劉景城

（福建衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院 福建 福州 350101）

葡萄胎是臨床常見妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病，雖然屬于良性病變，但具有生長活躍、潛在惡變的特點(diǎn)，相關(guān)資料顯示，4%左右的部分性葡萄胎和20%左右的完全性葡萄胎可發(fā)展為侵蝕性葡萄胎或絨毛膜癌[1-2]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)不同類型葡萄胎的Bcl-2表達(dá)程度不同，其過度表達(dá)可能與葡萄胎轉(zhuǎn)化為侵蝕性葡萄胎密切相關(guān)[3]。本研究分析Bcl-2、P53、P57、Ki-67表達(dá)在葡萄胎中的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

表1 PM組、CM組及對照組中Bcl-2、P53、P57、Ki-67表達(dá)情況

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年1月至2017年8月于福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二人民醫(yī)院檢查的部分性葡萄胎（PM）標(biāo)本90例、完全性葡萄胎（CM）30例展開研究，同期抽取正常子宮絨毛組織的30例作為對照。所有標(biāo)本均明確診斷，年齡24～43歲，平均（26.8±5.4）歲。

1.2 方法

對所有病例標(biāo)本進(jìn)行EliVisionTMplus免疫組織化學(xué)染色，染色步驟包括脫蠟、水化后使用蘇木素浸染5min，自來水洗1min，1%鹽酸酒精分化3s，再用自來水沖洗30～60min，0.5%伊紅酒精染液浸染1min，完成后脫水、二甲苯透明、中性樹膠和蓋玻片封固。接著將載玻片貼上標(biāo)簽，常規(guī)石蠟3μm連續(xù)切片，將載玻片在60℃溫度下烘烤30min，脫蠟、水化組織切片，并高壓抗原修復(fù)、阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性、滴加一抗、試劑，最后在DAB溶液下進(jìn)行顯色處理，對組織中Bcl-2、P53、P57、Ki-67表達(dá)進(jìn)行檢測。一抗為鼠抗人單克隆抗體Bcl-2、P53、P57、Ki-67，試劑盒選用EliVisionTMplus試劑盒。

1.3 結(jié)果判斷

根據(jù)Beesle法分為四級(jí)：（+++）為強(qiáng)陽性，陽性細(xì)胞數(shù)＞50%；（++）為中度陽性，陽性細(xì)胞數(shù)為25%～50%；（+）為弱陽性，陽性細(xì)胞數(shù)＜25%；（-）為陰性，無明顯陽性細(xì)胞。各蛋白陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：Bcl-2、P53、P57、Ki-67均通過綜合積分法進(jìn)行陽性判斷，以著色強(qiáng)度計(jì)分與陽性細(xì)胞百分比計(jì)分相加的總評分評價(jià)，≤2分為（-），3分為（+），4分為（++），5～6分為（+++），7分為（++++）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0軟件分析，經(jīng)χ2檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料，以率表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 不同類型子宮葡萄胎中各蛋白表達(dá)情況

PM組和對照組中，P53、Bcl-2、Ki-67呈低表達(dá)，P57呈高表達(dá)；而在CM組中，P53、Bcl-2、Ki-67表達(dá)增強(qiáng)，P57表達(dá)不明顯。四種抗體在CM組與PM組及對照組之間存在顯著差異（P＜0.05）；而PM組與對照組之間則無明顯差異（P＞0.05），見表1。

2.2 年齡與各蛋白表達(dá)的關(guān)系

120 例患者中年齡＞40歲有27例，＜40歲有93例。結(jié)果可見年齡＞40歲Bcl-2表達(dá)陽性率明顯高于年齡≤40歲患者，而其他蛋白表達(dá)與年齡無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 年齡與個(gè)蛋白表達(dá)的關(guān)系

3.討論

目前常規(guī)HE染色組織病理學(xué)依然是大多醫(yī)院診斷葡萄胎的主要方法，雖然該方法診斷鑒別葡萄胎有重要作用，不過隨著影像學(xué)發(fā)展、葡萄胎早期發(fā)現(xiàn)，為形態(tài)學(xué)診斷、鑒別帶來了難度，加之醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)、水平差異影響，葡萄胎病理診斷可重復(fù)性差，因此如何對早期滋養(yǎng)層細(xì)胞增生疾病準(zhǔn)確診斷、鑒別十分關(guān)鍵[4]。

Ki-67是一種重要抗體，主要代表細(xì)胞繁殖指數(shù)，在增生的滋養(yǎng)細(xì)胞中表達(dá)，以細(xì)胞核為陽性表達(dá)部位，本研究發(fā)現(xiàn)Ki-67在CM中存在較高的表達(dá)率，而在PM及正常子宮絨毛組織中呈低表達(dá)，說明該抗體對部分性、完全性葡萄胎有重要的鑒別診斷價(jià)值。P57是一種細(xì)胞周期抑制因子，位于母方11號(hào)染色體上，由于CM不含母方染色體，故其無P57有絲分裂抑制因子，本研究中P57在PM中呈陽性表達(dá)，在CM中則呈現(xiàn)低表達(dá)或未表達(dá)。P53是一種抑癌基因，其可發(fā)生突變，進(jìn)而導(dǎo)致抑癌基因缺失，引發(fā)癌變；Bcl-2基因使原癌基因，其能夠抑制細(xì)胞凋亡。本研究中發(fā)現(xiàn)該兩種基因在PM及正常絨毛組織中呈低表達(dá)，在CM中呈高表達(dá)，由此可見其表達(dá)可為治療提供準(zhǔn)確指導(dǎo)。P53、P57、Ki-67表達(dá)早已被證實(shí)在葡萄胎中具有較高的鑒別診斷價(jià)值，而本研究發(fā)現(xiàn)Bcl-2在不同類型子宮葡萄胎中表達(dá)程度也不同。Bcl-2蛋白具有延長細(xì)胞壽命的生物學(xué)功能，還能夠使細(xì)胞對各種凋亡刺激因素抵抗力提高，延遲、阻止多種因素引起的細(xì)胞凋亡，Bcl-2表達(dá)陽性率高的細(xì)胞壽命長，細(xì)胞凋亡的進(jìn)程也更為緩慢，進(jìn)而可造成細(xì)胞堆積，增加腫瘤發(fā)生率。在本研究中可以看出，Bcl-2蛋白在正常子宮絨毛組織中僅30.0%的陽性率，而在部分性葡萄胎中陽性率為72.0%，在完全性葡萄胎中陽性率為86.7%，該蛋白在部分和完全性葡萄胎中表達(dá)陽性率顯著高于正常者，由此可見Bcl-2可作為鑒別滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的有效指標(biāo)。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，在部分性葡萄胎中Bcl-2主要呈現(xiàn)陽性低表達(dá)（38.7%），而在完全性葡萄胎中主要呈現(xiàn)高表達(dá)（53.3%），說明該蛋白表達(dá)可反映出葡萄胎嚴(yán)重程度，對于預(yù)后有一定預(yù)測意義。此外，在本研究中比較年齡與各蛋白表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，年齡＞40歲Bcl-2表達(dá)陽性率明顯高于年齡≤40歲患者，而其他蛋白表達(dá)與年齡無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明年齡與Bcl-2呈正相關(guān)，即年齡越大Bcl-2表達(dá)陽性率越高，綜合上述來看，進(jìn)一步說明年齡＞40歲患者預(yù)后效果可能相對于年齡≤40歲患者更差。

綜合上述，Bcl-2、P53聯(lián)合P57、Ki-67表達(dá)在葡萄胎鑒別診斷中發(fā)揮了重要作用，具有較高的鑒別診斷意義。