張力鵬，丁巖

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830054)

葡萄胎中E-cadherin和Laminin的表達(dá)及臨床意義

張力鵬，丁巖

(新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830054)

目的探討E-cadherin和Laminin對(duì)部分性葡萄胎、完全性葡萄胎和侵蝕性葡萄胎的診斷價(jià)值。方法收集2005年1月至2016年3月新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科75例患者的葡萄胎組織，石蠟包埋組織，采用免疫組化SP法檢測(cè)包埋組織中E-cadherin和Laminin的表達(dá)水平，其中部分性葡萄胎25例，完全性葡萄胎36例，侵蝕性葡萄胎14例。結(jié)果按部分性葡萄胎、完全性葡萄胎和侵蝕性葡萄胎順序，E-cadherin陽性檢出率分別為88.0%(22/25)、69.4%(25/36)和35.7%(5/14)，表達(dá)依次降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=11.539，P=0.003)；Laminin陽性檢出率分別為84.0%(21/25)、72.2%(26/36)和28.6%(4/14)，表達(dá)依次降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.648，P= 0.002）。結(jié)論免疫組化法分析E-cadherin和Laminin可以作為不同類型葡萄胎傳統(tǒng)診斷方法的輔助手段。

葡萄胎；E-cadherin；Laminin；免疫組織化學(xué)；SP法

臨床上妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病最常見的一種類型是葡萄胎，如未做出及時(shí)診治，有發(fā)展為侵蝕性葡萄胎甚至絨癌的風(fēng)險(xiǎn)，血清HCG主要用于妊娠的診斷，雖然在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞相關(guān)疾病具有一定的診斷價(jià)值，但其作為診斷手段的特異性仍不強(qiáng)，所以，尋找早期預(yù)測(cè)葡萄胎轉(zhuǎn)移及惡變的指標(biāo)顯得尤為重要。近年研究表明，上皮型粘鈣素(E-cadherin)和層黏連蛋白(Laminin，LN)異常表達(dá)與腫瘤轉(zhuǎn)移、分化及惡變密切相關(guān)[1-3]。本文采用免疫組化法檢測(cè)75例葡萄胎患者病變組織中E-cadherin和LN的表達(dá)，以期對(duì)其分型、侵蝕及進(jìn)行早期預(yù)測(cè)。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象 選擇2005年1月至2016年3月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科就診的葡萄胎患者75例，所有病例均經(jīng)病理檢查確診。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 選取每一例葡萄胎患者的病變組織，分裝后送病理檢查。石蠟包埋組織切片厚度為4 μm。

1.2.2 病理處理 將確診為葡萄胎患者的病理組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)E-cadherin和Laminin的表達(dá)。免疫組化試劑盒、E-cadherin和Laminin抗體均購自北京中山生物技術(shù)有限公司，設(shè)陰、陽性對(duì)照，實(shí)驗(yàn)步驟均參照試劑盒說明進(jìn)行，在顯微鏡下觀察到棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，每張病理切片均隨機(jī)選擇10個(gè)不同象限視野，對(duì)每個(gè)不同視野的陰、陽性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，陽性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)＜5%為-，5%～25%為+，25%～50%為++，＞75%為+++。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Excel錄入數(shù)據(jù)，SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本情況 75例入選患者均未絕經(jīng)，月經(jīng)史規(guī)律，此前均無妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞病史，年齡22～43歲，平均年齡32.5歲。經(jīng)產(chǎn)婦33例，有孕無育史42例(首次妊娠37例，5例未婚)。停經(jīng)時(shí)間6～20周，其中＞12周21例，8～12周36例，6～8周18例。

2.2 E-cadherin在不同類型葡萄胎組織中的表達(dá) E-cadherin在葡萄胎中的表達(dá)：(1)在葡萄胎組織中，E-cadherin通常在滋養(yǎng)細(xì)胞間的連接部位進(jìn)行表達(dá)(圖1A)，(2)侵蝕性葡萄胎組織中，E-cadherin染色明顯變淡，染色呈不連續(xù)性或點(diǎn)狀著色，陽性表達(dá)率明顯下降，且多為弱陽性表達(dá)(圖1B)。

2.3 Laminin在不同類型葡萄胎組織中的表達(dá) Laminin在葡萄胎組織中的表達(dá)：(1)典型葡萄胎組織中，Laminin主要表達(dá)于胎盤絨毛滋養(yǎng)層上皮基底膜(圖1C)；(2)基底膜完整性缺失，Laminin的表達(dá)也從圖1C的連續(xù)線性發(fā)展為間斷和部分缺失，表現(xiàn)為表達(dá)下降(圖1D)。

2.4 E-cadherin和Laminin在不同類型葡萄胎組織的表達(dá)比較 E-cadherin和Laminin在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蝕性葡萄胎中的表達(dá)逐漸減少，陽性率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

圖1 E-cadherin與Laminin在不同類型葡萄胎組織中的表達(dá)(×400)

表1 不同類型組織中E-cadherin和Laminin表達(dá)比較(例)

3 討 論

部分性葡萄胎、完全性葡萄胎、侵蝕性葡萄胎作為葡萄胎的重要組成部分，前二者雖無惡性行為，但如果未能及時(shí)診治，有10%～20%的概率發(fā)展為侵蝕性葡萄胎甚至絨癌等。葡萄胎預(yù)后又與其組織學(xué)類型及分化程度密切相關(guān)，故通過各種方式對(duì)影響其惡變因素進(jìn)行早期預(yù)測(cè)是提高葡萄胎治愈率、降低惡變率的關(guān)鍵。本實(shí)驗(yàn)選取了兩個(gè)與腫瘤轉(zhuǎn)移、分化及惡變相關(guān)的標(biāo)記物E-cadherin和Laminin[1-3]，以了解其表達(dá)改變與葡萄胎發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

E-鈣粘附素(E-cadherin)是一種協(xié)助同類細(xì)胞間互相粘附的鈣依賴跨膜糖蛋白，對(duì)介導(dǎo)細(xì)胞連接非常重要。本研究顯示，E-cadherin在部分性葡萄胎、完全性葡萄胎及侵蝕性葡萄胎中的表達(dá)從高到低，在侵蝕性葡萄胎中明顯減少，與先前報(bào)道[4-5]相似，表明其與葡萄胎的發(fā)生發(fā)展有一定的關(guān)聯(lián)。這一結(jié)論可能是隨著葡萄胎增殖程度的增加，鈣粘素表達(dá)下降，增加了滋養(yǎng)細(xì)胞的侵蝕性，對(duì)母體造成過度侵襲、使滋養(yǎng)細(xì)胞間的粘附連接減弱，從而使細(xì)胞容易脫落、離散、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，致使普通葡萄胎向侵蝕性葡萄胎及絨癌轉(zhuǎn)變。但是，據(jù)Wang等[6]報(bào)道，E-cadherin在不同葡萄胎組織中表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。Erol等[7]報(bào)道，E-cadherin、p53、Inhibin-α聯(lián)合可以作為傳統(tǒng)方法區(qū)分不同類型葡萄胎的一種輔助手段。

先前報(bào)道表明，Laminin(LN)在正常絨毛組織和葡萄胎組織中均有表達(dá)[8]。本研究的75例葡萄胎組織中，隨著葡萄胎增殖程度的增加，LN的表達(dá)從連續(xù)線性發(fā)展為間斷缺失，表達(dá)下降，而基底膜部分缺失又與腫瘤的侵襲性密切相關(guān)。因此，提示LN的表達(dá)在葡萄胎發(fā)展及侵襲中起一定作用，這與崔彩蓮等[9]報(bào)道一致。本研究中，LN與葡萄胎的病理變化相關(guān)，而安瑞芳等[10]報(bào)道恰恰相反，LN只與孕周存在一定的關(guān)聯(lián)，這可能與兩個(gè)研究所選擇的人群不同有關(guān)。

目前代表葡萄胎滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生惡變的一類指標(biāo)，通過檢測(cè)其在不同葡萄胎組織中的表達(dá)強(qiáng)度，可以輔助傳統(tǒng)檢測(cè)方法對(duì)葡萄胎類型做出準(zhǔn)確及時(shí)的診斷，以期達(dá)到合理有效的診治，降低其惡變率，提高生存率的目的。

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Immunohistochemical analysis of E-cadherin and Laminin in hydatidiform mole.

ZHANG Li-peng,DING Yan.The First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,Xinjiang,CHINA

ObjectiveTo investigate the role of E-cadherin and Laminin in the differential diagnosis of partial hydatidiform mole(PHM),complete hydatidiform mole(CHM)and invasive hydatidiform mole(IHM).MethodsFrom January 2005 to March 2016,75 cases of hydatidiform mole tissues were collected in Department of Gynaecology,the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University.Hydatidiform mole tissues were paraffin embedded.E-cadherin and Laminin expression were investigated by immunohistochemically SP methods in paraffin-embedded tissue sections, including diagnosed cases of PHM(n=25),CHM(n=36)and HA(n=14).ResultsFrom PHMs to CHMs to IHMs,positive detection rate of E-cadherin were 88.0%(22/25),69.4%(25/36)and 35.7%(5/14)respectively,with statistically significant differences(χ2=11.539,P=0.003).Positive detection rate of E-cadherin were 84.0%(21/25),72.2%(26/36)and 28.6%(4/14)respectively,and there were statistically significant differences(χ2=12.648,P=0.002).ConclusionImmunohistochemical analysis of E-cadherin and Laminin expression could serve as a useful adjunct to conventional methods in the differential diagnosis of PHM,CHM and IHM.

Hydatidiform mole;E-cadherin;Laminin;Immunohistochemistry;SP method

R737.33

A

1003—6350（2017）06—0875—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.06.004

2016-10-02)

國家自然科學(xué)基金（編號(hào)：81660249）

丁巖。E-mail：ddy8930@126.com