唐 靜 袁秀芝

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院藥劑科，武漢 430077

黃芪螺旋藻分散片是華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院藥劑科自制制劑，主要由黃芪(浸膏)、螺旋藻(粉)以及適量的微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉等賦形劑研制而成，具有降低血糖、增強(qiáng)免疫的作用。分散片系指在水中能迅速崩解并均勻分散的片劑，生物利用度較高；故將黃芪和螺旋藻制成分散片能快速有效的增強(qiáng)機(jī)體對(duì)藥物的吸收力[1]。本研究對(duì)所制備的黃芪螺旋藻分散片的溶出特征進(jìn)行考察，分析其溶出性能，以期為其進(jìn)一步的研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥品

黃芪(湖北天濟(jì)中藥材飲片公司，批號(hào)：20170125)，打粉后過80目篩制備浸膏粉[2]；螺旋藻粉(云南程海股份有限公司，批號(hào)：20161117)；D-無水葡萄糖(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：110833-201503)；蒸餾水，濃硫酸，鹽酸，甲醇，黃芪螺旋藻分散片(自制)[2]。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

ZF-6紫外分光光度儀(上海嘉鵬科技有限公司)、BSA124S分析天平(德國(guó)Sartorius)、VGT-1990QT超聲提取儀(深圳固特宏業(yè)設(shè)備有限公司)等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 溶液的制備

1.2.1.1 對(duì)照品溶液 精密稱取D-無水葡萄糖，溶于適量蒸餾水中，配制成濃度為0.15 mg·mL-1的溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8 mL，用蒸餾水補(bǔ)齊至2 mL備用，再加入5%苯酚試劑1 mL及濃硫酸溶液5 mL后，以蒸餾水作為空白對(duì)照，在520 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，橫坐標(biāo)為葡萄糖的濃度，縱坐標(biāo)為對(duì)吸光度，得回歸方程為：Y=0.2744 X-0.0600(R=0.9994)，線性關(guān)系良好。

1.2.1.2 供試品溶液 取黃芪螺旋藻分散片10片，研磨成細(xì)粉，精密稱取適量，置于25 mL容量瓶中，加入甲醇10 mL，超聲提取30 min，離心，取上清；同法重復(fù)提取1次，合并上清液，用0.45 μm微孔濾膜過濾，取濾液加甲醇定容于25 mL容量瓶中，即得供試品溶液。

1.2.1.3 陰性樣品溶液 制備不含藥物的空白輔料分散片，按照“1.2.1.2”項(xiàng)方法，得到陰性樣品溶液。

1.2.2 方法學(xué)考察

1.2.2.1 方法專屬性考察 分別取葡萄糖對(duì)照品溶液，供試品溶液以及陰性樣品溶液，按照上述光譜條件進(jìn)行測(cè)定。

1.2.2.2 精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取對(duì)照品溶液，連續(xù)測(cè)定6次。

1.2.2.3 加樣回收實(shí)驗(yàn) 精密稱取含量已知的6份樣品，加入對(duì)照品溶液，測(cè)定吸光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算含量。

1.2.3 黃芪螺旋藻分散片溶出度考察

1.2.3.1 分散片溶出度試驗(yàn) 取同一批黃芪螺旋藻分散片6片，采用漿法，轉(zhuǎn)速為70 r/min，溫度為(37±0.5)℃，以水為溶出介質(zhì)，分別于10、20、40、60 min時(shí)測(cè)定累積溶出率，結(jié)果見表1。

1.2.3.2 不同批次分散片溶出度重復(fù)性的測(cè)定 選取3個(gè)不同批次的分散片，以水為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為70 r/min，溫度為(37±0.5)℃，分別于10、20、40、60 min計(jì)算累積溶出率，結(jié)果見表2。

1.2.3.3 不同pH值對(duì)分散片溶出度的影響 取分散片，在pH為1.5、4.5、6.5、8.5的不同溶出介質(zhì)中，轉(zhuǎn)速設(shè)定為70 r/min，溫度為(37±0.5)℃，分別于10、20、40、60、80 min計(jì)算累積溶出率并繪制溶出曲線，見圖1。

1.2.3.4 不同批次分散片在pH為6.5的溶出介質(zhì)中溶出度重復(fù)性測(cè)定 選取5個(gè)不同批次的分散片，在pH為6.5的溶出介質(zhì)中，轉(zhuǎn)速為70 r/min，溫度為(37±0.5)℃，分別于30、60、90、120 min計(jì)算累積溶出率，繪制時(shí)間-累積溶出率曲線，見圖2。

1.2.4 黃芪螺旋藻分散片分散均勻性檢查

取分散片6片，置于250 mL燒杯中，加入20℃的水100 mL，振搖3 min，觀察分散片崩解情況。

2 結(jié)果

2.1 方法學(xué)考察結(jié)果

陰性樣品溶液對(duì)供試品的測(cè)定無干擾，專屬性好；精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)測(cè)得吸光度RSD為2.01%(n=6)；加樣回收實(shí)驗(yàn)的平均加樣回收率為97.72%，RSD為1.52%。

2.2 黃芪螺旋藻分散片溶出度考察

2.2.1 6片分散片溶出度考察

6片分散片每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的累積釋放率的RSD均<5%，所制備的分散片在60 min內(nèi)平均累積溶出率達(dá)92.89%。見表1。

表1 同一批次6片分散片累積溶出率

2.2.2 不同批次分散片溶出重復(fù)性的測(cè)定

3個(gè)批次分散片在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)累積溶出率的RSD均<5%。見表2。

表2 不同批次分散片溶出重復(fù)性考察

2.2.3 不同pH值對(duì)分散片溶出度的影響

本實(shí)驗(yàn)選擇pH 1.5鹽酸溶液、pH 4.5鹽酸溶液、pH 6.5磷酸緩沖鹽、pH 8.5磷酸緩沖鹽溶液作為溶出介質(zhì)，在pH 6.5時(shí)，分散片的累積溶出率較高，60 min內(nèi)平均累積溶出率達(dá)到91.42%，而在其它pH條件下，累積溶出率不及在pH 6.5時(shí)高。見圖1。

圖1 不同pH值分散片累積溶出百分率

2.2.4 不同批次分散片在pH為6.5的溶出介質(zhì)中溶出度重復(fù)性測(cè)定

在pH為6.5的溶出介質(zhì)中，5個(gè)批次的分散片溶出均較為完全，在60 min平均累積溶出率為90.40%。見圖2。

圖2 不同批次分散片在pH為6.5的溶出介質(zhì)中溶出結(jié)果

2.3 黃芪螺旋藻分散片分散均勻性檢查

分散片全部崩解并通過內(nèi)徑為710 μm的篩孔，且分散均勻。

3 討論

《中國(guó)藥典》2015年版[3]將分散片收錄于片劑項(xiàng)下，要求分散片應(yīng)進(jìn)行溶出度和分散均勻性檢查，且應(yīng)符合規(guī)定。藥物溶出度是指活性藥物在片劑、膠囊劑或顆粒劑等普通制劑中于規(guī)定條件下溶出的速率和程度。藥物溶出度直接影響藥物在體內(nèi)的吸收和利用[4]?！吨袊?guó)藥典》2015年版四部通則(0931項(xiàng)下)記載的溶出度測(cè)定法有籃法、漿法、小杯法、槳碟法、轉(zhuǎn)筒法等，在本研究中由于制劑中含有一定量的黃芪多糖、螺旋藻多糖等成分，粘性較大，常用的籃法易使主藥粘附的轉(zhuǎn)籃上，故選擇了漿法測(cè)定分散片溶出度。

本文著重對(duì)黃芪螺旋藻分散片制劑的溶出度進(jìn)行了測(cè)定，選擇了以葡萄糖作為檢測(cè)指標(biāo)，考察了在水及不同pH溶質(zhì)中，分散片的累積溶出百分率。研究發(fā)現(xiàn)，分散片在以水作為溶出介質(zhì)時(shí)，在60 min時(shí)溶出較為完全，3批樣品在60 min內(nèi)累積溶出率達(dá)到92.51%；在考察不同pH值對(duì)分散片溶出度影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，pH值的大小對(duì)本分散片的累積溶出率有一定影響，其影響由小到大依次為pH 1.5

本研究還對(duì)分散片的分散均勻性進(jìn)行了考察。在《中國(guó)藥典》2015年版四部通則(0101項(xiàng)下)規(guī)定了分散均勻性測(cè)定方法，本研究6片分散片均在溫水中3 min內(nèi)全部溶散，符合藥典規(guī)定。

本試驗(yàn)在對(duì)溶出度的均一性進(jìn)行考察時(shí)發(fā)現(xiàn)，同一批次同一時(shí)間點(diǎn)分散片累積溶出度之間尚存在一定的差別，但隨著溶出時(shí)間的延長(zhǎng)，累積溶出率的RSD值逐漸變??；同時(shí)，在對(duì)不同批次分散片溶出度的重復(fù)性考察時(shí)發(fā)現(xiàn)，盡管溶出介質(zhì)不同，但隨著溶出時(shí)間越接近60 min，不同批次制劑RSD值也逐漸變小，且不同批次分散片之間最終累積溶出率均較為理想。出現(xiàn)上述原因可能是因?yàn)榉稚⑵谥苽涞倪^程中，制備工藝不太穩(wěn)定，這說明在后續(xù)的研究中，要逐步提高制劑性能的穩(wěn)定性。

分散片溶出度的測(cè)定是反映分散片制劑質(zhì)量是否合格的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。本文通過對(duì)自制制劑黃芪螺旋藻分散片溶出度相關(guān)指標(biāo)的考察，建立了其溶出度的測(cè)定方法。該方法能較客觀真實(shí)地反映出本制劑的溶出特點(diǎn)，為其進(jìn)一步的研究提供了科學(xué)數(shù)據(jù)。