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        一起由細菌污染引起的食物中毒的實驗室檢測分析

        2018-11-16 09:02:14白李明楊志強葉聿程安溪縣疾病預防控制中心
        食品安全導刊 2018年27期
        關鍵詞:土豆絲微生物學沙門氏菌

        □ 白李明 楊志強 葉聿程 安溪縣疾病預防控制中心

        2018 年 9 月 19 日 16∶00, 縣 疾病預防控制中心接到縣某醫(yī)院報告,縣某醫(yī)院消化內科、兒科于9月19日14∶00左右收住有共同進餐史的食源性疾病病人3例。接到報告后,縣疾控中心馬上啟動預案,上報縣衛(wèi)計局,并迅速派出相關業(yè)務人員配合市場局展開調查和現(xiàn)場采樣工作。

        本次事件屬于家庭式食物中毒事件,共同就餐人數(shù)5人,其中有3人食用了土豆絲餅,均出現(xiàn)惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、發(fā)熱、乏力等疑似食物中毒癥狀,2人未食用(未發(fā)病)?;颊甙l(fā)病的潛伏期在9~12 h,3名患者均來自同一家庭,其中男性2人,女性1人,年齡最大55歲,最小7歲,平均年齡31歲。縣疾控中心實驗室對采集的四份可疑食物中毒樣品進行致病菌檢測,報道如下。

        1 材料與方法

        1.1 樣品來源

        共采集可疑食物中毒樣品2份,采集患者肛拭子2份。

        1.2 培養(yǎng)基及儀器試劑

        XLD瓊脂,廣東環(huán)凱;營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(平板),廣東環(huán)凱;沙門氏菌生化鑒定盒(GB標準),廣東環(huán)凱;沙門氏菌屬診斷血清,寧波天潤;革蘭氏陰性細菌鑒定卡,梅里埃診斷產品(上海)有限公司;SC增菌液,廣東環(huán)凱;沙門、志賀、副溶、金匍核酸檢測試劑盒,生科原,深圳寶安區(qū);生化培養(yǎng)箱,上海佳勝實驗設備有限公司;HR40-ⅡA2型Haier生化安全柜,青島海爾特種電器有限公司;Nikon生物顯微鏡,Nikon;StepOne實 時 熒 光 定 量PCR儀,Applied Biosystems;Vitek2 Compact全自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng),生物梅里埃中國有限公司。

        1.3 檢驗方法

        根據(jù)GB4789.4-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》、GB4789.5-2012《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 志賀氏菌檢驗》、GB4789.10-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗》、GB4789.7-2013《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 副溶血性弧菌檢驗》的預增菌、增菌、分離、鏡檢、生化試驗和血清學試驗[1-3],最后StepOne實時熒光定量PCR 儀和 Vitek2 Compact全自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)上機完成確認試驗。

        2 結果

        2.1 樣品中沙門氏菌檢驗結果

        根據(jù)GB4789.4-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》進行可疑食物中毒樣品的檢測。從圖1、2、3可以看出,存在可疑菌株在XLD上生長,菌落形態(tài)均呈全部黑色的菌落;從圖4可以看出,通過革蘭氏染色鏡檢,菌株被染成紫紅色,為革蘭氏陰性菌;從圖5可以看出,經(jīng)過StepOne實時熒光定量PCR儀測定,各樣品分離到的菌株均與陽性標準品一致,為沙門氏菌;通過Vitek2 Compact全自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)上機確認均為沙門氏菌。

        圖1 肛拭子01(G01)在XLD上的菌落

        圖2 肛拭子02(G02)在XLD上的菌落

        圖3 剩余食物在XLD上的菌落

        圖4 可疑菌株革蘭氏染色(10×100)

        圖5 各樣品分離到的菌株在熒光定量PCR上的圖譜

        2.2 樣品中志賀氏菌檢驗結果

        根據(jù)GB4789.5-2012《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 志賀氏菌檢驗》進行可疑食物中毒樣品的檢測和StepOne實時熒光定量PCR儀的測定(見圖5),檢測結果均未檢出志賀氏菌。

        2.3 樣品中副溶血性弧菌檢驗結果

        根據(jù)GB4789.7-2013《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 副溶血性弧菌檢驗》進行可疑食物中毒樣品的檢測和StepOne實時熒光定量PCR儀的測定(見圖5),檢測結果均未檢出副溶血性弧菌。

        2.4 樣品中金黃色葡萄球菌檢驗結果

        GB4789.10-2016《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 金黃色葡萄球菌檢驗》進行可疑食物中毒樣品的檢測和StepOne實時熒光定量PCR儀的測定(見圖5),檢測結果均未檢出金黃色葡萄球菌。

        3 討論

        根據(jù)縣疾控中心流行病學調查、病人的臨床表現(xiàn)和實驗室監(jiān)測結果,該起可疑食物中毒事件可判定為一起沙門氏菌污染土豆絲餅所致的食物中毒,其判定依據(jù)如下:①患者癥狀以惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉(水樣便)、發(fā)熱、乏力為主,潛伏期在9~12h,符合沙門氏菌食物中毒的特點;②發(fā)病者3人均食用了土豆絲餅,有共同進餐史,一起進餐但未食用土豆絲餅的2人未發(fā)??;③兩名患者的肛拭子及患者食用剩下的土豆絲餅均檢出沙門氏菌。

        沙門氏菌的最適繁殖溫度為37 ℃,在20 ℃以上即能大量繁殖,對熱抵抗力不強,在60 ℃10~20 min即可被殺死。沙門氏菌食物中毒易發(fā)生于夏季5-9月,易受沙門氏菌污染的食品主要為動物食品,如熟肉類、蛋類、涼菜,被污染的食品在夏季溫度較高下存放時間過長,并在食用前未徹底加熱,將會導致細菌大量生長繁殖,食用后易引起食物中毒。因此,低溫儲存食品,生熟嚴格分開,食用時要煮熟、煮透,即能防止沙門氏菌所致的食物中毒。

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