馬曉軍 楊文勇 李治鵬 楊帆 蔡海艷

（廣元市中心血站 四川 廣元 628017）

膠體金免疫層析技術(shù)，其原理為將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標(biāo)記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結(jié)合墊上，當(dāng)待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后，通過毛細(xì)作用向前移動(dòng)，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑后相互反應(yīng)，當(dāng)移動(dòng)至固定的抗原或抗體的區(qū)域時(shí)，待檢物與金標(biāo)試劑的結(jié)合物又與之發(fā)生特異性結(jié)合，聚集在檢測(cè)帶上，形成可肉眼觀察到的顯色結(jié)果。該種檢測(cè)方法具有結(jié)果判定清晰快速、具有較好的特異度和靈敏度且操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)[1]。為進(jìn)一步保證臨床用血安全，降低血液HBV及TP陽性報(bào)廢率，我站于2017年2月開始采用乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條（膠體金法），進(jìn)行獻(xiàn)血前快速篩查。

1.材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

所有檢測(cè)標(biāo)本均來自廣元市2015年7月—2018年7月的84141例無償獻(xiàn)血者，獻(xiàn)血者年齡18至55歲，均體檢合格，ALT試紙條篩查ALT＜50U/L，硫酸銅比重法測(cè)量血紅蛋白，結(jié)果均符合要求。其中2015年7月—2017年1月獻(xiàn)血者樣本，為未開展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合快速篩查項(xiàng)目前的樣本；2017年2月—2018年7月的獻(xiàn)血者樣本，為經(jīng)乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條快速篩查后HBsAg及TP陰性樣本。

1.2 儀器與試劑

儀器：低溫低速離心機(jī)、冰箱、冰柜、Hamilton STAR全自動(dòng)加樣儀、FAME全自動(dòng)酶免檢測(cè)儀。

試劑：獻(xiàn)血前篩查采用乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑（廈門英科創(chuàng)新），進(jìn)行HBsAg、抗-TP快速檢測(cè)，試劑批號(hào)：2016123354、2017043311、2017113338、2018023308。ELISA采用兩種不同廠家的酶免試劑進(jìn)行HBsAg、抗-TP檢測(cè)，HBsAg 檢測(cè)試劑：乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒，批號(hào)：B20160823、B20170102（北京萬泰生物）6G0215、6M0223（法國(guó)伯樂）；TP檢測(cè)試劑：梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒，批號(hào)：N20170309、N20170309、N20161130（北京萬泰生物），2017020308、2017041108、2016092108（珠海麗珠）。

1.3 方法

1.3.1 快速篩查方法 對(duì)2017年2月—2018年7月無償獻(xiàn)血者樣本，采用乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條進(jìn)行快速檢測(cè)。

1.3.2 ELISA檢測(cè)方法 對(duì)快速檢測(cè)合格且其他篩查結(jié)果均符合要求的無償獻(xiàn)血者樣本進(jìn)行ELISA試驗(yàn)。試驗(yàn)嚴(yán)格按照《血站技術(shù)操作規(guī)程（2015版）》要求，同時(shí)采用2種不同廠家生產(chǎn)的ELISA試劑樣本進(jìn)行HBsAg及TP抗體檢測(cè)，檢測(cè)過程按照SOP及試劑使用說明書進(jìn)行。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析開展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條進(jìn)行快速檢測(cè)前、后的血液HBV及TP陽性報(bào)廢率。

2.結(jié)果

2015年7月—2017年1月，未開展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條快速篩查項(xiàng)目前，41674例無償獻(xiàn)血者樣本中共計(jì)檢出HBV陽性樣本336例，占比0.81%，TP陽性樣本409例，占比0.98%。見表1。

表1 41674例標(biāo)本中HBV、TP陽性標(biāo)本比例

2017年2月—2018年7月，開展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條快速篩查項(xiàng)目后，42467例初篩合格無償獻(xiàn)血者樣本中共計(jì)檢出HBV陽性樣本317例，占比0.75%，TP陽性樣本200例，占比0.47%。見表2

表2 42467 例標(biāo)本中HBV、TP陽性標(biāo)本比例

3.討論

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （ELISA）是指將抗原抗體的特異性免疫反應(yīng)與酶的催化反應(yīng)相結(jié)合的檢測(cè)技術(shù)。其具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，利于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。ELISA檢測(cè)具有比膠體金法更高的靈敏度及特異度，但ELISA檢測(cè)需要借助特定的檢測(cè)設(shè)備，對(duì)環(huán)境、溫度等有較高的要求，且耗時(shí)較長(zhǎng)[2]，因此采供血機(jī)構(gòu)對(duì)獻(xiàn)血者標(biāo)本的檢測(cè)一般為血液標(biāo)本采集結(jié)束后進(jìn)行。膠體金法具有操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判定清晰快速等優(yōu)點(diǎn)，但相比于ELISA法，其靈敏度差，弱陽性多，容易出現(xiàn)漏檢；溶血及脂血的影響也會(huì)造成現(xiàn)假陰性[3]。

長(zhǎng)久以來，減少對(duì)不合格血液采集所造成的資源浪費(fèi)，降低成本，提升獻(xiàn)血服務(wù)效率及水平，進(jìn)一步保障了臨床用血安全，一直是采供血機(jī)構(gòu)的關(guān)注熱點(diǎn)，因此對(duì)無償獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前采用操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判定清晰快速的膠體金法進(jìn)行快速篩查就顯得尤為重要。文獻(xiàn)表明，HBsAg、TP金標(biāo)試紙條技術(shù)在獻(xiàn)血前檢測(cè)中得到了廣泛應(yīng)用，有效降低了血液檢測(cè)不合格率[4-5]。

我站檢測(cè)結(jié)果，2015年7月—2017年1月，未開展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條進(jìn)行快速篩查前，41674例無償獻(xiàn)血者樣本中共計(jì)檢出HBV陽性樣本336例，占比0.81%，TP陽性樣本409例，占比0.98%。2017年2月—2018年7月，開展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條進(jìn)行快速篩查后，42467例初篩合格無償獻(xiàn)血者樣本中共計(jì)檢出HBV陽性樣本317例，占比0.75%，TP陽性樣本200例，占比0.47%。對(duì)比可知，開展聯(lián)合快速篩查項(xiàng)目后，HBV及TP陽性率均低于項(xiàng)目開展前，其中TP陽性率降低最為明顯。

因我站開展乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條進(jìn)行快速篩查前，對(duì)HBV采用了HBsAg單項(xiàng)目檢測(cè)試紙條進(jìn)行快速篩查，所以HBV陽性率降低不多，但仍使HBV陽性率由0.81%降低到0.75%。可見乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條與HBsAg單項(xiàng)目試紙條相比，具有更高的靈敏度。其原因?yàn)橐倚透窝撞《颈砻婵乖? 梅毒聯(lián)合檢測(cè)試紙條采用膠體金，其分子量大、穩(wěn)定、顯色持久、遷移速度慢，具有更好的潛在穩(wěn)定性、精確性及可重復(fù)生產(chǎn)性等特點(diǎn)使得其適合于在快速檢測(cè)中的應(yīng)用[6]。

綜上所述，乙型肝炎表面抗原/梅毒螺旋體抗體聯(lián)合檢測(cè)試紙條有一定的特異性及敏感性，能有效降低采供血機(jī)構(gòu)對(duì)不合格血液采集所造成的資源浪費(fèi)，進(jìn)一步保障了臨床用血安全，對(duì)于獻(xiàn)血前篩查具有重要意義。