浙江中醫(yī)藥大學(xué) 杭州 310053

人體脂肪組織主要分布于皮下、內(nèi)臟及血管周?chē)Ｇ闆r下起著調(diào)節(jié)人體生理代謝、提供干細(xì)胞等作用[1]，當(dāng)脂肪組織異位沉積時(shí)會(huì)引起多種代謝異常疾病以及各類(lèi)并發(fā)癥。脂肪組織在腹腔內(nèi)積累過(guò)多時(shí)，會(huì)引起脂肪肝、糖尿病和心血管疾病[2]。血管周?chē)镜倪^(guò)量沉積會(huì)造成脂肪組織分泌功能的紊亂，使脂肪組織分泌過(guò)量的炎癥因子，引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化和高血壓[3]。

雌激素與脂肪代謝有關(guān)，女性絕經(jīng)后雌激素水平下降，容易造成體內(nèi)脂肪堆積，引發(fā)肥胖[4]。筆者研究團(tuán)隊(duì)前期對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7、MDA-MB-231細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn)山核桃葉總黃酮具有雌激素樣活性[5]；還發(fā)現(xiàn)山核桃葉所含黃酮成分白楊素、球松素查爾酮能夠明顯抑制鼠胚胎成纖維細(xì)胞的成脂分化[6-7]。本研究擬進(jìn)一步觀察山核桃葉總黃酮對(duì)去勢(shì)SD大鼠血脂、脂肪組織分布、過(guò)氧化物酶體增殖體激活受體γ （peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ）水平的影響，探討山核桃葉總黃酮對(duì)脂肪組織異位沉積的影響及其可能的機(jī)制。

1 材料和方法

1.1 藥物與試劑 水合氯醛購(gòu)自浙江省中醫(yī)院（批號(hào)：20150803）；戊酸雌二醇片購(gòu)自法國(guó)DELPHARM Lille S.A.S藥廠（批號(hào)：188A）；山核桃葉總黃酮由浙江中醫(yī)藥大學(xué)制備[8-9]?？偰懝檀迹╰otal cholestero，TC）檢測(cè)試劑盒、甘油三酯（triglyceride，TG）檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所（批號(hào)：20150902、20151231）；BCA蛋白定量試劑盒購(gòu)自康為世紀(jì)生物科技公司（批號(hào)：10114）；逆轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)自寶生物（大連）有限公司（批號(hào)：AK2601）；SYBR Premix Ex TaqTM購(gòu)自寶生物（大連）有限公司（批號(hào)：AK4605）；β-actin pAB 內(nèi)參蛋白一抗、PPARγ(Ser 112)-R Antibody均購(gòu)自 SANTA 公司（批號(hào)：CT36001、K1314）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)雌性SD大鼠60只，6周齡，體質(zhì)量約200g，購(gòu)自上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（滬）2013-0016]，飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（浙）2013-0184]。飼養(yǎng)環(huán)境恒溫恒濕，所有大鼠自由飲水，以標(biāo)準(zhǔn)飼料飼養(yǎng)到3月齡，體質(zhì)量（250±30）g用于實(shí)驗(yàn)。

1.3 儀器 SMP500-17044-CXV型全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀為美國(guó)Dynatech公司產(chǎn)品，NIS-Element正置顯微鏡為日本Nikon公司產(chǎn)品，HM315切片機(jī)為德國(guó)Thermo公司產(chǎn)品，S1000型PCR儀購(gòu)于美國(guó)Bio-Rad公司，StepOne Real-Time PCR為美國(guó)Applied Biosystems公司產(chǎn)品，化學(xué)發(fā)光成像儀購(gòu)于Clinx Science Instruments公司。

1.4 方法

1.4.1 去勢(shì)大鼠模型的建立 60只SD大鼠中50只摘除雙側(cè)卵巢。以10%水合氯醛0.3mL/100g腹腔注射麻醉，麻醉成功后，大鼠取俯臥位，沿著脊柱斜向下背部切開(kāi)，摘除雙側(cè)卵巢。其余10只為假手術(shù)組，切除卵巢附近與卵巢同等大小的脂肪組織。術(shù)后大腿部肌肉注射青霉素預(yù)防感染，青霉素80萬(wàn)單位以0.9%氯化鈉注射液5mL溶解，注射劑量為1mL/只，共注射4次。

1.4.2 動(dòng)物分組與給藥 術(shù)后1個(gè)月將大鼠按照隨機(jī)區(qū)組法分為6組：模型組、假手術(shù)組、雌二醇組、山核桃葉總黃酮低、中、高劑量組，每組10只。模型組和假手術(shù)組予0.9%氯化鈉注射液灌胃，雌二醇組予雌二醇1mg/kg灌胃，山核桃葉總黃酮低、中、高劑量組分別予山核桃葉總黃酮50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg灌胃[10-11]。各組大鼠灌胃均為1次/d，灌胃容積0.3～0.4mL/只，連續(xù)給藥2個(gè)月。給藥期間每10d眼眶取血1mL監(jiān)測(cè)血脂的變化，共取6次。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)

1.5.1 一般指標(biāo) 給藥期間每10d稱(chēng)量各組大鼠體質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)處死大鼠，稱(chēng)量各組大鼠的腹部脂肪和主動(dòng)脈弓脂肪，計(jì)算腹部脂肪系數(shù)和主動(dòng)脈弓脂肪系數(shù)。腹部脂肪系數(shù)=腹部脂肪質(zhì)量（g）/體質(zhì)量（g）×100、主動(dòng)脈弓脂肪系數(shù)=主動(dòng)脈弓脂肪質(zhì)量（g）/體質(zhì)量（g）×100。

1.5.2 血清和肝臟脂代謝指標(biāo)檢測(cè) 末次給藥后，大鼠禁食12h，3%戊巴比妥鈉以0.15mL/100g的劑量腹腔注射麻醉，腹主動(dòng)脈取血處死。將取得的血液置于2mL離心管中，室溫放置2h或37℃水浴30min后，3 000 轉(zhuǎn)/min，4℃離心15min，取上層血清，分裝后-80℃保存，酶標(biāo)比色法測(cè)定血清TC、TG水平。取0.1g肝臟組織，加入0.3mL甲醇勻漿和0.6mL氯仿抽提，取下層抽提液，酶標(biāo)比色法測(cè)定肝臟TG、肝臟游離脂肪酸（free fatty acids，F(xiàn)FA）水平。

1.5.3 石蠟切片制作和HE染色 分離大鼠肝臟、腹部脂肪、主動(dòng)脈弓，以10%甲醛溶液固定后石蠟包埋制備3μm切片，HE染色后鏡下觀察。

做到這一點(diǎn)又難又不難。說(shuō)難，那是需要高智商和好體力的；說(shuō)不難，只要準(zhǔn)確理解不同的身份要求，并扮演好自己的角色就行了。當(dāng)然，身份多了，難免會(huì)很累。但要在這個(gè)世界上出人頭地，就不能怕累。張仲平是一個(gè)謀定而后動(dòng)的人，已經(jīng)習(xí)慣了在做任何事情時(shí)都權(quán)衡利弊，他覺(jué)得，只有這樣，才稱(chēng)得上一個(gè)真正的商人和一個(gè)真正成功的男人。

1.5.4 熒光定量PCR檢測(cè)PPARγ mRNA表達(dá) 分離大鼠腹部脂肪組織，液氮研磨，以Trizol法提取脂肪組織總RNA。引物由上海生工公司合成，內(nèi)參GAPDH上游引物：5’-GCTAGTTCAACGGCACAG-3’，下游引物：5’-GCCAGTAGACTCCACGACAT-3’；PPARγ 上游引物：5’-CGTCCCCGCCTTATTATTCT-3’，下游引物：5’-GCTTTATCCCCACAGACTCG-3’。逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)總體系包括總 RNA 8μL、5×Prime Script Master Mix 2μL，充分混勻后 37℃ 15min，85℃ 5s，4℃ 30min 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，獲得cDNA。

以 0.5μL cDNA 為模板，2×SYBR Premix Ex TagTM10μL，上下游引物各 0.5μL，ddH2O 8.5μL，總體系20μL進(jìn)行熒光定量PCR反應(yīng)。反應(yīng)條件：94℃5min，94℃ 30s，55℃ 30s，72℃ 30s，共 30 個(gè)循環(huán)；最后72℃延伸3min。每個(gè)樣本擴(kuò)增3個(gè)復(fù)孔，熒光定量PCR儀檢測(cè)記錄數(shù)據(jù)，以2－△△Ct法計(jì)算mRNA相對(duì)表達(dá)量。△△Ct=[實(shí)驗(yàn)組目的基因平均Ct值-實(shí)驗(yàn)組內(nèi)參基因平均Ct值]-[對(duì)照組目的基因平均Ct值-對(duì)照組內(nèi)參基因平均Ct值]。

1.5.5 Western blot檢測(cè)PPARγ蛋白表達(dá) RIPA裂解液抽提脂肪組織中總蛋白，BCA法檢測(cè)蛋白濃度，SDS-PAGE電泳上樣量40μg/孔，電泳后轉(zhuǎn)膜，加入一抗、二抗孵育，用ECL發(fā)光，圖片用Image J軟件進(jìn)行分析。蛋白相對(duì)表達(dá)量以目的蛋白光密度與βactin光密度比值表示。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，滿足方差齊性用LSD法，方差不齊用 Dunnett's T3法。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠脂代謝指標(biāo)比較 各組大鼠體質(zhì)量、腹部脂肪系數(shù)、主動(dòng)脈弓脂肪系數(shù)都無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。假手術(shù)組組血清TC水平高于模型組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），雌二醇組低于模型組（P＜0.01），山核桃葉總黃酮低、高劑量組均高于模型組，其中山核桃葉總黃酮高劑量組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；中劑量組低于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。模型組與假手術(shù)組血清TG水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；與模型組比較，雌二醇組和山核桃葉總黃酮各劑量組血清TG水平呈下降趨勢(shì)，其中雌二醇組、山核桃葉總黃酮高劑量組與模型組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。模型組肝臟TG水平高于假手術(shù)組（P＜0.01），雌二醇組和山核桃葉總黃酮各劑量組肝臟TG水平均低于模型組，其中雌二醇組、山核桃葉總黃酮中劑量組和高劑量組與模型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05）。模型組肝臟FFA水平高于假手術(shù)組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；雌二醇組和山核桃葉總黃酮各劑量組肝臟FFA水平有下降趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。這表明山核桃葉總黃酮能夠下調(diào)血清TG和肝臟TG水平。見(jiàn)表 1、2。

表1 各組大鼠體質(zhì)量及脂肪系數(shù)比較（±s）Tab.1 Comparison of body mass and fat coefficient in each group（±s）

表1 各組大鼠體質(zhì)量及脂肪系數(shù)比較（±s）Tab.1 Comparison of body mass and fat coefficient in each group（±s）

組別 n 體質(zhì)量（g） 腹部脂肪系數(shù) 主動(dòng)脈弓脂肪系數(shù)山核桃葉總黃酮低劑量組山核桃葉總黃酮中劑量組山核桃葉總黃酮高劑量組雌二醇組模型組假手術(shù)組1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 1 0 3 2 9.7 0 8±3 3.7 7 5 3 0 6.7 6 4±2 8.7 1 8 3 2 3.6 6 0±3 3.3 4 8 3 2 4.5 0 4±3 1.6 2 9 3 1 0.8 5 0±2 7.9 8 0 3 2 0.3 7 9±2 7.2 8 6 1.7 7 4±0.4 2 5 1.3 1 5±0.7 0 6 1.7 4 6±0.8 9 4 1.0 3 4±0.3 8 4 1.5 3 9±0.8 5 7 1.2 0 6±0.2 0 0 0.1 3 2±0.0 3 3 0.0 8 8±0.0 2 5 0.1 2 5±0.0 7 5 0.1 3 7±0.0 3 3 0.1 1 7±0.0 5 7 0.1 2 7±0.0 4 5

2.2 各組大鼠肝臟、腹部脂肪、主動(dòng)脈弓脂肪病理形態(tài)比較 假手術(shù)組肝臟、腹部脂肪、主動(dòng)脈弓處脂肪細(xì)胞數(shù)量較少，且體積較小，主動(dòng)脈弓內(nèi)膜較光滑。模型組肝索清晰，可見(jiàn)輕微炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肝細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)脂肪滴積聚；腹部脂肪細(xì)胞較多，大小不一且聚集；主動(dòng)脈弓處有較多脂肪細(xì)胞聚集，內(nèi)膜增厚，管腔狹窄，內(nèi)有泡沫細(xì)胞沉積。雌二醇組與假手術(shù)組相似。山核桃葉總黃酮低劑量組肝組織切片可見(jiàn)肝索清晰，伴有輕微的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，但脂肪滴的數(shù)量較模型組減少。雌二醇組、山核桃葉總黃酮高劑量組肝細(xì)胞內(nèi)脂肪滴數(shù)量明顯減少，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)改善；腹部脂肪細(xì)胞體積出現(xiàn)不同程度減??；主動(dòng)脈弓處脂肪明顯減少，內(nèi)膜光滑，管腔狹窄減輕，改善程度隨山核桃葉總黃酮?jiǎng)┝可叨黠@。見(jiàn)圖1～3。

表2 各組大鼠血清及肝臟脂代謝指標(biāo)比較（±s）Tab.2 Comparison of index of lipid metabolism in blood and hepatic in each group（±s）

表2 各組大鼠血清及肝臟脂代謝指標(biāo)比較（±s）Tab.2 Comparison of index of lipid metabolism in blood and hepatic in each group（±s）

注：與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與假手術(shù)組比較，#P＜0.05，##P＜0.01。Note:Compared with model group,*P＜0.05,**P＜0.01;compared with sham operation group,#P＜0.05,##P＜0.01.

組別 n 血清TC（mmol·L-1） 血清TG（mmol·L-1） 肝臟TG（mmol·gprot-1） 肝臟FFA（μmol·gprot-1）山核桃葉總黃酮低劑量組山核桃葉總黃酮中劑量組山核桃葉總黃酮高劑量組雌二醇組模型組假手術(shù)組54.717±4.114 52.111±3.097 49.864±6.179 50.143±6.202 55.010±2.494 47.116±4.342 10 10 10 10 10 10 2.314±0.297 1.829±0.335**##2.343±0.382**##1.386±0.657**2.100±0.306 2.150±0.288 0.499±0.041 0.489±0.043 0.406±0.029**##0.407±0.046**##0.535±0.061 0.523±0.081 2.616±0.239 2.707±0.926*#2.696±0.291*#2.115±0.252**3.222±0.130 2.003±0.465**

圖1 各組大鼠肝臟組織病理形態(tài)比較（HE染色，200×）Fig.1 Comparison of pathological features of liver tissue in each group(HE staining,200×)

圖2 各組大鼠腹部脂肪組織病理形態(tài)比較（HE染色，200×）Fig.2 Comparison of histopathological features of abdominal adipose tissue in each group(HE staining,200×)

圖3 各組大鼠主動(dòng)脈弓病理形態(tài)比較（HE染色，200×）Fig.3 Comparison of pathological features of aortic arch in each group(HE staining,200×)

2.3 各組大鼠脂肪組織中PPARγ蛋白表達(dá)比較與假手術(shù)組比較，模型組PPARγ蛋白表達(dá)顯著增加（P＜0.01）；與模型組比較，雌二醇組PPARγ蛋白表達(dá)降低（P＜0.01），山核桃葉總黃酮中、高劑量組PPARγ蛋白表達(dá)也降低且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。見(jiàn)圖4、表 3。

圖4 各組大鼠脂肪組織中PPARγ蛋白Western blot檢測(cè)結(jié)果Fig.4 Western blot results of PPARγ protein in adipose tissue in each group

表3 各組大鼠脂肪組織中PPARγ蛋白表達(dá)量比較（±s）Tab.3 Comparison of PPARγ protein in adipose tissue in each group（±s）

表3 各組大鼠脂肪組織中PPARγ蛋白表達(dá)量比較（±s）Tab.3 Comparison of PPARγ protein in adipose tissue in each group（±s）

注：與模型組比較，**P＜0.01；與假手術(shù)組比較，##P＜0.01。Note:Compared with model group,**P＜0.01;compared with sham operation group,##P＜0.01.

組別 n PPARγ蛋白表達(dá)量山核桃葉總黃酮低劑量組山核桃葉總黃酮中劑量組山核桃葉總黃酮高劑量組雌二醇組模型組假手術(shù)組10 10 10 10 10 10 5.038±0.130##2.295±0.067**2.347±0.316**3.133±0.209**##4.836±0.121 2.330±0.267**

2.4 各組大鼠脂肪組織中PPARγ mRNA表達(dá)比較模型組與假手術(shù)組比較，脂肪組織中PPARγ mRNA表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。與模型組比較，雌二醇組PPARγ mRNA表達(dá)量降低（P＜0.05），山核桃葉總黃酮低、中、高劑量組PPARγ mRNA表達(dá)呈下降趨勢(shì)，山核桃葉總黃酮中劑量組與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 各組大鼠脂肪組織中PPARγ mRNA表達(dá)量比較（±s）Tab.4 Expression of PPARγ mRNA in adipose tissue in each group（±s）

表4 各組大鼠脂肪組織中PPARγ mRNA表達(dá)量比較（±s）Tab.4 Expression of PPARγ mRNA in adipose tissue in each group（±s）

注：與模型組比較，*P＜0.05；與假手術(shù)組比較，#P＜0.05。Note:Compared with model group,*P＜0.05;compared with sham operation group,#P＜0.05.

組別n PPARγ mRNA表達(dá)量山核桃葉總黃酮低劑量組山核桃葉總黃酮中劑量組山核桃葉總黃酮高劑量組雌二醇組模型組假手術(shù)組10 10 10 10 10 10 0.669±0.148 0.317±0.136*#0.556±0.254 0.272±0.101*#0.931±0.328 1.000±0.000

3 討論

絕經(jīng)期婦女容易發(fā)生向心性肥胖，導(dǎo)致心血管疾病高發(fā)[12]。脂肪異位沉積是指脂質(zhì)在非脂肪組織中的

積聚，主要表現(xiàn)為T(mén)G在肝臟、肌肉等組織中的沉積，是肥胖、糖尿病、非酒精性脂肪肝、多種心血管疾病等的發(fā)病原因之一[13]。體內(nèi)幾乎所有血管周?chē)急恢窘M織包繞，通常將其稱(chēng)為血管周?chē)窘M織(perivascular adipose tissue，PVAT)。PVAT 與血糖、血脂都具有相關(guān)性[14]，其含量的增高將可能成為新的代謝性心血管病危險(xiǎn)因素[4]。

Xu等[15]研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充雌激素可抑制去勢(shì)大鼠腹內(nèi)脂肪和主動(dòng)脈周?chē)痉e聚以及缺氧的影響，從而可以緩解去勢(shì)大鼠代謝性心血管危險(xiǎn)因素的惡化；同時(shí)還能改善去勢(shì)大鼠肝臟組織的異位脂肪沉積。盡管補(bǔ)充外源性雌激素的方法治療絕經(jīng)期綜合征及其相關(guān)疾病已得到公認(rèn)，但是外源性雌激素會(huì)刺激乳腺和子宮內(nèi)膜增生，增大惡性腫瘤的發(fā)生概率[16]。美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院于2000年已將人工合成的雌激素列入致癌物質(zhì)的黑名單。因此尋找具有雌激素效應(yīng)但副作用小的藥物已經(jīng)成為治療絕經(jīng)期綜合征的重要研究方向。研究發(fā)現(xiàn)，植物類(lèi)雌激素在體內(nèi)能與雌激素受體結(jié)合，具有雌激素樣調(diào)節(jié)作用，如大豆異黃酮已廣泛應(yīng)用于絕經(jīng)期綜合征的治療[17]。

本研究發(fā)現(xiàn)，模型組大鼠主動(dòng)脈弓脂肪系數(shù)和腹部脂肪系數(shù)與假手術(shù)組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但腹部脂肪組織切片顯示，模型組大鼠腹部脂肪細(xì)胞體積大于假手術(shù)組，而山核桃葉總黃酮能夠減少脂肪細(xì)胞數(shù)量，同時(shí)縮小脂肪細(xì)胞體積，這對(duì)改善脂肪組織功能紊亂有重要的意義[18]。模型組大鼠血清TC水平無(wú)顯著變化，而肝臟組織的TG水平顯著升高，經(jīng)過(guò)山核桃葉總黃酮干預(yù)后，肝組織FFA和TG升高得到抑制；肝組織切片顯示，山核桃葉總黃酮干預(yù)后，大鼠肝細(xì)胞內(nèi)脂滴數(shù)量逐漸減少，表明山核桃葉總黃酮能夠通過(guò)降低肝臟組織中FFA的水平從而減少TG的產(chǎn)生，具有植物類(lèi)雌激素功效。

脂肪細(xì)胞分化和功能異常是導(dǎo)致脂肪過(guò)度堆積的原因之一，脂肪細(xì)胞分化能力將直接影響脂肪細(xì)胞數(shù)量。許多轉(zhuǎn)錄因子、信號(hào)通路均作用于脂肪細(xì)胞分化過(guò)程[19]，如PPARγ、CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白家族（CCAAT/enhance binding proteins，C/EBPs） 等對(duì)前體脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化起決定性的作用[20-21]。本研究顯示山核桃葉總黃酮能夠明顯降低PPARγ的表達(dá)，抑制脂肪細(xì)胞的分化，從而減少體內(nèi)脂肪組織的聚集。

綜上所述，本研究結(jié)果表明山核桃葉總黃酮可以改善去勢(shì)大鼠脂肪異位沉積，其機(jī)制與降低肝臟TG和FFA，降低脂肪組織PPARγ的表達(dá)，抑制脂肪細(xì)胞分化有關(guān)。脂肪的沉積是一個(gè)復(fù)雜綜合的過(guò)程，脂質(zhì)的攝入、生成、氧化、再酯化和輸出的任一步失衡都會(huì)影響脂肪的沉積[22]，山核桃葉總黃酮對(duì)于脂質(zhì)的合成和氧化的調(diào)控是否有直接的作用，本課題組繼續(xù)開(kāi)展進(jìn)一步的深入研究。