黎海江，馮學(xué)冠，符曉玲，楊藝偉，黃 植

自身免疫性溶血性貧血(AIHA)患者的自身抗體可以引起紅細(xì)胞的破壞，從而出現(xiàn)溶血性貧血。AIHA患者自身抗體包括溫抗體、冷抗體和冷-熱混合型抗體。這些自身抗體的存在，不僅凝集自身紅細(xì)胞，同時(shí)也凝集供者紅細(xì)胞，對(duì)AIHA患者的輸血前鑒定試驗(yàn)帶來(lái)巨大的干擾，影響著輸血治療的安全性和療效[1]。本研究回顧性分析了128例AIHA患者的血清學(xué)特征及其對(duì)輸血前血型鑒定及交叉配血的影響，為AIHA患者的安全輸血提供參考。

1 資料與方法

1.1 病例資料 以2015年1月～2017年12月本院診治的AIHA患者128例為觀察對(duì)象，男性86例，女性 42 例，年齡 3～78（21.6±20.8）歲，未成年人82例，成年人46例。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 抗人球蛋白試驗(yàn) 取患者靜脈血6 ml，2000 r/min離心10 min，分離血清與紅細(xì)胞；生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次后，將紅細(xì)胞配成30 ml/L的紅細(xì)胞懸液，進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)（DAT）及間接抗人球蛋白試驗(yàn)（IAT）。DAT/IAT試劑盒購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司（國(guó)食藥監(jiān)械準(zhǔn)字2008第2400311號(hào)），按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作及結(jié)果判定。

1.2.2 血型鑒定及交叉配血試驗(yàn) 所有患者均在輸血前6 h內(nèi)采用EDTA抗凝真空采血管抽取靜脈血2 ml，進(jìn)行ABO、RH血型鑒定及交叉配血試驗(yàn)。ABO血型鑒定采用試管法，進(jìn)行正反定型，抗A、抗B標(biāo)準(zhǔn)血清購(gòu)自北京中聯(lián)安華科技公司。交叉配血采用凝聚胺試驗(yàn)法，試劑盒購(gòu)自上海博普生物技術(shù)有限公司，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。對(duì)血型鑒定及交叉配血結(jié)果判定困難者，進(jìn)行氯喹放散試驗(yàn)，具體操作及結(jié)果判定參照中國(guó)輸血技術(shù)操作規(guī)程進(jìn)行[2]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)數(shù)資料以例及百分率表示，不同組間比較采用R×C列表χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果 128例AIHA患者DAT均陽(yáng)性，強(qiáng)度在+～++++，以++和+++為主，占71.1%。IAT也均陽(yáng)性，強(qiáng)度同DAT相似，抗體類(lèi)型中以溫抗體型為主，其次是混合抗體型，冷抗體型最少。見(jiàn)表1。

2.2 血型鑒定及交叉配血結(jié)果 128例AIHA患者中，ABO血型正反定型不符65例（50.8%），隨著DAT陽(yáng)性強(qiáng)度的增高，ABO血型正反定型血型不符的發(fā)生率顯著升高（P＜0.05）；不同抗體類(lèi)型的AIHA患者血型正反定型不符合的發(fā)生率亦不相同（P＜0.05），其中冷抗體型最高，其次為混合抗體型，溫抗體型最低。128例患者中，72例（56.3%）交叉配血不相合，并且DAT陽(yáng)性強(qiáng)度越高，交叉配血不相合的發(fā)生率越高（P＜0.05）；不同抗體類(lèi)型的AIHA患者交叉配血不相合的發(fā)生率無(wú)顯著差異（P＞0.05）。溫抗體型血型正反不符者經(jīng)氯喹分散試驗(yàn)后，正反定型均相符；冷抗體型及混合抗體型中，ABO血型正反定型不符者經(jīng)37℃加熱、再經(jīng)氯喹分散試驗(yàn)后，正反定型均相符，見(jiàn)表2。

表1 AIHA患者抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果(n=128)

表2 不同DAT強(qiáng)度及抗體類(lèi)型AIHA患者血型及交叉配血結(jié)果［n(%)］

3 討論

由于AIHA患者存在自身抗體，可與紅細(xì)胞發(fā)生凝集而影響輸血治療，因此，原則上AIHA患者一般不進(jìn)行輸血治療，但對(duì)于貧血嚴(yán)重而危及生命時(shí)，不得不輸血治療。也正是由于自身抗體的存在，AIHA患者輸血前血型鑒定和交叉配血難度增加[4]。本研究首先對(duì)128例AIHA患者抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果及抗體類(lèi)型進(jìn)行了回顧性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，所有患者DAT或IAT均陽(yáng)性，陽(yáng)性程度以++或+++為主，證實(shí)AIHA患者中存在較高滴度的自身抗體，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]。另外，AIHA患者中抗體類(lèi)型以溫抗體型為主，冷抗體型或混合抗體型較少，說(shuō)明多數(shù)AIHA患者的這些抗體在35～40℃與紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]。

分析本組AIHA患者血型鑒定及交叉配血試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血型鑒定正反定型不符合者占50.8%，交叉配血不合者占56.3%，可見(jiàn)AIHA患者容易造成血型鑒定困難及交叉配血不合，這直接影響著患者輸血的安全性。這主要是由于AIHA患者體內(nèi)存在自身抗體，這種抗體不僅造成自身紅細(xì)胞的凝集，同時(shí)還可與供血紅細(xì)胞凝集，影響著血型鑒定及交叉配血結(jié)果[6]。另外，本研究還發(fā)現(xiàn)，DAT陽(yáng)性強(qiáng)度越高，血型正反定型不符合及交叉配血不合的發(fā)生率越高，表明DAT陽(yáng)性強(qiáng)度與血型定型不符合及交叉配血不合相關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]。AIHA患者DAT陽(yáng)性強(qiáng)度越高，在一定程度上反映自身抗體的水平越高，越容易造成自身或供血紅細(xì)胞的凝集，從而越容易影響血型定型及交叉配血結(jié)果。由于本組資料中無(wú)RH陰性標(biāo)本，故對(duì)RH定型的影響未納入研究。

發(fā)現(xiàn)血型正反鑒定不符合或交叉配血結(jié)果不合時(shí)，如何處理以保證結(jié)果的可靠性，是對(duì)輸血科工作人員的考驗(yàn)。對(duì)溫抗體型患者，采用氯喹分散試驗(yàn)可有效去除紅細(xì)胞表面的自身抗體，從而減少和抑制紅細(xì)胞凝集，從而保證血型正反定型相符[1,4]。本組對(duì)溫抗體型血型正反定型不符合的AIHA患者進(jìn)行了氯喹分散試驗(yàn)后，均正反定型相符，排除了自身抗體對(duì)血型鑒定的影響。對(duì)于冷抗體型或混合抗體型，由于冷抗體的存在，選擇37℃溫浴或紅細(xì)胞熱洗滌等方式，可去除自身抗體對(duì)交叉配血或血型鑒定的影響[7]。本組對(duì)冷抗體型或混合抗體型AIHA患者在37℃水浴后再進(jìn)行氯喹分散試驗(yàn)，能夠有效清除對(duì)血型鑒定和交叉配血結(jié)果的影響。

綜上所述，AIHA患者自身抗體類(lèi)型以溫抗體型為主，容易造成血型正反定型不符合及交叉配血不合，并且DAT強(qiáng)度與血型不符及交叉配血不合相關(guān)。采取氯喹分散試驗(yàn)或37℃溫浴去除自身抗體的影響，可減少血型不符及交叉配血不合發(fā)生率。