus surface antigen [HBsAg]， hepatitis C virus antibody [Anti-HCV]， human immunodeficiency virus antibody [Anti-HIV]， syphilitic spirulina [TP]， human T lymphocytic leukemia virus [Anti-HTLV]） were negative. Altogether 874 specimens with normal ALT （ALT≤50 U/L） were used as control group （393 specimens were used as the control group 1， and 481 specimens were used as the control group 2）， and 135 specimens with abnormal ALT （ALT>50 U/L） were used as study group. Five blood transfusion infections were detected by nucleic acid detection technology （NAT） and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. ALT was detected by rate method， and HAV-IgG and HGV-IgG were detected by ELISA. The blood samples from unpaid blood donors in Zhaoqing City from 2003 to 2017 were retrospectively analyzed. The abnormal rate of ALT in HbsAg positive blood donors （2216 cases） and Anti-HCV positive blood donors （664 cases） was investigated. Results HAV-IgG was detected both in the control group 1 and in the study group， 352 cases （89.6%） were positive in the control group， and 110 cases （81.5%） were positive in the study group. The positive rate of HAV-IgG in the study group was lower than that in the control group 1， and the difference was statistically significant （P<0.05）. The positive rate of HGV-IgG in the control group 2 and in the study group was 0.0%. There were 109 cases （4.9%） of ALT abnormalities in 2216 HBsAg-positive cases and 161 cases （24.2%） of ALT abnormalities in 664 Anti-HCV-positive cases. The abnormal rate of ALT in HBsAg-positive cases was lower than that in Anti-HCV-positive cases， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion ALT is related to HCV， but after the specific test of ELISA and NAT， ALT test is no longer helpful to improve the residual risk of HCV. The positive rate of HAV-IgG in the study group is lower than that in the control group， but HAV is a non-blood-borne disease and did not help to improve the residual risk of blood safety.

[Key words] Alanine aminotransferase； Blood donors； Blood screening； Residual risk

2012版《血站技術(shù)操作規(guī)程》規(guī)定，對(duì)獻(xiàn)血者進(jìn)行丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）檢測(cè)。然而，隨著酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）以及核酸檢測(cè)技術(shù)（NAT）的逐步完善，近年來(lái)有關(guān)ALT在血液篩查中的作用，逐漸成為學(xué)術(shù)界爭(zhēng)論的焦點(diǎn)。ALT異常與肝炎性疾病特別是丙型肝炎存在顯著的相關(guān)性，是指示肝功能的指標(biāo)之一，在肝炎的診斷和治療方面有重要作用。但另一方面，不少學(xué)者研究后指出，隨著肝炎特異性診斷試劑技術(shù)的完善以及核酸檢測(cè)技術(shù)在血站全面開(kāi)展的情況下，繼續(xù)開(kāi)展ALT檢測(cè)對(duì)保障血液安全顯得意義不大。因此，本研究擬對(duì)單純ALT升高的無(wú)償獻(xiàn)血者進(jìn)行血清學(xué)研究分析，旨在探討ALT與丙肝、乙肝等肝炎性疾病的關(guān)系，重新評(píng)估ALT檢測(cè)在血液篩查安全中的作用，為血液安全管理部門以及決策者提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1資料與方法

1.1標(biāo)本

選取2017年1～12月肇慶地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者的標(biāo)本進(jìn)行考察。納入標(biāo)準(zhǔn)：①輸血五項(xiàng)[乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、丙型肝炎病毒抗體（Anti-HCV）、人類免疫缺陷病毒抗體（Anti-HIV）、梅毒螺旋體（TP）、人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒（Anti-HTLV）]檢測(cè)陰性，HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA的核酸檢測(cè)陰性；②對(duì)照組及研究組標(biāo)本均無(wú)溶血或嚴(yán)重脂血，采用NAT檢測(cè)后血漿量應(yīng)>2 ml。排除標(biāo)準(zhǔn)：①輸血五項(xiàng)（HBsAg、Anti-HCV、Anti-HIV、TP、Anti-HTLV）或HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA的核酸檢測(cè)任一項(xiàng)陽(yáng)性的標(biāo)本；②溶血、嚴(yán)重脂血或血漿量<2 ml的標(biāo)本。將ALT正常（ALT≤50 U/L）的874份標(biāo)本作為對(duì)照組（其中393份標(biāo)本作為對(duì)照組1，481份標(biāo)本作為對(duì)照組2），ALT異常（ALT>50 U/L）的135份標(biāo)本作為研究組。回顧性分析2003～2017年肇慶市的2880份無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，考察HBsAg陽(yáng)性獻(xiàn)血者（2216份）、Anti-HCV陽(yáng)性獻(xiàn)血者（664份）中的ALT異常率。本研究經(jīng)肇慶市中心血站醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2試劑與儀器

1.2.1檢測(cè)試劑 乙型肝炎病毒/丙型肝炎病毒/人類免疫缺陷病毒（Ⅰ型）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）（中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司）；HBsAg檢測(cè)試劑盒（北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司、法國(guó)伯樂(lè)公司）；抗-HCV檢測(cè)試劑盒[英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司、北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司]；抗-HIV檢測(cè)試劑盒（北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司）；HIV-Ab/Ag檢測(cè)試劑盒（法國(guó)伯樂(lè)公司）；梅毒抗體檢測(cè)試劑盒[英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司、北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司]；HTLV檢測(cè)試劑盒（北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司）；ALT檢測(cè)試劑盒（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）；HAV-IgG檢測(cè)試劑盒（北京貝爾生物工程有限公司）；HGV-IgG檢測(cè)試劑盒（北京貝爾生物工程有限公司）。

1.2.2儀器 Freedom evo全自動(dòng)加樣器處理分析系統(tǒng)（瑞士Tecan公司）；BEPⅢ全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)（德國(guó)西門子公司）；TECAN. SUNRISE酶標(biāo)儀（瑞士Tecan公司）；ABI7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀（美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）；Chemagic STAR核酸提取儀（瑞士Hamilton公司）；HH.W21.600型電熱恒溫水溫箱（上海予卓?jī)x器有限公司）；BS-800型全自動(dòng)生化儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）。

1.3方法

采用NAT、ELISA檢測(cè)輸血感染五項(xiàng)（HBsAg、TP、Anti-HCV、Anti-HIV，Anti-HTLV）和HAV-IgG、HGV-IgG，采用速率法檢測(cè)ALT，采用PCR-熒光法檢測(cè)乙型肝炎病毒/丙型肝炎病毒/人類免疫缺陷病毒（Ⅰ型）核酸。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用IBM SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組標(biāo)本HAV-IgG檢出陽(yáng)性率的比較

研究組的HAV-IgG檢出陽(yáng)性率低于對(duì)照組1，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.2兩組標(biāo)本HGV-IgG檢出陽(yáng)性率的比較

對(duì)照組2標(biāo)本共481份，研究組標(biāo)本共135份，兩組均未檢出HGV-IgG陽(yáng)性標(biāo)本，對(duì)照組2和研究組標(biāo)本的HGV-IgG陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.3 HBsAg、HCV陽(yáng)性獻(xiàn)血者中ALT異常率的比較

Anti-HCV陽(yáng)性獻(xiàn)血者標(biāo)本中的ALT異常率高于HBsAg組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論

近年來(lái)有關(guān)ALT在血液篩查中的作用逐漸成為學(xué)術(shù)界爭(zhēng)論的焦點(diǎn)。以往由于檢測(cè)技術(shù)的限制，非甲、非乙型肝炎缺乏特異性檢測(cè)方法，而ALT檢測(cè)則成為了這類肝炎的替代試驗(yàn)[1-2]。隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是在篩查試劑技術(shù)的不斷完善以及核酸檢測(cè)技術(shù)全面開(kāi)展的情況下，繼續(xù)開(kāi)展ALT檢測(cè)對(duì)保障血液安全顯得意義不大[3-6]。2012年國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)提出全面開(kāi)展獻(xiàn)血前篩查ALT，ALT異常單項(xiàng)報(bào)廢的血液已位居首位，甚至報(bào)廢率高達(dá)4.8%[7]，全面開(kāi)展獻(xiàn)血前篩查ALT后仍有約0.7%單項(xiàng)ALT異常的報(bào)廢。在血液資源日趨緊張的情況下，不少學(xué)者建議取消ALT檢測(cè)，從而避免血液的不必要報(bào)廢[8]。因此，本研究重點(diǎn)分析了ALT檢測(cè)對(duì)血液殘余風(fēng)險(xiǎn)的影響。

本研究結(jié)果提示，研究組的HAV-IgG陽(yáng)性率低于對(duì)照組1，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但HAV為非經(jīng)血液傳播疾病，故無(wú)助于改善血液安全殘余風(fēng)險(xiǎn)。HGV病毒是可經(jīng)血液傳播疾病，目前又尚未納入常規(guī)血液篩查項(xiàng)目。但研究結(jié)果提示，對(duì)照組2和研究組標(biāo)本的HGV-IgG陽(yáng)性率均為0%，尚未發(fā)現(xiàn)存在差異，故此認(rèn)為ALT檢測(cè)也無(wú)助于通過(guò)檢出HGV-IgG來(lái)改善血液安全殘余風(fēng)險(xiǎn)。

為進(jìn)一步探討ALT在血液安全檢測(cè)中的價(jià)值，筆者回顧性分析2003～2017年肇慶市無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，進(jìn)一步分析HBsAg陽(yáng)性獻(xiàn)血者（2216份）、Anti-HCV陽(yáng)性獻(xiàn)血者（664份）中的ALT異常率。結(jié)果提示，Anti-HCV陽(yáng)性獻(xiàn)血者標(biāo)本中的ALT異常率高于HBsAg組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示ALT與HCV存在顯著相關(guān)性。但后續(xù)的結(jié)果提示，135例ALT異常的標(biāo)本，NAT檢測(cè)HBV、HCV結(jié)果均為陰性，提示進(jìn)行特異性的HCV抗體篩查和HCV RNA檢測(cè)后，ALT作為HCV非特異性的篩查手段，對(duì)降低輸血傳播風(fēng)險(xiǎn)的意義不大。劉仁強(qiáng)等[9]研究中ALT水平為40～60 U/L的肝炎標(biāo)志物陰性獻(xiàn)血者的NAT結(jié)果均為陰性，謝月娜等[10]研究中ALT異常率與HCV RNA檢測(cè)結(jié)果無(wú)相關(guān)性，證實(shí)ALT異常的主要因素并非HBV和HCV感染。國(guó)內(nèi)外不少專家學(xué)者研究認(rèn)為，由于ALT升高絕大部分為非病理性因素引起，過(guò)度運(yùn)動(dòng)、飲酒、服用特殊藥物、肥胖、疲勞等因素也可導(dǎo)致ALT的升高[11-13]，ALT水平的升高并不能準(zhǔn)確反映獻(xiàn)血者是否患有病毒性肝炎[14-15]，ALT的檢測(cè)已經(jīng)失去了其保障血液安全的意義。但我國(guó)始終將ALT作為血液篩查項(xiàng)目之一，隨著核酸檢測(cè)技術(shù)在全國(guó)血站實(shí)驗(yàn)室全覆蓋，其試劑的高靈敏度能大大縮短HBV、HCV感染檢測(cè)的“窗口期”[16-17]，能更早發(fā)現(xiàn)肝炎窗口期及隱匿性肝炎，在常規(guī)開(kāi)展HBV、HCV、和HIV的NAT血液篩查以后，ALT檢測(cè)再無(wú)益于改善HCV殘余風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，在篩查試劑技術(shù)不斷完善以及核酸檢測(cè)技術(shù)全面開(kāi)展的情況下，繼續(xù)開(kāi)展ALT檢測(cè)對(duì)保障血液安全顯得意義不大。

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