陽仕榮

【 磕康模骸糎TF〗分析乙肝小三陽患者（即HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性）與HBV～DNA的關系。方法：選擇2016年9月-2017年9月我院所接收的300例乙肝小三陽患者和50例健康者的血清進行研究，對其血清進行乙肝五項和HBV～DNA的檢測。采用時間分辨免疫熒光法（TRFIA）檢測乙肝五項，并用聚合酶鏈式反應法（PCR）檢測HBV～DNA，分析比較乙肝小三陽患者（HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性）與HBV～DNA的關系。結果：乙肝小三陽患者（HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性）的檢出率是77.1%，HBV～DNA的檢出率是62.6%，其中兩組數據進行比較（x2=11.1511，P=0.0008），即其差異有顯著性。結論：HBeAg 呈陰性情況，可能也有病毒復制的情況，HBV～DNA和HBsAg陽性、HBeAb陽性、HBcAb陽性之間有著較好的相關性，對乙肝小三陽患者來講其可以有效的指導乙肝疾病的診斷、診斷及臨床療效，也有助于臨床治療方案的制訂和預后情況的判斷。

【關鍵詞】乙肝小三陽；HBV～DNA；PCR

【中圖分類號】R373.2

【文獻標志碼】A

【文章編號】1005-0019（2018）12-032-01

乙型病毒性肝炎是由于感染乙型肝炎病毒（HBV）引起的，乙型肝炎患者和HBV攜帶者是本病的主要傳染源。感染HBV后，由于受病毒因素、宿主因素、環(huán)境因素等影響，會出現不同的結局和臨床類型。臨床上，對乙型肝炎患者的血清標志物有著多種檢測方法，所以急需尋找出一種能夠快速靈敏、又具有特異性的檢測方法。HBV～DNA是否被感染，有無進行復制，判斷標志就是檢測HBsAg、HBeAb和HBcAb表達情況，三者全部表現陽性也是乙肝小三陽患者臨床診治、療效及預后情況判定的重要依據[1]。但因為“窗口期”等問題的存在，通常乙肝病毒即HBV～DNA在機體內的含量多少，是醫(yī)護人員用來判定病毒等復制與活躍度的重要依據，也是是否具有傳染性的直接依據，通過對HBV～DNA的定量檢測，判定患者體內乙肝病毒的含量變化。本實驗通過研究300例乙肝小三陽病患的血清標志物與HBV～DNA的關系，分析了臨床檢測HBV～DNA的意義。現將結果報告如下：

1 材料與方

1.1 一般資料 選取的300例研究對象是2016年9月至2017年9月期間，前來我院接受治療的乙肝小三陽患者。其中男200例，女100例；年齡5至78歲，平均年齡為35.6±5.9歲；其中慢性肝炎患者有172例，肝硬化患者有127例。另外有50例健康者組成的對照組，其中男29例，女21例；年齡6至76歲，平均年齡為36.9±5.8歲。所有研究對象在清晨時空腹抽取靜脈血5mL，將血清分離出來，保存在在-20℃的環(huán)境中。

1.2 方法

（1）血清標志物的檢測

采用時間分辨免疫熒光法檢測乙肝五項，儀器采用的是由美國珀金埃爾默公司所生產的全自動時間分辨熒光分析儀Easycuta，輔以乙型肝炎病毒前S1（PreS1） 抗原檢測試劑盒及乙型肝炎病毒e抗原檢測試劑盒，用EU標記物的配備專用稀釋劑對生物素抗原或EU標記物復溶，具體的加水量及檢測步驟，均按儀器說明書上的方法進行。

（2）HBV～DNA檢測

采取上海克隆生物高技術有限公司的乙型肝炎病毒核酸定量檢測試劑盒，用PE5700 PCR熒光檢測儀檢測，輔以熒光探針在體外擴增與檢測。結果判斷：HBV～DNA值>1×103拷貝/mL為陽性。

1.3 統(tǒng)計學分析 數據資料的分析選擇spss18.0進行，計數資料用百分比形式表示為[n（%）]，數據的比較采用x2檢驗，當P<0.05時，表明差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

300例乙肝小三陽患者中HBV～DNA的總檢出率是62.6%（188/300），HBsAg、HBeAb和HBcAb表現陽性（小三陽）的有145例，占比48.3%，陰性有74例，占比24.7%。在HBV～DNA呈陽性的188人中，HBsAg、HBeAb和HBcAb表現陽性的為77.1%（145/188），在HBV～DNA呈陰性的112人中，HBsAg、HBeAb和HBcAb陰性的檢出率為66.1%（74/112），HBsAg、HBeAb和HBcAb與HBV～DNA的檢出率不一致，將兩組數據進行比較（x2=11.1511，P=0.0008），即其差異有顯著性。

3 討論

乙型肝炎診斷指標最常用的是血清標志物HBV～DNA的檢測數據，它能夠反映出乙肝病毒在機體內免疫反應的情況，但不能夠直接將機體內HBV～DNA復制情況反映出來。臨床上HBV～DNA血清標志物具有復雜性，根據檢測結果難以準確判斷HBV～DNA有無感染及其復制情況。時間分辨免疫熒光法檢測通常需要病原體在1015～1017個之間，才能將陽性檢測出來，但如果在感染后的“窗口期”，通常有假陰性結果出現。PCR依靠熒光定量的方法，將被感染后的病原體其發(fā)病時間、數量及病情狀況，兩者之間建立了關系[2]。

研究乙肝小三陽血清標志物與HBV～DNA兩者之間的相關性，對乙型肝炎在臨床上的診斷、治療效果及預后情況有著極其重要的意義。在本實驗中，通過采取TRFIA和PCR兩種手段，對300例乙肝小三陽患者HBsAg、HBeAb和HBcAb與HBV～DNA表達情況進行檢測。結果表明，乙肝小三陽患者中HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性的檢出率是77.1%，HBV～DNA的檢出率是62.6%。大多認為若HBeAg呈陽性，HBV～DNA其復制一般呈積極活躍態(tài)。這項實驗的結果說明，即使HBeAg呈陰性也不能表說明HBV～DNA完全終止其復制或血清中的病毒消失，該結論也與以往的研究結果一致[3]。HBV～DNA的檢出率與HBsAg、HBeAb和HBcAb的檢出率不一樣，其原因可能是HBV～DNA與HBsAg、HBeAb和HBcAb在檢測中，其表達的含義沒有完全一致。在臨床上，以往的觀念認為，抗病毒治療取得療效的依據就是，慢性乙型肝炎病人HBeAg呈現陰性后，傳染性變弱且病情也得以好轉。本實驗中，在HBeAg呈陰性的患者中，利用信號敏感的DNA擴增，血清中大約可以檢測出40%左右的病毒在進行復制。在HBeAg呈陰性的乙肝小三陽患者面前，HBV～DNA是否存在復制情況，可作為疾病發(fā)展與預后情況的重要指標，判斷出抗病毒的效果[4]。

在本實驗中，HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性表達情況和HBV～DNA相關性極高，表明HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性和HBV～DNA其復制情況是一致的，但其陽性的檢出率是77.1%，HBV～DNA的檢出率是62.6%，二者的檢出率有顯著性差異，這也說明，在臨床的判斷上，乙肝病毒其復制情況與其在機體內的活躍程度，不能僅僅只依靠HBsAg、HBeAb和HBcAb陰陽性情況，正確的方法是對HBV-DNA采用定量檢測的熒光PCR方法[5]。

血清標志物中HBV～DNA含量的多少是病毒是否繼續(xù)復制最直接最重要的標志，也是判斷感染程度的有效方法，熒光PCR方法可以在DNA程度上，識別在體內的潛伏情況與活躍情況，故此可認定為HBV～DNA有否感染的診斷標準。血清學標志物在此基礎上，對于乙肝小三陽患者，通過熒光PCR方法對HBV～DNA動態(tài)觀測其數量，可以有效的指導乙肝疾病的診斷、診斷及臨床療效，也有助于臨床治療方案的制訂和預后情況的判斷。

參考文獻

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