陳秀嬌，徐麗，陳智偉，鄭偉男

(1.莆田學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部；2.莆田學(xué)院附屬醫(yī)院病理科，福建 莆田 351100)

胃癌的發(fā)生、發(fā)展是個(gè)復(fù)雜的過程，涉及到多基因多步驟的改變，嚴(yán)重影響著人們的健康。本研究采用免疫組化SP法聯(lián)合檢測胃癌組織中CD147與VEGF的表達(dá)情況并探討其在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其相關(guān)性。目前國內(nèi)外鮮見探討兩者同時(shí)在胃癌中表達(dá)的相關(guān)報(bào)道，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

選取莆田學(xué)院附屬醫(yī)院病理科2014—2017年期間胃癌手術(shù)切除的存檔石蠟標(biāo)本125例，資料完整，且術(shù)前均未行放化療。其中男性70例，女性55例；平均年齡(51.2±10.0)歲，其中<60歲72例、≥60歲53例；組織學(xué)分型高、中分化67例，低分化58例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者88例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者37例；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期65例，Ⅲ～Ⅳ期60例。另抽取胃癌患者標(biāo)本的切緣(距胃癌組織>5 cm)的癌旁正常組織30例作為對照組。

1.2 方法

常規(guī)病理切片，行免疫組化SP法檢測選取組織中CD147和VEGF表達(dá)水平。操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說明。兔抗人CD147單克隆、VEGF多克隆抗體和免疫組化試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。

1.3 結(jié)果判定

CD147和VEGF的陽性表達(dá)主要位于腫瘤細(xì)胞的胞漿內(nèi)，呈棕黃色或棕褐色顆粒，見圖1和圖2。陽性判斷采用半定量積分法[1]，每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)，根據(jù)免疫組化染色反應(yīng)的深度及陽性細(xì)胞的數(shù)量分別記分，其中染色深度以多數(shù)細(xì)胞的呈色反應(yīng)為準(zhǔn)。淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分，不著色為0分。陽性細(xì)胞數(shù)<5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，5l%～75%為3分，>75%為4分，將這兩項(xiàng)積分相乘，<2為陰性(-)，≥2為陽性(+)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 CD147和VEGF在胃癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)情況

胃癌組織中的CD147陽性表達(dá)率為72.8%(91/125)，高于癌旁正常組織的6.7%(2/30)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。胃癌組織中的VEGF陽性表達(dá)率為68.0%(85/125)，高于癌旁正常組織的10.0%(3/30)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2 CD147和VEGF表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

125例胃癌組織中CD147和VEGF表達(dá)在不同性別、年齡、腫瘤分化程度等差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)；而在淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移、病理分期不同等差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，見表2。

表1 CD147和VEGF在胃癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá)情況

表2 CD147和VEGF表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系

2.3 胃癌組織中CD147與VEGF表達(dá)之間的關(guān)系

表3所示，125例胃癌組織CD147表達(dá)陽性者91例中VEGF陽性表達(dá)率78.0%(71/91)，34例CD147表達(dá)陰性者中VEGF表達(dá)陽性率41.2%(14/34),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)Spearman等級(jí)相關(guān)系數(shù)分析,rs=0.351,P=0.000,兩者呈正相關(guān)關(guān)系，見表3。

表3 CD147和VEGF表達(dá)的相關(guān)性

3 討 論

莆田地處東南沿海，為胃癌的高發(fā)區(qū)，且多發(fā)于胃體與賁門部。其發(fā)生發(fā)展機(jī)制復(fù)雜，目前尚未完全明了。侵襲與轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的重要生物學(xué)行為，與預(yù)后關(guān)系密切。雖然隨著胃鏡檢查的普及和治療方法的提高，其預(yù)后有所改善，但病死率仍居惡性腫瘤死亡率的前列。探尋有效的分子生物學(xué)標(biāo)志物，以期為胃癌的預(yù)后評(píng)估和個(gè)性化治療提供一定的參考。

CD147又稱為細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子，是細(xì)胞表面黏附分子。據(jù)陳濤等研究報(bào)道[2]，CD147在正常細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)，常在甲狀腺癌、乳腺癌以及胃癌等多種惡性腫瘤中表達(dá)。國外也有報(bào)道[3]，CD147在胃癌組織中有較高的表達(dá)，且可通過刺激腫瘤細(xì)胞及周圍纖維母細(xì)胞產(chǎn)生MMPs。MMPs可介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞之間、腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞之間的相互作用，從而降解細(xì)胞外基底膜和間質(zhì)，促進(jìn)腫瘤的生長、浸潤和轉(zhuǎn)移以及血管生成。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示CD147在癌旁正常組織和胃癌組織中的陽性表達(dá)率分別為6.7%和72.8%，兩者之間存在顯著性差異(χ2=44.089,P<0.05)，這與國內(nèi)外報(bào)道的結(jié)果相一致[3-5]1725-1730，提示CD147在胃癌中的表達(dá)明顯高于正常組織。通過進(jìn)一步分析CD147表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，CD147在胃癌組織中的表達(dá)率在TNM分期的Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期分別為56.92%和90.0%，在有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組分別為78.41%和59.46%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析顯示胃癌組織中CD147表達(dá)與胃癌的TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，這與陳濤等研究結(jié)果也相符合[2]33-34，提示CD147可能參與促進(jìn)胃癌的發(fā)生和發(fā)展。

血管與腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，血管內(nèi)皮生長因子VEGF是目前已知作用最強(qiáng)的促血管生成因子之一。VEGF能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂,形成血管內(nèi)皮細(xì)胞生長的必需基質(zhì)，在腫瘤血管生成的過程中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用[6]。本研究結(jié)果顯示胃癌組織中VEGF的陽性表達(dá)率(68.0%)明顯高于癌旁正常組織(10.0%)，兩者差異顯著(χ2=33.164,P<0.05)，且也與TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)。

本研究還發(fā)現(xiàn)CD147與VEGF在胃癌組織中的表達(dá)呈正相關(guān)，二者之間可能存在相互協(xié)同作用，提示CD147可能促進(jìn)VEGF表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤血管形成，為腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移提供條件[7]。

圖1 CD147在胃癌中的表達(dá)(SP×400) 圖2 VEGF在胃癌中的表達(dá)(SP×400)