臧鋒磊 周敬

【摘 要】目的：研究款冬花止咳化痰活性成分的作用靶點。方法：以款冬花止咳化痰相關(guān)的12個化合物為研究對象，基于網(wǎng)絡(luò)藥理學理論，采用反向藥效團匹配法，預(yù)測活性成分靶點，并和CooLGeN數(shù)據(jù)庫進行比對，構(gòu)建靶點網(wǎng)絡(luò)模型。結(jié)果：款冬花止咳化痰相關(guān)的潛在作用靶點有36個，主要靶點有GSTP1、MAPK14、ACHE、GSTA1、CFTR、VDR、ESR1、F2、GSTM1、MME、DAPK1；且不同活性成分可作用在相同靶點上，相同活性成分也可作用在不同靶點上。結(jié)論：款冬花止咳化痰作用具有多成分、多靶點的特點，為作用機制的研究提供科學依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】款冬花；止咳化痰；活性成分；靶點；網(wǎng)絡(luò)藥理學

【中圖分類號】R749.053

【文獻標志碼】 糎T〗

B 【文章編號】1005-0019（2018）12-100-02

款冬花具有止咳、祛痰、平喘的作用，是臨床上常用的中藥之一。就目前的研究而言[1]，款冬花中的咖啡?；崴犷惓煞?，具有止咳化痰活性；槲皮素、蘆丁、山柰酚等成分，也在其他藥材中證實了止咳祛痰作用。總結(jié)來看，款冬花止咳化痰的活性成分已經(jīng)證實，但作用機制尚不明確。本文利用網(wǎng)絡(luò)藥理學，以款冬花的活性成分為基準，構(gòu)建成分—通路—靶點網(wǎng)絡(luò)，深入探討止咳化痰的作用機制，報告如下：

1 資料與方法

1.1 建立標準格式文件 結(jié)合以往研究成果，已知款冬花止咳化痰相關(guān)的化合物有12個，分別是款冬花素、山奈酚、金絲桃苷、款冬酮、β-谷甾淳、綠原酸、咖啡酸、檞皮素、4，5-二咖啡?；崴?、3，5-二咖啡?；崴?、3，4-二咖啡?；崴?、蘆丁。利用ChemBioDraw Ultra軟件，畫出這些化合物的結(jié)構(gòu)圖，以sdf-mol格式進行保存。

1.2 靶點反向預(yù)測 輔助利用PharmMapper服務(wù)器，將款冬花活性成分sdf-mol格式文件上傳至服務(wù)器，通過反向藥效團匹配，得到虛擬篩選結(jié)果。然后選取活性小分子作為探針，對潛在藥物靶點進行搜查，并預(yù)測生物活性?？紤]到這些藥物靶點的命名不規(guī)范，本次實驗利用UniRrotKB搜索功能，限定物種為人，輸入蛋白名稱，將檢索到的蛋白類型確定為官方名稱，經(jīng)數(shù)據(jù)庫檢索和轉(zhuǎn)化，得到相關(guān)蛋白信息。

1.3 靶點篩選 匯總反向預(yù)測后的靶點信息，和CooLGeN數(shù)據(jù)庫中的咳嗽靶點進行比較，從而明確預(yù)測靶點中具有止咳化痰作用的靶點。

1.4 構(gòu)建靶點網(wǎng)絡(luò) 利用Cytoscape軟件的Merge功能，以款冬花靶點預(yù)測結(jié)果為準，構(gòu)建靶點網(wǎng)絡(luò)模型，網(wǎng)絡(luò)節(jié)點代表活動成分、靶點、作用通路。節(jié)點連接原則[2]：如果活性成分靶點、作用通路靶點相同，此時兩者用邊連接起來。

2 結(jié)果

2.1 靶點信息 款冬花潛在作 冒械愎布？00個，按照從高到低的順序進行排列，并和CooLGeN數(shù)據(jù)庫進行比較，結(jié)果得到36個和止咳化痰相關(guān)的潛在作用靶點，主要靶點信息見表1。

2.2 靶點數(shù)目 款冬花止咳化痰活性成分的靶點數(shù)目如下：款冬花素29個、山奈酚24個、金絲桃苷21個、款冬酮20個、β-谷甾淳20個、綠原酸19個、咖啡酸18個、槲皮素17個、4，5-二咖啡酰基奎尼酸14個、3，5-二咖啡酰基奎尼酸12個、3，4-二咖啡?；崴?1個、蘆丁11個。分析可知，不同活性成分可作用在相同靶點上，相同活性成分也可作用在不同靶點上，凸顯出多成分、多靶點的作用機制。

3 討論

款冬花屬于菊科款冬屬植物，具有止咳化痰、潤肺下氣的功效，主要用來治療咳痰、咳喘、咯血、氣管炎等疾病。此外，現(xiàn)代醫(yī)學研究表明[3]，款冬花對心血管系統(tǒng)的作用，體現(xiàn)在升壓、收縮血管、抗血小板聚集上；對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，體現(xiàn)在驚厥、呼吸興奮上；對消化系統(tǒng)的作用，體現(xiàn)在解痙、緩解腹瀉上。具體到止咳化痰功效，雖然相關(guān)成分已經(jīng)明確，但活性成分的作用靶點尚不清楚，本文基于網(wǎng)絡(luò)藥理學理念對此進行研究。

網(wǎng)絡(luò)藥理學，是在生物學、藥理學的基礎(chǔ)上進行的整合和創(chuàng)新，通過構(gòu)建藥物—靶點—疾病三者的網(wǎng)絡(luò)關(guān)系，來明確藥物的作用機制。簡單來看，網(wǎng)絡(luò)藥理學就是將藥物—靶點網(wǎng)絡(luò)和生物系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)合在一起，為藥物研發(fā)提供新的途徑。反向藥效團匹配法，能根據(jù)配體特征預(yù)測靶點，對匹配的藥效團進行尋找、查詢、打分，不僅臨床適應(yīng)癥的涵蓋范圍廣，而且靶點信息全、運算速度快。從已有的研究結(jié)果來看，有學者發(fā)現(xiàn)逍遙散中的抗抑郁成分，包括25個作用靶點，參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、內(nèi)分泌和能量代謝；有學者發(fā)現(xiàn)百合地黃湯中包括11個活性成分、21個靶點，且兩者相互作用。

本次研究 校鑰疃ㄖ兄箍然迪喙氐？2個化合物為對象，首先建立sdf-mol格式文件，然后對靶點反向預(yù)測和篩選，最后建立靶點網(wǎng)絡(luò)。結(jié)果顯示，和止咳化痰相關(guān)的潛在作用靶點共有36個，頻率較高的如GSTP1、MAPK14、ACHE、GSTA1等，且作用機制具有多成分、多靶點的特征。

參考文獻

[1] 李靜，高麗，高耀等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學的款冬花止咳化痰活性成分靶點探究[J].中草藥，2018，（1）：179-187.

[2] 張爭爭.款冬花活性成分及轉(zhuǎn)錄組研究[D].山西大學，2016.

[3] 吳琪珍，張朝鳳，許翔鴻等.款冬花化學成分和藥理活性研究進展[J].中國野生植物資源，2015，（2）：33-36.