李衛(wèi)國(guó)
在現(xiàn)代社會(huì),衰老一直是困擾每個(gè)女性的問(wèn)題。為了延緩衰老,都想盡辦法,如去美容院、打美容針、做手術(shù)、吃保健品等。其中抗氧化保健品是最常用的手段??寡趸=∈称分杂醒泳徦ダ系淖饔茫饕且?yàn)樵摲N保健品對(duì)人體內(nèi)的蛋白質(zhì)有保護(hù)功能。但也恰恰因?yàn)檫@個(gè)原因,許多不法商家為盈利,許多產(chǎn)品并沒(méi)有達(dá)到國(guó)家生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn),針對(duì)這一情況,對(duì)抗氧化保健食品進(jìn)行檢測(cè)勢(shì)在必行。蛋白質(zhì)羰基含量與人體衰老程度有著直接關(guān)系,蛋白質(zhì)羰基含量越多,表明人體越衰老。所以本次研究將三種抗氧化保健食品喂給老齡小白鼠,然后通過(guò)2.4-二硝基苯肼比色法測(cè)定白鼠體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量,建立以蛋白質(zhì)羰基含量為檢測(cè)指標(biāo)的評(píng)價(jià)抗氧化保健食品質(zhì)量的方法。
實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)儀器:上海精科公司生產(chǎn)的型號(hào)為HI- 77s的分光光度計(jì);北京時(shí)代北利離心機(jī)有限公司生產(chǎn)的型號(hào)為J GG- 38s離心機(jī)。
實(shí)驗(yàn)試劑:蛋白酶抑制劑、N- 2-羥乙基哌嗪- 2-乙磺酸、鹽酸胍、2.4-二硝基苯肼。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:昆明種50周齡雌性小鼠4只。本實(shí)驗(yàn)所用動(dòng)物均來(lái)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所繁育場(chǎng)提供的健康二級(jí)昆明種小鼠(動(dòng)物許可證編號(hào):XCK97089)。
實(shí)驗(yàn)方法
首先取1個(gè)小白鼠體內(nèi)組織,然后將其放入5毫升的勻漿緩沖液當(dāng)中,然后利用J GG-38s離心機(jī)對(duì)其進(jìn)行攪碎處理,然后將其放入溫室當(dāng)中10min,等待檢測(cè)。
然后將另外三只小白鼠分別喂入三種不同的氧化保健食品,經(jīng)過(guò)24小時(shí)后,將其殺死,取出體內(nèi)組織,然后重復(fù)上述試驗(yàn)步驟,等待2.4-二硝基苯肼比色法的測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)測(cè)定
在上述處理好的白鼠組織中加入3ml2.4-二硝基苯肼的溶液,室溫下放置1個(gè)小時(shí),之后加入2ml的N- 2- 羥乙基哌嗪- 2-乙磺酸和3ml的蛋白酶抑制劑,再次靜置1個(gè)小時(shí),然后進(jìn)行過(guò)濾,得到碎組織,加入鹽酸胍溶液,并充分震蕩,最后用HI- 77s的分光光度計(jì)進(jìn)行吸光度測(cè)定,以摩爾消光系數(shù)計(jì)算蛋白質(zhì)羰基含量。
結(jié)果分析
測(cè)定結(jié)果如表1所示。
從表1中可以看出,小白鼠在沒(méi)有喂過(guò)抗氧化保健品之前,其蛋白質(zhì)羰基含量為0.85±0.10 nmol/mg;而喂過(guò)抗氧化保健品之后,三只小白鼠的蛋白質(zhì)羰基含量分別為0.62±0.10 nmol/mg、0.83±0.10 nmol/mg、0.76±0.10 nmol/mg,與之前對(duì)比,三只小白鼠的體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量均有所降低,但是下降的程度有所不同。首先小白鼠2號(hào)體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量下降的最多,說(shuō)明喂給小白鼠2號(hào)的抗氧化保健品功效最好;其次是小白鼠4號(hào),其體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量下降了0.09±0.10nmol/ mg,說(shuō)明喂給小白鼠4號(hào)的抗氧化保健品存在一定延緩衰老的功效;最后是小白鼠3號(hào),其體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量較之前沒(méi)有明顯的下降,說(shuō)明喂給小白鼠3號(hào)的抗氧化保健品幾乎沒(méi)有什么功效,質(zhì)量完全不過(guò)關(guān)。
綜上所述,抗氧化保健食品是當(dāng)前主要的抗衰老產(chǎn)品之一。因其具有巨大市場(chǎng)潛力,市面上的抗氧化保健食品的質(zhì)量參差不齊,所以必須對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。本次研究將蛋白質(zhì)羰基含量作為衡量標(biāo)準(zhǔn),通過(guò)2.4-二硝基苯肼比色法測(cè)定白鼠體內(nèi)的蛋白質(zhì)羰基含量變化情況,以此來(lái)判斷產(chǎn)品的功效。