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(佛山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528000)

肝癌是全世界最常見(jiàn)惡性腫瘤之一，發(fā)病率和腫瘤致死率高，近年來(lái)呈逐年上升趨勢(shì)。肝細(xì)胞癌(HCC)是最常見(jiàn)的肝癌類型，在世界范圍內(nèi)位于常見(jiàn)癌癥死亡原因第3位，具有早期不易發(fā)現(xiàn)、進(jìn)展期迅速、復(fù)發(fā)率高，對(duì)化療藥物不敏感的特點(diǎn)，因此預(yù)后不佳[1]。我國(guó)是原發(fā)性肝癌的高發(fā)區(qū)，肝癌一直是惡性腫瘤防控的重點(diǎn)。調(diào)查數(shù)據(jù)表明[2]，2012 年全球50%以上的新發(fā)感染病例和死亡病例發(fā)生在中國(guó)，全國(guó)第三次死因回顧調(diào)查結(jié)果顯示，我國(guó)肝癌死亡率居所有惡性腫瘤第2位。肝癌復(fù)發(fā)率高且缺乏有效預(yù)防和治療手段，嚴(yán)重危害人類健康，給社會(huì)和家庭均帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)。因此，尋找靈敏度和特異性好的血清標(biāo)志物，有利于肝癌的早發(fā)現(xiàn)、早診斷和早治療，具有重大的社會(huì)效益[3]。本研究探討了PIVKA-Ⅱ和AFP-L3在原發(fā)性肝癌診斷中的有效應(yīng)用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：隨機(jī)選取2016年1月至2018年4月我院收治的原發(fā)性肝癌患者120例，其中男70例，女50例，年齡39～79歲，平均(59.2±10.5)歲。將這些患者作為原發(fā)性肝癌組，另選取同期我院收治的慢性肝病患者120作為慢性肝病組，其中男72例，女48例，年齡40～79歲，平均(60.3±10.2)歲。兩組患者的一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法：兩組患者空腹 10～12 h后清晨抽血，在-80℃的冰箱中凍存，實(shí)驗(yàn)前在37℃的溫度下解凍。采集靜脈血3 ml，4 000 r/min離心5 min 后，取上層血清立即檢測(cè)。運(yùn)用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配合試劑盒對(duì)兩組患者的血清甲胎蛋白(AFP)水平進(jìn)行檢測(cè)；應(yīng)用微量離心柱對(duì)兩組患者的血清甲胎蛋白異質(zhì)體(AFP-L3)水平進(jìn)行檢測(cè)；采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)(LUMIPULSETM G1200)，應(yīng)用富士瑞必歐株式會(huì)社生產(chǎn)的配套的異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)檢測(cè)試劑盒，運(yùn)用化學(xué)發(fā)光法對(duì)兩組患者的血清PIVKA-Ⅱ水平進(jìn)行檢測(cè)。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)分別為AFP>10ng/ml、AFP-L3≥10%、PIVKA-Ⅱ>40 mAU/ml[4]。

2 結(jié)果

2.1兩組患者的一般資料比較：兩組患者的一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1兩組患者的一般資料比較

組別例數(shù)性別[例(%)] 男性 女性 年齡(x±s,歲)原發(fā)性肝癌組12070(58.3)50(41.7)59.2±10.5慢性肝病組12072(60.0)48(40.0)60.3±10.2t/χ2值1.321.886P值>0.05>0.05

2.2兩組患者的血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ水平比較：原發(fā)性肝癌組患者的血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ水平均顯著高于慢性肝病組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3兩組患者的血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ陽(yáng)性情況比較：原發(fā)性肝癌組患者的血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ陽(yáng)性率65.0%(78/120)、64.1%(77/120)、62.5%(75/120)均顯著高于慢性肝病組10.8%(13/120)、10.0%(12/120)、8.3%(10/120)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

組別例數(shù)AFP(ng/ml)AFP-L3(%)PIVKA-Ⅱ(mAU/ml)原發(fā)性肝癌組120273.8±50.040.0±7.64 213.2±700.3慢性肝病組1206.7±1.42.2±0.620.0±3.1t值6.9654.5414.303P值<0.05<0.05<0.05

表3兩組血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ陽(yáng)性情況比較[例(%)]

組別例數(shù)AFPAFP-L3PIVKA-Ⅱ原發(fā)性肝癌組12078(65.0)77(64.1)75(62.5)慢性肝病組12013(10.8)12(10.0)10(8.3)χ2值11.1412.8313.34P值<0.05<0.05<0.05

3 討論

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)于肝癌的診斷有極大的指導(dǎo)意義，可提供便捷、高效及無(wú)創(chuàng)的腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)，為肝癌的早期檢測(cè)、治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷提供重要的依據(jù)。目前，最常用的肝癌腫瘤標(biāo)志物為甲胎蛋白(AFP)。血清和組織中的AFP 水平可作為篩選肝癌及判斷預(yù)后的指標(biāo)，研究發(fā)現(xiàn)，相比低水平AFP 患者，AFP≥400 ng/ml 時(shí)肝癌患者體積更大、受累面積更廣，中位生存期更低。然而，在腫瘤直徑<4cm 的肝癌患者中，約2/3的患者AFP<200 ng/ml，超過(guò)20%患者AFP 陰性，提示AFP 的靈敏度不佳，尤其對(duì)于體積小的腫瘤診斷價(jià)值不高。美國(guó)肝病研究會(huì)(AASLD)與2010 年發(fā)布的《Management of hepatocellular carcinoma：an update》中明確指出：AFP 對(duì)肝細(xì)胞癌的監(jiān)測(cè)和診斷缺乏足夠的靈敏度和特異性，當(dāng)腫瘤直徑<2 cm時(shí)，AFP升高不明顯，因此不適于作為監(jiān)測(cè)試驗(yàn)使用[5]。

Vit K缺乏誘導(dǎo)的異常蛋白(PIVKA- Ⅱ) 是一種異常的凝血酶原，也被稱為脫- γ - 羧基凝血酶原(DCP)[6]，最早于1984 年在肝細(xì)胞癌患者血清中發(fā)現(xiàn)，形成確切機(jī)制不明。在Vit K缺乏或服用Vit K拮抗劑后，PIVKA-Ⅱ可釋放入血，可在血清中檢測(cè)到。PIVKA-Ⅱ在肝細(xì)胞患者血清中顯著升高，具有較高的診斷特異性。在日本，PIVKA-Ⅱ被列入《日本肝癌學(xué)會(huì)肝癌診療規(guī)范2009 年版》中，用于肝癌高危人群的篩查及肝癌的輔助診斷。研究表明[7]，血清中PIVKA-Ⅱ含量與血清AFP 含量沒(méi)有相關(guān)性，其診斷肝癌的靈敏度和特異度均優(yōu)于AFP，可單獨(dú)作為肝細(xì)胞癌診斷的敏感指標(biāo)。國(guó)內(nèi)最新針對(duì)中國(guó)人群的研究結(jié)論與國(guó)外基本一致。

日本Nakamura 等研究表明[8]，診斷臨界值為40 mAU/ml 時(shí)，PIVKA-Ⅱ檢測(cè)肝癌的靈敏度為58%，特異性為97%，當(dāng)診斷臨界值為100 mAU/ml 時(shí)，靈敏度和特異性分別為44%和100%。美國(guó)、臺(tái)灣地區(qū)和國(guó)內(nèi)多個(gè)研究的研究結(jié)論基本一致，都認(rèn)為PIVKA-Ⅱ的靈敏度和特異性優(yōu)于AFP，可作為肝癌的標(biāo)志物。然而，PIVKA-Ⅱ?qū)π「伟┑撵`敏度較低，日本的一個(gè)研究指出，對(duì)瘤徑>3cm 的病例，PIVKA-Ⅱ陽(yáng)性率為63%，而瘤徑<3cm 者陽(yáng)性率僅為23%。與AFP 聯(lián)合檢測(cè)時(shí)，PIVKA-Ⅱ單項(xiàng)陽(yáng)性的病例肝癌具有單發(fā)、腫塊大、年齡高等特征，且2年內(nèi)發(fā)生門(mén)靜脈浸潤(rùn)率較高，提示在不同類型肝癌中，PIVKA-Ⅱ的水平可能存在一定的差異。目前國(guó)外有病例報(bào)告發(fā)現(xiàn)肝內(nèi)膽管性肝癌患者中出現(xiàn)AFP、AFP-L3 和PIVKA-Ⅱ同時(shí)升高，提示PIVKA-Ⅱ在其他類型肝癌中也具有診斷價(jià)值。本研究結(jié)果表明，原發(fā)性肝癌組患者的血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ水平均顯著高于慢性肝病組(P<0.05)，血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ陽(yáng)性率65.0%(78/120)、64.1%(77/120)、62.5%(75/120)均顯著高于慢性肝病組10.8%(13/120)、10.0%(12/120)、8.3%(10/120)(P<0.05)，和上述相關(guān)醫(yī)學(xué)研究結(jié)果基本一致。

總之，AFP-L3和PIVKA-Ⅱ在原發(fā)性肝癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值高，值得在臨床推廣應(yīng)用。