潘琳

阿克蘇地區(qū)檢驗檢測中心 新疆阿克蘇 843000

酶標(biāo)儀一般在食品工業(yè)、臨床檢驗等方面被廣泛使用，其主要是對樣本進(jìn)行檢測，對樣本進(jìn)行定量或者定性的檢測，一般通過吸光度進(jìn)行確定。但在實際檢測的過程中，其會受到保溫、洗滌等多方面的因素影響，進(jìn)而使得測量結(jié)果發(fā)生變化。因此，如果想要提升測量結(jié)果的精準(zhǔn)性，就必須要對測量過程中的質(zhì)量嚴(yán)格的把控，對酶標(biāo)儀進(jìn)行定期的計量。但縱觀國際上還沒有對其性能檢測和評價的相關(guān)完善報道，與此同時，國家在計量檢測中相應(yīng)的規(guī)程沒有得到良好的應(yīng)用和實施，因此導(dǎo)致在諸多的臨床實驗中，針對于酶標(biāo)儀沒有準(zhǔn)確且系統(tǒng)的計量檢測計劃。因此，通過筆者的實踐和探索，擬定了一套計量檢測的方式以供參考。

1 酶標(biāo)儀的結(jié)構(gòu)和工作原理

酶標(biāo)儀一般都是通過其產(chǎn)生的顯色反應(yīng)，并根據(jù)不同物質(zhì)對譜線的吸收原理，遵守朗伯比爾相關(guān)的定律，從而進(jìn)行相關(guān)分析的儀器，其主要通過比色法來進(jìn)行酶含量的確定。酶標(biāo)儀從某種方面來講就是一臺光電比色計，或者說其為分光光度計，因為其主要的工作原理、結(jié)構(gòu)都與光電比色計相同[1]。其主要由單色器、光源等系統(tǒng)組成。

2 酶標(biāo)儀計量檢測的必要性

在臨床工作中對血清或其他組織進(jìn)行測量，測量其中的酶的水平，對諸多疾病的診療都有著非常重要的作用。在測定酶的過程中，可以利用生物化學(xué)相關(guān)的方式對酶的活性進(jìn)行測量[2]。另外一種方式為將酶作為一種蛋白，繼而利用免疫方法來對其質(zhì)量進(jìn)行測定。相比來說測量酶的活性是最廣泛應(yīng)用的方式，主要源于其迅速、靈敏等優(yōu)勢，因此被廣泛的使用，其主要是通過酶標(biāo)儀來進(jìn)行相關(guān)的測定工作。與此同時，近些年來酶標(biāo)儀相關(guān)的技術(shù)也有所提升，進(jìn)而也有效提升了酶免疫分析法的質(zhì)量，其精準(zhǔn)度、自動化度明顯提高。最明顯的為近些年來進(jìn)口、國產(chǎn)的酶標(biāo)儀的質(zhì)量有所提高，但通過相關(guān)探究發(fā)現(xiàn)，雖然酶標(biāo)儀的發(fā)展迅速，但是關(guān)于其計量測量相關(guān)的方法仍不多見。其中由于太過簡單，或者太過具體，又或者過于籠統(tǒng)，從而導(dǎo)致沒有使用、通用的價值，也沒有良好的操作性。近些年來，酶標(biāo)儀已經(jīng)成為與臨床實驗、食品工業(yè)相關(guān)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)、食品廠家中的必備設(shè)備之一。但其在應(yīng)用中也是頻繁出現(xiàn)問題，因此對酶標(biāo)儀進(jìn)行質(zhì)量方面、性能方面的研究已迫在眉睫[3]。但我國關(guān)于酶標(biāo)儀相關(guān)的計量檢測規(guī)程沒有在實際中進(jìn)行嚴(yán)格的落實，也沒有足夠的實用性，但在實際工作中又必須對其進(jìn)行質(zhì)量控制和計量檢測。因此針對于不同廠家的酶標(biāo)儀進(jìn)行論證并建立相對完善的計量、檢測方式十分有必要。

3 酶標(biāo)儀計量檢測的方式

3.1 檢測濾光片波長的精準(zhǔn)度

濾光片的波長準(zhǔn)確度是通過檢測值檢取標(biāo)定值所產(chǎn)生的數(shù)值，其應(yīng)控制偏差在510nm以內(nèi)。

3.2 檢測酶標(biāo)儀吸光的穩(wěn)定度

在酶標(biāo)儀的吸光度方面，其吸光度值會因為漂移而產(chǎn)生變化，其在十分鐘之內(nèi)產(chǎn)生的變化數(shù)值應(yīng)該控制在0.005A以內(nèi)，而對其電壓的變動在百分之十的時候，酶標(biāo)儀相關(guān)的吸光度值應(yīng)該控制在0.003A以內(nèi)。

3.3 檢測酶標(biāo)儀在零點漂移值

在進(jìn)行該項檢測時，首先應(yīng)該準(zhǔn)備十個小孔杯，然后在小孔杯的通道中，在其相應(yīng)的位置中加入100ul的蒸餾水，同時將其調(diào)零，然后每過三十分鐘450nm時進(jìn)行一次測定，反復(fù)觀察到兩小時，所得出的測定值與原有的零點之間產(chǎn)生的差數(shù)值，則被視為零點漂移，其偏差應(yīng)該控制在0.003A以內(nèi)。

3.4 檢測酶標(biāo)儀吸光度的準(zhǔn)確值

首先要選取三塊標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片，這三塊濾光片要有不同的波長，然后對隨意選擇的三個通道進(jìn)行相關(guān)的平行測定，該測定每天要進(jìn)行兩次，總共測定達(dá)到六天，分別進(jìn)行計算每批內(nèi)、每天的每批之間、隔日間產(chǎn)生的精密度以及總精密度相關(guān)的CV百分比，同時要對其偏差進(jìn)行控制，要控制在0.09A以內(nèi)。

3.5 檢測酶標(biāo)儀的線性

當(dāng)在450nm單波長狀態(tài)中時，要使用蒸餾水來進(jìn)行調(diào)零的工作，然后再采用五塊標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片，同樣也要選取不同波長的濾光片，然后隨意選擇對應(yīng)的五個通道進(jìn)行平行測定工作，同樣是總共測定六天，且每天要進(jìn)行兩次測定。然后進(jìn)行回歸方程的計算，在方程中利用r來表示相關(guān)的系數(shù)，用sy.x來表示其標(biāo)準(zhǔn)估計誤差。與此同時要控制器偏差在百分之五以內(nèi)。

4 結(jié)語

酶標(biāo)儀在我國臨床實驗、食品工業(yè)等方面有著越來越多的應(yīng)用，因此在實際對其應(yīng)用的過程中，需要定期的校準(zhǔn)，同時利用較為系統(tǒng)、完善的校準(zhǔn)方式進(jìn)行校準(zhǔn)工作，這是從事關(guān)于臨床實驗相關(guān)工作的人員的首要任務(wù)，其可以提升相關(guān)檢測結(jié)果的精準(zhǔn)度和可比性。