胡曉霞,李 毅,熊 琳

(1.四川省人民醫(yī)院東院皮膚性病科，成都 610101；2.四川大學(xué)華西醫(yī)院皮膚性病科，成都 610041)

尖銳濕疣(condyloma acuminatum，CA)是因人乳頭瘤病毒感染而引起的復(fù)發(fā)性較高、常見(jiàn)的性傳播疾病，主要表現(xiàn)在生殖器肛門部位[1]。流行病學(xué)調(diào)查顯示尖銳濕疣多發(fā)病于16～30歲的性活躍人群，女性發(fā)病率高于男性，近年來(lái)其發(fā)病率有上升趨勢(shì)，在性病中僅次于淋病，居第2位[2-3]。尖銳濕疣的病理特征為表皮乳頭瘤樣增生伴角化不全，真皮淺層的毛細(xì)血管擴(kuò)張，顆粒層、棘層上部出現(xiàn)空泡化細(xì)胞。多數(shù)患者在早期無(wú)明顯癥狀，隨著病程的進(jìn)展，可出現(xiàn)肛門及外生殖器皰疹，且有一定的傳染性[4]。當(dāng)前研究發(fā)現(xiàn)尖銳濕疣的復(fù)發(fā)、消退及持續(xù)跟宿主的細(xì)胞免疫功能紊亂存在密切關(guān)系，其中細(xì)胞因子發(fā)揮顯著作用[5]。在尖銳濕疣患者體內(nèi)，Th1、Th2細(xì)胞出現(xiàn)功能失衡，使得Th1細(xì)胞因子的表達(dá)降低，有些Th2細(xì)胞因子出現(xiàn)上調(diào)表達(dá)的狀況[6]。Th1細(xì)胞分泌的干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)可抑制Th2細(xì)胞的功能，Th2細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-10、腫瘤壞死因子β(TNF-β),可抑制Th1細(xì)胞的功能。IFN-γ又稱免疫干擾素，一旦IFN-γ水平明顯降低，機(jī)體的抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗增殖作用就不能正常發(fā)揮。Th17細(xì)胞是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種CD4+T細(xì)胞亞群細(xì)胞，可特征性分泌IL-17，具有獨(dú)立的分化和發(fā)育調(diào)節(jié)機(jī)制[7]。本文旨在探討IL-17與IFN-γ在CA免疫發(fā)病機(jī)制中的作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 采用雙盲、回顧性及抽樣研究法，選擇2014年2月至2017年2月在四川省人民醫(yī)院皮膚性病科診治的CA患者112例作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合CA的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：3個(gè)月內(nèi)曾使用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制/調(diào)節(jié)藥劑患者；合并有其他系統(tǒng)性疾病患者；全身衰竭、結(jié)核、腫瘤、器官移植患者；已經(jīng)抗病毒治療或電灼、冷凍等物理治療的患者。其中男60例，女52例；年齡24～56歲，平均(37.55±5.89)歲；病程3～78個(gè)月，平均(62.28±26.28)個(gè)月；初治60例，復(fù)發(fā)52例；疣體發(fā)生在生殖器60例，肛周32例，會(huì)陰及混合感染20例。選擇同期在該院體檢的112例健康者作為對(duì)照組，檢測(cè)血清甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)、梅毒螺旋體抗體(TP-Ab)、人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體均呈陰性。其中男66例，女46例；年齡21～58歲，平均(37.11±6.72)歲。兩組對(duì)象都排除自身免疫性疾病及近3個(gè)月患有感染性疾病，以及處于哺乳期與妊娠期的婦女。本研究得到入選者同意，并獲得該院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2方法

1.2.1標(biāo)本采集 采集所有入選者的靜脈血3～5 mL，不要求空腹，全血離心(3 000 r/min離心10 min，離心半徑為10 cm)將血清凍存在-30 ℃冰箱中，分裝試管后進(jìn)行統(tǒng)一編號(hào)處理。

1.2.2檢測(cè)方法 采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)IL-17與IFN-γ水平，試劑盒均使用法國(guó)Immunotech公司生產(chǎn)的IL-17、IFN-γ抗體(批號(hào)：1672、1922)，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 結(jié) 果

2.1兩組對(duì)象 IL-17與IFN-γ水平比較 觀察組患者的血清IL-17水平明顯高于對(duì)照組，而IFN-γ水平明顯低于對(duì)照組，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組對(duì)象血清IL-17與IFN-γ水平比較

2.2觀察組患者IL-17與IFN-γ相關(guān)性分析及影響因素 Spearman秩相關(guān)法分析顯示，觀察組CA患者的IL-17與IFN-γ呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.452，P=0.003)。以CA患者的IL-17與IFN-γ作為因變量，以患者的臨床指標(biāo)(性別、年齡、病程、初治與復(fù)發(fā))作為自變量，多因素Logistic分析結(jié)果顯示，病程大于或大于3年(賦值：≥3年=1，<3年=0)與復(fù)發(fā)(賦值：復(fù)發(fā)=1，初治=0)為影響IL-17與IFN-γ水平的主要獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)，見(jiàn)表2、3。

表2 影響CA患者IL-17水平的主要因素

表3 影響CA患者IFN-γ水平的主要因素

3 討 論

當(dāng)前有研究顯示，造成人類乳頭瘤病毒(HPV)持續(xù)感染的原因是機(jī)體不能建立有效的免疫反應(yīng)，CA發(fā)病與否主要取決于患者體內(nèi)細(xì)胞免疫功能狀態(tài)。IFN-γ是一種因病毒、細(xì)菌等干擾素誘導(dǎo)劑經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)而產(chǎn)生的具有可溶性、低相對(duì)分子質(zhì)量的糖蛋白[8]。IL-18、IL-12可促進(jìn)T細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ，其可由樹(shù)突狀細(xì)胞、吞噬細(xì)胞和活化的T細(xì)胞分泌。IFN-γ能保護(hù)細(xì)胞免受病毒感染，增強(qiáng)NK細(xì)胞活性，從而增強(qiáng)其吞噬與殺傷功能，調(diào)節(jié)細(xì)胞分化。IFN-γ也可增強(qiáng)主要的組織相容性復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ類抗原(MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ)表達(dá)，增強(qiáng)B細(xì)胞增殖與成熟，對(duì)抗Th2細(xì)胞功能，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫，降低腫瘤細(xì)胞及病毒感染細(xì)胞表面封閉抗體的水平[9]。IL-17是Th17細(xì)胞釋放的致炎性細(xì)胞因子，能夠激活T淋巴細(xì)胞，并刺激內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞產(chǎn)生IL-6、IL-8等，從而導(dǎo)致炎癥的產(chǎn)生[10]。本研究顯示CA患者伴隨有血清IL-17水平上升與IFN-γ水平下降。

Th1和Th2細(xì)胞的相互平衡直接影響機(jī)體的免疫功能，與疾病的發(fā)生密切相關(guān)，一些感染性疾病的發(fā)生與發(fā)展與Th1、Th2細(xì)胞的失衡有關(guān)。CA患者Th1與Th2出現(xiàn)功能失衡，使得Th2細(xì)胞因子的相對(duì)表達(dá)量增加，Th1細(xì)胞因子表達(dá)減少。IFN-γ主要是由Th1細(xì)胞分泌，能放大免疫應(yīng)答的識(shí)別階段，廣泛使各種類型的細(xì)胞表達(dá)MHC-Ⅱ類抗原，具有廣譜抗病毒作用[11]。IL-17通過(guò)各種刺激因子包括細(xì)菌和各種炎癥因子刺激產(chǎn)生[12]。本研究Spearman秩相關(guān)法分析顯示CA患者的IL-17與IFN-γ呈負(fù)相關(guān)(r=-0.452，P=0.003)。從機(jī)制上分析，IFN-γ可以增強(qiáng)NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的抗炎效應(yīng)，對(duì)炎癥細(xì)胞具有一定的殺傷效應(yīng)。有研究表明機(jī)體的免疫防御功能可以分泌致炎性細(xì)胞因子來(lái)誘導(dǎo)或調(diào)控免疫細(xì)胞、細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)，達(dá)到抗病毒的免疫調(diào)節(jié)作用[13]。

CA治療后的復(fù)發(fā)率較高，復(fù)發(fā)也常見(jiàn)在原發(fā)部位的皮膚黏膜。研究發(fā)現(xiàn)CA的復(fù)發(fā)、消退及持續(xù)跟宿主的細(xì)胞免疫功能紊亂存在密切關(guān)系，其中細(xì)胞因子發(fā)揮明顯作用[14]。本研究多因素Logistic分析顯示，CA患者的病程大于或等于3年與復(fù)發(fā)為影響IL-17與IFN-γ的主要獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。有研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)患者與初治患者比較，前者血清的IL-23水平明顯較高，在血清的IL-17水平方面，兩組無(wú)明顯差異，表明復(fù)發(fā)患者的IL-17/IL-23可能有某種障礙。尤其是CA患者的IL-12與IFN-γ水平明顯降低，明顯削弱了二者產(chǎn)生的協(xié)同作用，降低了機(jī)體抗病毒免疫應(yīng)答，導(dǎo)致病程延長(zhǎng)。也有研究表明CA局部組織中免疫活性細(xì)胞分泌IFN-γ水平下降或受到抑制，從而使機(jī)體清除殘留HPV的能力低下，導(dǎo)致CA治療后復(fù)發(fā)現(xiàn)象[15]。但I(xiàn)FN-γ、IL-17等細(xì)胞因子之間是不是存在互相誘生，還需要進(jìn)一步研究。

綜上所述，CA患者伴隨IL-17表達(dá)升高與IFN-γ表達(dá)降低，與患者的病程與復(fù)發(fā)情況明顯相關(guān)。