龐亞丹

(浙江省寧波市北侖區(qū)第二人民醫(yī)院病理科，浙江 寧波 315809)

臨床研究表明，病理切片的質(zhì)量會(huì)直接影響病理檢查的結(jié)果。對(duì)病理切片進(jìn)行染色是對(duì)患者實(shí)施病理檢查過(guò)程中的重要步驟。近年來(lái)，免疫組化染色法在對(duì)接受肝臟穿刺組織病理檢查患者的病理切片進(jìn)行染色方面得到了廣泛的應(yīng)用[1]。本文對(duì)在浙江省寧波市北侖區(qū)第二人民醫(yī)院進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查的78例患者進(jìn)行分組對(duì)比研究，旨在探討對(duì)接受肝臟穿刺組織病理檢查患者的病理切片進(jìn)行免疫組化染色的效果。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

本次研究的對(duì)象為2014年1月至2018年2月期間在浙江省寧波市北侖區(qū)第二人民醫(yī)院進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查的78例患者。其入選標(biāo)準(zhǔn)是：1)無(wú)精神疾病。2)自愿參與本次研究。3)無(wú)心功能障礙。應(yīng)用信封隨機(jī)分組法將其分為觀察組和對(duì)照組。觀察組患者中有男性19例，女性20例；其平均年齡(56.84±4.33)歲；其中有肝血管瘤患者4例，轉(zhuǎn)移性肝癌患者2例，肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者7例，肝細(xì)胞癌患者19例，肝臟濾泡樹(shù)突細(xì)胞肉瘤患者7例。對(duì)照組患者中有男性18例，女性21例；其平均年齡(56.52±4.16)歲；其中有肝血管瘤患者3例，轉(zhuǎn)移性肝癌患者3例，肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者6例，肝細(xì)胞癌患者20例，肝臟濾泡樹(shù)突細(xì)胞肉瘤患者7例。兩組患者的一般資料相比，P＞0.05。

1.2 方法

在對(duì)這兩組患者進(jìn)行肝臟穿刺組織病理檢查期間，對(duì)對(duì)照組患者的病理切片進(jìn)行常規(guī)的HE染色。方法是：將病變的肝臟組織放入4%的中性甲醛中進(jìn)行連續(xù)固定4 h。分別使用AF液、二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、100%的乙醇Ⅰ、100%的乙醇Ⅱ、95%的乙醇、90%的乙醇、80%的乙醇、75%的乙醇對(duì)其進(jìn)行浸泡，浸泡的時(shí)間分別為1 h、30 min、20 min、1 h、1 h、1 h、1 h、1 h和1 h。使用醋酸Ⅰ和醋酸Ⅱ分別對(duì)其進(jìn)行浸泡1 h，然后對(duì)其進(jìn)行切片處理。對(duì)病理切片進(jìn)行2 h的烤片后(烤片的溫度控制在60℃左右)，對(duì)其進(jìn)行HE染色[2]。對(duì)觀察組患者的病理切片進(jìn)行免疫組化染色。方法是：將病變的肝臟組織制成病理切片的方法同上。對(duì)切片進(jìn)行脫蠟處理，在常溫狀態(tài)下使用3%的雙氧水對(duì)切片進(jìn)行浸泡20 min。完成浸泡后，用PBS(磷酸鹽緩沖液)沖洗切片，反復(fù)沖洗3次，沖洗的時(shí)間應(yīng)＞15 min。在1000 ml的燒杯中倒入700 ml的檸檬酸緩沖液，并將其加熱至沸騰。將切片放入緩沖液中加熱，15 min后將其取出。將切片置于常溫環(huán)境下冷卻，然后用PBS對(duì)其進(jìn)行沖洗15 min。對(duì)切片進(jìn)行一抗處理，使用溫度為4℃的冰箱對(duì)其進(jìn)行低溫孵育。用PBS對(duì)切片進(jìn)行沖洗，然后對(duì)其進(jìn)行二抗處理。將其置于常溫下孵育10 min后，對(duì)其進(jìn)行最后一次沖洗。5～10 min后，使用DAB染色液對(duì)其進(jìn)行染色，然后使用中性樹(shù)膠對(duì)其進(jìn)行封固[3]。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組患者病理切片染色質(zhì)量的優(yōu)良率及檢查后其病情診斷的準(zhǔn)確率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

對(duì)本文中的數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料用(±s)表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比兩組患者病理切片染色質(zhì)量的優(yōu)良率

觀察組患者中病理切片染色質(zhì)量為優(yōu)的患者有35例(占89.74%)，為良的患者有3例(占7.69%)，為差的患者有1例(占2.56%)；對(duì)照組患者中病理切片染色質(zhì)量為優(yōu)的患者有20例(占51.28%)，為良的患者有10例(占25.64%)，為差的患者有9例(占23.08%)觀察組患者病理切片染色質(zhì)量的優(yōu)良率〔97.44%(38/39)〕高于對(duì)照組患者病理切片染色質(zhì)量的優(yōu)良率〔76.92%(30/39)〕，P＜0.05。詳見(jiàn)表1。

表1 對(duì)比兩組患者病理切片染色質(zhì)量的優(yōu)良率

2.2 對(duì)比檢查后兩組患者病情診斷的準(zhǔn)確率

檢查后觀察組患者診斷的準(zhǔn)確率〔94.87%(37/39)〕高于對(duì)照組患者病情診斷的準(zhǔn)確率〔76.92%(30/39)〕，P＜0.05。詳見(jiàn)表2。

表2 對(duì)比檢查后兩組患者病情診斷的準(zhǔn)確率[%(n)]

3 討論

臨床研究發(fā)現(xiàn)，使用免疫組化染色法對(duì)病理切片進(jìn)行染色能夠放大抗原、抗體的信號(hào)，防止鏈霉菌抗生物素蛋白的形成及背景染色，從而可有效地提高切片的染色質(zhì)量[4]。周建云等[5]研究指出，在對(duì)病理切片進(jìn)行染色的過(guò)程中應(yīng)注意做好抗原修復(fù)處理，以防止出現(xiàn)無(wú)色片和假陰性片的情況。本研究的結(jié)果顯示，觀察組患者病理切片染色質(zhì)量的優(yōu)良率及檢查后其病情診斷的準(zhǔn)確率均高于對(duì)照組患者，P＜0.05。

綜上所述，對(duì)接受肝臟穿刺組織病理檢查患者的病理切片進(jìn)行免疫組化染色的效果較好。此法值得在臨床上推廣應(yīng)用。