何彩華，曾祥興△，劉偉國(guó)

(河源市婦幼保健院：1.檢驗(yàn)科；2.婦科，廣東河源 517000)

卵巢儲(chǔ)備功能是生育期女性能否正常生育的重要影響因素，特別是在當(dāng)前優(yōu)生優(yōu)育的大背景下，準(zhǔn)確評(píng)價(jià)卵巢儲(chǔ)備功能有利于更好地指導(dǎo)和安排孕育計(jì)劃。抗繆勒氏管激素(AMH)和性激素是目前臨床上評(píng)價(jià)卵巢儲(chǔ)備功能常用的指標(biāo)。AMH是由兩個(gè)相同的亞基通過(guò)二硫鍵連接成的二聚糖蛋白，是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)超家族成員之一。在女性中，AMH僅在卵巢顆粒細(xì)胞中表達(dá)[1]。性激素6項(xiàng)主要包括卵泡生成激素(FSH)、黃體生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(PROG)、泌乳素(PRL)及睪酮(TEST)。本研究通過(guò)對(duì)806例同時(shí)接受AMH和性激素6項(xiàng)檢測(cè)的孕前保健女性進(jìn)行研究，探討AMH和性激素6項(xiàng)在評(píng)價(jià)卵巢儲(chǔ)備功能中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 2016年10月至2017年12月在本院婦科門(mén)診、女性保健科門(mén)診、生殖內(nèi)分泌?？崎T(mén)診進(jìn)行孕前檢查的育齡期女性806例，年齡19～47歲。所選取病例應(yīng)同時(shí)進(jìn)行血清AMH水平和性激素水平檢測(cè)，月經(jīng)周期規(guī)則(周期為21～35 d)，并且無(wú)甲狀腺功能減低等影響月經(jīng)的內(nèi)分泌疾病，近3個(gè)月均無(wú)任何激素類藥物治療史，既往無(wú)子宮附件手術(shù)史。將納入研究的806例孕前檢查的育齡女性按年齡階段分為5組(<25、25～<30、30～<35、35～<40、≥40歲)；根據(jù)FSH/LH再將納入研究的806例育齡女性分為4組(FSH/LH≤1為A組；13為D組)。所有研究對(duì)象均自愿參與本研究，并簽署知情同意書(shū)，本研究獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法 患者均在月經(jīng)周期第2～3天靜脈采集血液標(biāo)本6 mL(干燥管兩支，一支進(jìn)行性激素檢測(cè)，一支進(jìn)行AMH檢測(cè))，室溫靜置60 min后，3 500 r/min速度離心10 min，分離血清后4 ℃保存，24 h內(nèi)完成性激素6項(xiàng)檢測(cè)，1周內(nèi)完成AMH檢測(cè)。血清AMH檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA法)，試劑盒購(gòu)于廣州市康潤(rùn)生物科技有限公司，試劑檢測(cè)線性范圍為0.06～18.00 ng/mL，相關(guān)系數(shù)(r)≥0.99，批內(nèi)變異系數(shù)(CV)≤10%，批間CV≤15%。采用深圳雷杜生命科學(xué)股份有限公司RT-6000酶標(biāo)儀檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)步驟均嚴(yán)格按試劑盒及儀器說(shuō)明書(shū)操作。

性激素6項(xiàng)檢測(cè)包括FSH、LH、E2、PROG、TEST及PRL，采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，UniCel DxI 800免疫分析系統(tǒng)和配套試劑盒均購(gòu)于美國(guó)Beckman Coulter公司，其中FSH檢測(cè)線性范圍為1.18～187.12 mIU/mL，r≥0.98，批內(nèi)CV≤5%，批間CV≤6%；LH檢測(cè)線性范圍為0.70～85.97 mIU/mL，r≥0.97，批內(nèi)CV≤6%，批間CV≤7%；E2檢測(cè)線性范圍為23.4～4 542.3 pg/mL，r≥0.98，批內(nèi)CV≤5%，批間CV≤6%；PROG檢測(cè)線性范圍為0.39～30.41 ng/mL，r≥0.978，批內(nèi)CV≤10%，批間CV≤10%；PRL檢測(cè)范圍為0.62～75.74 ng/mL，r≥0.99，批內(nèi)CV≤3%，批間CV≤7%；TEST檢測(cè)線性范圍為0.11～14.81 ng/mL，r≥0.98，批內(nèi)CV≤5%，批間CV≤6%；實(shí)驗(yàn)步驟均嚴(yán)格按照試劑盒及儀器說(shuō)明書(shū)操作。

2 結(jié) 果

2.1各年齡組女性血清AMH和性激素水平比較 AMH血清水平隨年齡的增長(zhǎng)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，各年齡組間女性血清AMH水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各年齡組間女性性激素血清水平，除E2和PROG外，其他4項(xiàng)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各年齡組女性血清AMH和性激素水平

表2 各年齡組女性AMH≤1.1 ng/mL和AMH≥7.0 ng/mL的分布情況

表3 不同F(xiàn)SH/LH女性的AMH及性激素水平比較

2.2各年齡組女性AMH≤1.1 ng/mL和AMH≥7.0 ng/mL的分布情況 所有受檢者中AMH≤1.1 ng/mL的病例占18.11%，隨年齡增長(zhǎng)，所占構(gòu)成比逐漸增加，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。所有受檢者中 AMH≥7.0 ng/mL的病例占24.07%，隨年齡增長(zhǎng)，所占構(gòu)成比逐漸減少，其中≥40 歲年齡組中未見(jiàn)AMH≥7.0 ng/mL的病例，各年齡組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3不同F(xiàn)SH/LH女性的AMH及性激素水平比較 隨著FSH/LH的升高，F(xiàn)SH血清水平升高，AMH、LH、E2、PROG、PRL、TEST水平均降低，不同F(xiàn)SH/LH組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

3 討 論

育齡期是卵巢功能成熟的時(shí)期，也是生殖、內(nèi)分泌疾病高發(fā)，以及輔助生殖技術(shù)高需求的階段，準(zhǔn)確評(píng)估育齡期女性的卵巢功能對(duì)臨床醫(yī)師的診療有重要價(jià)值。如何更早、更準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)育齡期女性卵巢功能是臨床工作中非常重要的任務(wù)。目前，主要從影像學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)和年齡等方面去評(píng)價(jià)卵巢功能。但是，由于方法學(xué)上的局限性各種方法預(yù)測(cè)效果仍不理想[1-2]。

研究證實(shí)，AMH在次級(jí)卵泡、竇卵泡和直徑<4 mm 的竇狀卵泡的顆粒細(xì)胞中表達(dá)量最高，在直徑 4 mm及以上的卵泡中表達(dá)量逐漸降低，直至不表達(dá)[3]。本研究顯示<25歲育齡期女性AMH水平維持在一個(gè)比較高的水平，25～<30、30～<35歲有一個(gè)較大的下降幅度，但是在25～<30歲時(shí)的下降幅度則較小，≥40歲育齡女性的AMH血清水平則極低，可見(jiàn)，各年齡組女性血清AMH水平隨年齡的增長(zhǎng)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)(P<0.05)。近年來(lái)研究顯示，AMH在評(píng)估卵巢早衰和多囊卵巢綜合征(PCOS)方面具有較為明顯的優(yōu)勢(shì)[1]。有研究顯示，AMH>5 ng/mL對(duì)于PCOS具有較高的診斷價(jià)值[4]。另有研究顯示AMH>7.0 ng/mL診斷PCOS更加敏感[5]。本研究顯示所有受檢者中AMH≥7.0 ng/mL的病例構(gòu)成比隨年齡增長(zhǎng)而逐漸減少。據(jù)此推測(cè)，本地區(qū)中低年齡段育齡女性中PCOS發(fā)病率則更高，但仍然需要擴(kuò)大標(biāo)本量進(jìn)一步研究加以明確。關(guān)于AMH診斷PCOS的閾值尚未達(dá)成一致，因此仍需要排除各種混雜因素進(jìn)行深入研究。PCOS是育齡女性常見(jiàn)的疾病之一，PCOS在臨床上表現(xiàn)出較明顯的異質(zhì)性，給該疾病的診治帶來(lái)了一定的困難。有研究顯示AMH水平≤1.1 ng/mL是評(píng)價(jià)卵巢儲(chǔ)備功能降低的重要指標(biāo)之一[6]。本研究顯示所有受檢者中AMH≤1.1 ng/mL的病例占18.11%，隨年齡增長(zhǎng)所占構(gòu)成比逐漸增加，各年齡組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。據(jù)此推測(cè)，本地區(qū)中高年齡段女性中卵巢儲(chǔ)備功能降低發(fā)病率則更高。提示女性應(yīng)該根據(jù)自身情況評(píng)價(jià)自身卵巢功能。

FSH/LH也是臨床上較常用的指標(biāo)之一。在卵泡發(fā)育過(guò)程中，F(xiàn)SH和LH發(fā)揮著協(xié)同作用[7-8]。本研究顯示隨著FSH/LH的升高，F(xiàn)SH血清水平升高，AMH、LH、E2、PROG、PRL、TEST水平均降低，不同F(xiàn)SH/LH組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)?？梢?jiàn)FSH/LH和AMH血清水平具有類似的提示效應(yīng)。卵巢在正常生理狀態(tài)下能分泌抑制素，從而能抑制FSH的分泌。當(dāng)卵巢功能出現(xiàn)衰減時(shí)，抑制素分泌相應(yīng)減少，導(dǎo)致對(duì)FSH的抑制作用相應(yīng)減弱，致使FSH水平會(huì)明顯升高，引起FSH/LH也隨之升高[8-10]。因此，本研究并未獲得FSH/LH評(píng)價(jià)卵巢功能的閾值。卵巢功能異常對(duì)育齡女性生育功能的影響直接而明顯，目前對(duì)卵巢功能下降尚無(wú)有效的治療方法。因此，對(duì)于育齡女性卵巢功能的準(zhǔn)確預(yù)測(cè)對(duì)于制訂合理的妊娠計(jì)劃非常必要。本研究通過(guò)分析AMH和性激素水平在各年齡段中的差異，以及FSH/LH在評(píng)價(jià)卵巢功能方面的臨床應(yīng)用，提示25歲及以上育齡女性進(jìn)行卵巢功能評(píng)估具有重要意義。