楊天毅 熊 陽 丹 成 郭穩(wěn)杰 劉漢勤 桂建芳, 梅 潔

(1. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，武漢 430070; 2. 武漢百瑞生物技術(shù)有限公司，武漢 430070;3. 中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所，淡水生態(tài)與生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430072)

黃顙魚(Pelteobagrus fulvidracoRichardson) 在分類上隸屬于鯰形目, 鲿科, 黃顙魚屬, 是我國(guó)重要的淡水經(jīng)濟(jì)魚類之一, 2016年年產(chǎn)量高達(dá)41.7×107kg[1]。由于黃顙魚雄性比雌性生長(zhǎng)快, 培育全雄黃顙魚對(duì)于提高黃顙魚產(chǎn)量有著十分重要的意義。王達(dá)等[2]和丹成等[3]成功分離得到黃顙魚X和Y染色體連鎖標(biāo)記, 桂建芳等[4,5]開拓出了一條X和Y染色體連鎖標(biāo)記輔助的全雄魚培育技術(shù)路線?；诖? 劉漢勤等[6,7]大規(guī)模培育出全雄黃顙魚,2010年經(jīng)國(guó)家水產(chǎn)原種和良種審定委員會(huì)審定為新品種全雄黃顙魚“全雄1號(hào)”。

全雄黃顙魚“全雄1號(hào)”的出現(xiàn)極大推動(dòng)了黃顙魚產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。近年來, 親本超雄魚繁育系經(jīng)過多代自交之后發(fā)生了退化, 且繁育所用的母本沒有經(jīng)過系統(tǒng)選育, 非常混雜, 制約了全雄黃顙魚的生產(chǎn)推廣。瓦氏黃顙魚(Pelteobagrus vachelliRichardson), 俗稱江黃顙, 其生長(zhǎng)速度和成活率顯著高于黃顙魚[8,9]。雜交黃顙魚(黃顙魚♀×瓦氏黃顙魚♂)的形態(tài)特征和黃顙魚非常接近, 但其受精率和生長(zhǎng)速度明顯優(yōu)于黃顙魚[10,11]。同樣, 雜交黃顙魚繁育所用的母本也非常混雜, 苗種畸形率高。由于子代的很多生長(zhǎng)性能是由母本決定的, 建立一個(gè)優(yōu)良性狀穩(wěn)定的全雌配套系對(duì)于全雄黃顙魚和雜交黃顙魚的生產(chǎn)尤為重要。劉漢勤等[6]利用人工雌核發(fā)育技術(shù), 發(fā)現(xiàn)其雌魚的雌核生殖子代中有96.9%的雌魚;由此推測(cè)黃顙魚的性別決定類型是雌性配子同型(XX♀/XY♂)?；诖? 我們?cè)O(shè)計(jì)了一條全雌黃顙魚配套系的生產(chǎn)技術(shù)路線, 通過性逆轉(zhuǎn)技術(shù)將XX雌性黃顙魚逆轉(zhuǎn)為XX雄性黃顙魚, 然后XX雄性和雌性黃顙魚繁殖后即可獲得大量XX雌魚[12]。

人工誘導(dǎo)魚類性逆轉(zhuǎn)方法主要有2種: 其一是添加外源激素直接改變體內(nèi)激素水平誘導(dǎo)性逆轉(zhuǎn),常見的藥物有 17α-甲基睪酮(MT)、11-酮基睪酮(11-KT)、17β-雌二醇(E2)等; 其二是添加抑制劑藥物干擾體內(nèi)激素與受體結(jié)合, 降低魚類性激素水平,例如芳香化酶抑制劑來曲唑(LZ)等。利用MT處理人工誘導(dǎo)黃顙魚性逆轉(zhuǎn)的研究也曾有報(bào)道, 但其結(jié)果存在爭(zhēng)議。姚道霞等[13]在出苗10d開始使用激素處理過的餌料(激素劑量為20 μg/g)喂養(yǎng)黃顙魚, 持續(xù)投喂3個(gè)月, 處理組黃顙魚中雄性比例高達(dá)90.9%。Shen等[14,15]使用MT和LZ兩種藥品對(duì)黃顙魚進(jìn)行轉(zhuǎn)雄處理, 處理方法為10日齡至59日齡之間采用連續(xù)投喂藥物浸泡的豐年蟲處理。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用MT處理的黃顙魚并沒有顯著改變其性別比, 但所有處理組都誘導(dǎo)出一定比例的間性性腺; 而3種濃度的LZ口服處理分別產(chǎn)生了75%、83.3%和75%的雄性。但這些研究過程中并未使用到性染色體連鎖的分子標(biāo)記, 不能區(qū)分XY和XX雄魚, 故不能確定是否獲得XX雄魚[13—15]。在本研究中, 我們使用不同濃度17α-甲基睪丸酮(MT)和來曲唑(LZ)處理黃顙魚魚苗, 并應(yīng)用性染色體連鎖分子標(biāo)記, 希望探索出XX雌性黃顙魚轉(zhuǎn)雄的切實(shí)可行方法, 并獲得XX雄魚。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)魚親本均為湖南田家湖收集的野生黃顙魚, 實(shí)驗(yàn)魚苗為野生親本經(jīng)人工授精孵化所得, 出膜后3d用豐年蟲開口, 7日齡進(jìn)行激素和藥物處理實(shí)驗(yàn)。在7—29日齡期間, 用不同濃度的MT (25和50 μg/L)和LZ (100、300和1000 μg/L)浸泡豐年蟲1h后再投喂。在30—60日齡期間, 用對(duì)應(yīng)濃度的MT (25和50 mg/kg)和LZ (100、300 和1000 mg/kg)拌入微粒飼料后再投喂(飼料購(gòu)自湖州億盛飼料有限公司, 主要成分: 粗蛋白≥45.0%, 粗脂肪＞5.0%,粗纖維≤6.0%, 灰分≤15.0%, 水分≤10.0%)。MT和LZ溶于95%的乙醇, 拌入微粒飼料后于40℃中烘干4h, 對(duì)照組僅加入95%乙醇。實(shí)驗(yàn)共6個(gè)組:0 (對(duì)照組)、MT25、MT50、LZ100、LZ300和LZ1000。每組3個(gè)平行, 每個(gè)平行隨機(jī)放入300尾魚苗。在7—29日齡期間, 魚苗飼養(yǎng)于60 L的循環(huán)水水箱中, 每天投喂3次。達(dá)30日齡時(shí)轉(zhuǎn)入4 m3的流水水泥池中, 每天投喂2次。在實(shí)驗(yàn)期間, 水溫保持26—28.5℃, 溶氧5.5—6.8 mg/L。每天清理殘餌糞便, 及時(shí)換注新水。黃顙魚性腺分化的關(guān)鍵時(shí)期是8—30日齡, 本次實(shí)驗(yàn)選擇7—60日齡期間連續(xù)用藥物處理, 能夠完全覆蓋其性腺分化的關(guān)鍵時(shí)期[16]。

61日齡取樣鑒定, 剩下的魚轉(zhuǎn)喂正常顆粒飼料(購(gòu)自正大飼料有限公司, 主要成分: 粗蛋白≥40.0%, 粗脂肪＞5.0%, 粗纖維≤10.0%, 灰分≤16.0%, 水分≤12.0%)。每個(gè)平行隨機(jī)抽取30尾魚,用烏來糖麻醉后測(cè)量體長(zhǎng)(精確到0.1 mm)、體重(精確到0.01 g), 并統(tǒng)計(jì)各組存活率。再?gòu)闹腥〕?5尾進(jìn)行解剖, 觀察性腺發(fā)育情況。解剖后用Bouin’s液固定性腺、拍照、編號(hào)留存。再取出性腺置于PFA中繼續(xù)固定, 24h后加入PBS緩沖液(PFA∶PBS=1∶4), 編號(hào)后4℃保存。與此同時(shí), 剪取尾鰭用于性別分子鑒定。性腺照片編號(hào)、固定的性腺編號(hào)、尾鰭編號(hào)須一一對(duì)應(yīng)。

1.2 基因組DNA的提取

取鰭條0.2 g左右, 使用醋酸銨法提取基因組DNA, 將DNA溶于100 μL的超純水中, 4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 PCR擴(kuò)增及性別鑒定

性別鑒定的PCR引物來源于Dan等[3]分離得到的黃顙魚性染色體連鎖標(biāo)記(XY-F: 5′-GATTG TAGAAGCCATCTCCTTAGCGTA-3′; XY-R: 5′-CATGTAGATCACTGTACAATCCCTG-3′)。PCR反應(yīng)體系為10 μL: 2×EsTaqMaster Mix (Dye)5 μL, 上下游引物各0.5 μL (10 μmol/μL), 模版1 μL(50 ng/μL), 加ddH2O補(bǔ)至10 μL。PCR反應(yīng)程序?yàn)?94℃預(yù)變性3min, 34個(gè)循環(huán)(94℃ 30s, 59℃ 30s,72℃ 40s), 72℃ 5min。PCR反應(yīng)在T100 Thermal Cycler (Bio-Rad, 美國(guó))上進(jìn)行。得到的PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳, 再利用凝膠成像系統(tǒng)依據(jù)片段長(zhǎng)度鑒別出XY和XX。XY為2條帶(826和955 bp),XX為一條帶(955 bp)。

1.4 性腺組織學(xué)觀察

將各組鑒定出的XX魚性腺樣本送往谷歌生物技術(shù)有限公司做常規(guī)石蠟切片, HE染色后在顯微鏡下觀察性腺發(fā)育狀況、拍照并統(tǒng)計(jì)性別比例。

1.5 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示, 采用SPSS 18.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA), 若差異達(dá)到顯著水平, 則采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較, 顯著性水平P＜0.05。

2 結(jié)果

2.1 MT和LZ處理對(duì)黃顙魚存活率及生長(zhǎng)的影響

利用 SPSS 軟件對(duì)6組黃顙魚(每組3個(gè)平行重復(fù))在61日齡時(shí)的存活率、體長(zhǎng)以及體重進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)(表1)。在7—61日齡處理期間, 5個(gè)實(shí)驗(yàn)組黃顙魚的存活率與對(duì)照組無顯著差異; 在61日齡時(shí), 對(duì)照組幼魚平均體長(zhǎng)和3個(gè)LZ處理組無顯著差異, 而顯著高于2個(gè)MT處理組; MT25、MT50、LZ100三組幼魚平均體重與對(duì)照組差異顯著, 而LZ300、LZ1000兩組與對(duì)照組無顯著差異。以上結(jié)果說明, MT和LZ對(duì)黃顙魚存活無明顯影響, 綜合61日齡各組幼魚平均體長(zhǎng)和體重兩組數(shù)據(jù)可得出:MT對(duì)黃顙魚魚苗生長(zhǎng)有明顯的抑制作用, 而LZ對(duì)其生長(zhǎng)的影響不明顯。

2.2 MT和LZ處理對(duì)XX黃顙魚性腺發(fā)育的影響

61日齡時(shí), MT和LZ處理的黃顙魚外表均有雄性生殖突, 但不能單一從外觀來確定性別。我們將各組黃顙魚個(gè)體通過性別分子標(biāo)記進(jìn)行性別鑒定(圖1)后進(jìn)行性腺的組織學(xué)觀察, 6組實(shí)驗(yàn)魚的性腺發(fā)育情況及所占比例結(jié)果見表2。61日齡對(duì)照組正常卵巢(圖2A-B)和正常精巢(圖2C-D)的外觀結(jié)構(gòu)和組織學(xué)觀察結(jié)果如圖2所示。在MT25和MT50處理組的XX黃顙魚中, 發(fā)現(xiàn)其性腺外觀結(jié)構(gòu)與普通XX卵巢的寬條型結(jié)構(gòu)明顯不同, 與普通XY精巢性狀類似但沒有精小葉結(jié)構(gòu)(圖3A和圖3C); 組織切片觀察顯示MT25和MT50處理組的XX性腺有精小囊結(jié)構(gòu), 但里面為空腔(圖3B和圖3D)。結(jié)果顯示2個(gè)MT處理組的黃顙魚均未成功逆轉(zhuǎn), 全部表現(xiàn)為發(fā)育不良的精巢。

表1 61日齡時(shí)不同濃度MT和LZ處理組的存活率、體長(zhǎng)及體重統(tǒng)計(jì)Tab. 1 Effects of various doses of MT and LZ on survival rate, total length, and weight at 61 days post fertilization (n=30)

圖1 利用PCR反應(yīng)鑒定黃顙魚遺傳性別的示意圖Fig. 1 The genetic sex of yellow catfish was identified by polymerase chain reaction (PCR) method with the sex-linked markers

表2 61日齡不同濃度MT和LZ處理組的XX基因型黃顙魚的性腺結(jié)構(gòu)統(tǒng)計(jì)Tab. 2 The effects of various doses of MT and LZ on the gonad of XX yellow catfish at 61 days post fertilization (n=15)

圖2 61日齡對(duì)照組正常卵巢和精巢結(jié)構(gòu)Fig. 2 The phenotype and histology of normal ovary and testis at 61 days post fertilization in the control group

在LZ處理組中, 所有的XX性腺均表現(xiàn)為發(fā)育不良的精巢或者完全發(fā)育的精巢(表2)。在LZ100處理組中, 絕大多數(shù)只能逆轉(zhuǎn)成沒有精小葉的不良精巢(圖4A-B), 有少部分為有半截正常精小葉的不良精巢(圖4C-E)。此外, 3個(gè)LZ處理組中僅有LZ300與LZ1000出現(xiàn)了完全逆轉(zhuǎn)的XX精巢(圖4F-G)。LZ300與LZ1000出現(xiàn)的完全逆轉(zhuǎn)的XX精巢的比例分別為20.0%和35.7% (表2)。以上結(jié)果表明: 低濃度的MT (25 mg/kg、50 mg/kg)和低濃度的LZ (100 mg/kg)均不能使XX黃顙魚完全性逆轉(zhuǎn); 隨著LZ的濃度升高, XX黃顙魚無精小葉和有部分精小葉的不良精巢比例逐漸降低, 正常精巢的比例逐漸增高, 向雄性逆轉(zhuǎn)的趨勢(shì)逐漸增強(qiáng)。

圖3 61日齡MT處理組XX黃顙魚性腺結(jié)構(gòu)Fig. 3 Dysplastic testis after MT treatment at 61 days post fertilization

圖4 61日齡LZ處理組XX黃顙魚性腺結(jié)構(gòu)Fig. 4 The phenotype and histology of XX gonad after LZ treatment at 61 days post fertilization

圖5 一齡XX生理雄魚性腺結(jié)構(gòu)Fig. 5 Gonad structure of one-year-old XX physiological male

2.3 一年齡XX生理雄魚性腺發(fā)育及繁殖力

我們對(duì)成功逆轉(zhuǎn)的XX生理雄魚性腺發(fā)育進(jìn)行了追蹤, 1周年后解剖觀察, 取成功逆轉(zhuǎn)發(fā)育良好的XX精巢和正常XY雄魚精巢做切片和HE染色比較分析。解剖顯示, XX生理雄魚精巢發(fā)育良好, 但與XY正常雄魚精巢相比略顯細(xì)小(圖5A和圖5C)。組織學(xué)觀察顯示, XX生理雄魚精巢發(fā)育正常, 精小囊中充滿了精子, 與XY正常雄魚精巢相比沒有明顯差異(圖5B和圖5D)。用完全逆轉(zhuǎn)的XX生理雄魚分別與XX雌魚和YY雌魚交配, 統(tǒng)計(jì)受精率, 并對(duì)其子代做性別分子鑒定。結(jié)果顯示, XX生理雄魚受精率略低于XY正常雄魚, 但整體受精狀況良好(表3)。對(duì)繁育出的子代做性別連鎖分子鑒定顯示, XX♂× XX♀的子代全為XX, XX♂×YY♀子代全為XY (圖6)。以上結(jié)果說明, 由LZ處理成功逆轉(zhuǎn)的XX生理雄魚性腺后期發(fā)育穩(wěn)定, 能夠正常繁殖,并具備較好的繁殖能力。

表3 XX生理雄魚受精率統(tǒng)計(jì)Tab. 3 The fertilization rate of XX physiological male

圖6 子代性別分子鑒定Fig. 6 The sex genotype of offspring was identified by PCR method with the sex-linked markers

3 討論

魚類的性別決定可分為遺傳型性別決定和環(huán)境型性別決定兩類[17—20]。但無論哪種性別決定型,性激素在性別分化或轉(zhuǎn)變過程中都起著至關(guān)重要的作用。17α-甲基睪酮(MT)是一種人工合成雄激素, 其誘導(dǎo)魚類從雌性向雄性逆轉(zhuǎn)的機(jī)制有2種觀點(diǎn): (1)MT直接作用于卵巢或?qū)ο虑鹉X-垂體軸產(chǎn)生正反饋?zhàn)饔么偈狗置诖傩韵偌に?GTH), 進(jìn)而誘導(dǎo)原始生殖細(xì)胞和性腺向精巢組織分化[21]; (2)MT通過抑制卵巢中芳香化酶基因(P450 aromatase)表達(dá)導(dǎo)致雌二醇(E2)總量降低而引起性逆轉(zhuǎn)[22]。

MT已被廣泛應(yīng)用在魚類性逆轉(zhuǎn)的研究中。李廣麗等[23]采用腹部埋植MT的方法處理2齡雌性赤點(diǎn)石斑魚(Epinephelus akaara), 結(jié)果發(fā)現(xiàn)性腺中卵細(xì)胞退化,精原細(xì)胞增殖,出現(xiàn)大量精母細(xì)胞和精子細(xì)胞。其他的幾種石斑魚如鮭點(diǎn)石斑魚(Epinephelus trimaculatus)[24]、黃腹石斑魚(Epinephelus marginatus)[25]和白紋石斑魚(Epinephelus aneus)[26]中,MT也被證明能有效促進(jìn)性逆轉(zhuǎn)。此外, MT也能誘導(dǎo)虹鱒(Oncorhynchus mykiss)[27]、劍尾魚(Xiphophorus helleri)[28]、麥穗魚(Psedorasbora parva)[29]和尼羅羅非魚(Oreochromis niloticus)[30]等魚類雌性向雄性逆轉(zhuǎn)。姚道霞[13]在早前報(bào)道中表示用MT能使黃顙魚發(fā)生性逆轉(zhuǎn), 但和大多數(shù)此類報(bào)道一樣,她的研究中也未使用到性別標(biāo)記, 因此MT誘導(dǎo)黃顙魚性逆轉(zhuǎn)的真實(shí)效果有待進(jìn)一步驗(yàn)證。而且Shen等[14,15]使用MT (50和100 mg/kg)對(duì)黃顙魚進(jìn)行轉(zhuǎn)雄處理, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)用MT處理的黃顙魚并沒有顯著改變其性別比, 但所有處理組都誘導(dǎo)出一定比例的間性性腺。前期, 我們使用高劑量的MT (200 mg/kg)在相同時(shí)期處理黃顙魚魚苗, 并未獲得功能性XX生理雄魚。有趣的是經(jīng)處理過后的黃顙魚無論是XX還是XY均表現(xiàn)為外有雄性生殖突, 內(nèi)為卵巢的結(jié)構(gòu)。這種現(xiàn)象也曾有過報(bào)道, 用高劑量MT或長(zhǎng)時(shí)間處理會(huì)導(dǎo)致某些魚類雌性化[31—33]。解釋這種現(xiàn)象的說法為: 從外部攝入的MT等雄性激素在魚體內(nèi)被芳構(gòu)化, 轉(zhuǎn)變成了雌激素; XY雄性個(gè)體的內(nèi)源性雄激素受到攝入的外源性雄激素的干擾而停止合成[34]?；诖? 我們只設(shè)定用2個(gè)低濃度的MT處理組(25和50 mg/kg)。

此次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明用MT處理黃顙魚對(duì)魚苗的存活率幾乎沒有影響。低濃度的17α-甲基睪酮能夠抑制黃顙魚魚苗的生長(zhǎng), 且不能將XX黃顙魚完全誘導(dǎo)成雄魚, 這與MT處理大口黑鱸(Micropterus salmoides)[35]和大梭魚(Esox masquinongy)[36]的結(jié)果相似。同時(shí)在2個(gè)MT處理組中, 鑒定出來的XY魚性腺也出現(xiàn)了退化, 精巢全部呈空泡狀(結(jié)果未顯示)。在之前的報(bào)道中, 100 mg/kg的MT處理組也出現(xiàn)空泡化精巢[14,15]。MT對(duì)正常雄性黃顙魚精巢的空泡化效應(yīng)可能是由于MT被芳香構(gòu)化產(chǎn)生雌激素所導(dǎo)致。用200 μg/L MT處理黑頭呆魚(Pimephales promelas)后, 雌魚和雄魚血清卵黃蛋白原水平都顯著升高[34]。

芳香化酶是雌激素合成過程中的關(guān)鍵因子, 是催化生物體內(nèi)雄激素向雌激素轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵酶和限速酶, 它將芳構(gòu)化雄烯二酮和睪丸酮分別催化合成為雌酮和雌二醇[37]; 性腺發(fā)育時(shí)期的雌雄激素水平比例是由芳香酶決定的[38]。因此芳香化酶的活性對(duì)動(dòng)物性別分化是至關(guān)重要的, 活性低向精巢發(fā)育,活性高則向卵巢發(fā)育[39]。在斑馬魚(Danio rerio)中,將芳香化酶基因cyp19a1a敲除后, 突變體全為雄性[40]。Letrozole (來曲唑, LZ), 是一種能夠有效抑制芳香酶活性的非固醇類抑制劑, 能有效抑制雌激素的合成。使用LZ處理黃顙魚、暗紋東方鲀(Takifugu obscurus)、胡子鲇(Clarias fuscus)、鯉(Cyprinus carpio)、黃姑魚(albiflora croaker)和青鳉(Oryzias latipes)等魚類的幼魚均能大大提高雄性率, 但均未使用性別標(biāo)記來鑒定該雄魚的基因型[14,15,41—45]。在我們的研究中, 結(jié)合LZ處理和性別連鎖分子標(biāo)記鑒定的方法, 評(píng)估LZ在黃顙魚中是否能有效誘導(dǎo)XX雌魚向XX雄魚性逆轉(zhuǎn)。當(dāng)LZ劑量達(dá)到300 mg/kg時(shí), 約20%的XX雌魚被逆轉(zhuǎn)為能夠正常繁殖的生理雄魚。且隨著其LZ劑量的進(jìn)一步增大, 逆轉(zhuǎn)的成功率也隨之升高。

在正常情況下, 黃顙魚卵巢分化要早于精巢分化。在13日齡時(shí)卵巢便開始出現(xiàn)分化趨勢(shì), 19日齡就能形成卵巢腔。而精巢分化時(shí)間大概在40日齡,直到55日齡才形成精細(xì)小管和輸精管[13]。由此可知, 在本實(shí)驗(yàn)初期, XX雌魚性腺就已先開始發(fā)育,此時(shí)促卵泡激素就已開始刺激性腺分泌雌二醇。同時(shí)促性腺激素又可以調(diào)節(jié)芳香化酶基因的表達(dá)和芳香化酶的活性來刺激卵巢分泌雌二醇[46]。在XX黃顙魚性腺中, 當(dāng)攝入17α-甲基睪酮后, 芳香化酶的活性并未被完全抑制, 仍可將體內(nèi)部分雄激素轉(zhuǎn)化成雌激素, 故性腺不能分化成正常精巢。當(dāng)攝入足夠劑量的來曲唑(300和1000 mg/kg)時(shí), 魚苗體內(nèi)芳香化酶的活性被有效地抑制, 導(dǎo)致雄激素轉(zhuǎn)化成雌激素的通路被阻斷, 魚體內(nèi)雌激素合成減少而雄激素大量積累, 性腺就可以朝精巢方向分化。由此可以說明黃顙魚早期雌激素合成對(duì)于維持雌性的發(fā)育起著至關(guān)重要的作用, 只要芳香化酶的活性不被有效抑制, 17α-甲基睪酮就不能誘導(dǎo)黃顙魚逆轉(zhuǎn)。而黃顙魚轉(zhuǎn)雄的關(guān)鍵在于XX魚體內(nèi)能促進(jìn)生成雌激素的芳香化酶活性是否被抑制。此次實(shí)驗(yàn)探索出了有效將XX生理雌性黃顙魚轉(zhuǎn)化為XX生理雄魚的誘導(dǎo)方法, 為黃顙魚全雌配套系的構(gòu)建奠定了基礎(chǔ)。