黃飛燕 吳健君 張應(yīng)紅 唐榮平 李干鵬

摘 要：為研究西南獐芽菜中的水溶性化學(xué)成分，該研究將西南獐牙菜80%甲醇提取物經(jīng)二氯甲烷萃取后，水溶部分通過(guò)柱色譜及高效液相制備色譜分離純化，結(jié)合波譜分析鑒定結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明：從西南獐芽菜甲醇提取物中分離并鑒定得到了一個(gè)新裂環(huán)烯醚萜苷，命名為西南獐牙菜內(nèi)酯C。

關(guān)鍵詞：西南獐芽菜， 裂環(huán)烯醚萜， 西南獐牙菜內(nèi)酯C， 高效液相色譜

中圖分類(lèi)號(hào)：Q946

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1000-3142（2018）04-0441-03

Abstract：In order to study the water-soluble chemical constituents of Swertia cincta. The 80% MeOH extract of S. cincta was successively partitioned with dichloromethane. And water soluble fraction was separated and purified by column chromatography and high performance liquid chromatography， in combination of the structure accredited by spectroscopic analysis. A new secoiridoid glycoside separated from the methanolic extract out of S. cincta， named swertiacincside C.

Key words：Swertia cincta， secoiridoid glycoside， swertiacincside C， HPLC

西南獐芽菜為龍膽科獐牙菜屬植物，多分布于云南、貴州、四川等地（何廷農(nóng)，1988），具有清熱解毒、利膽退黃的功效（耿家玲等，2012）。西南獐牙菜含有大量的裂環(huán)烯醚萜類(lèi)成分（紀(jì)蘭菊等，2004）?；钚詼y(cè)試證實(shí)裂環(huán)烯醚萜類(lèi)化合物多具有抑制HBV病毒作用，Jie et al（2015）從該植物中分離得到5個(gè)新裂環(huán)烯醚萜類(lèi)化合物，其中swericinctosides A、9-epi swertiamarin、4″-O-acetyl swertianoside E對(duì)乙肝病毒表面抗原（HBsAg）有一定的抑制作用。在前期的研究中，本課題組從西南獐牙菜水溶性部分中已經(jīng)分離得到多個(gè)環(huán)烯醚萜類(lèi)化合物（Yang et al，2012； 李干鵬等，2011； Huang et al，2014）。在對(duì)西南獐牙菜的進(jìn)一步研究中，采用高效液相色譜制備技術(shù)從該植物水溶成分中分離并鑒定得到一個(gè)新的裂環(huán)烯醚萜苷，命名為西南獐牙菜內(nèi)酯C。其結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

1 儀器與材料

PE-241 旋光儀（美國(guó)PE）；Shimadzu UV-2401紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（日本島津）；Shimadzu IR-435型紅外光譜儀（日本島津）；API QSTAR Pulsar液相色譜/四極桿/飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國(guó)PE）；Bruker AV-400Ⅲ核磁共振儀（德國(guó)布魯克）；安捷倫LC-1100液相色譜儀（美國(guó)安捷倫）；MCI、大孔樹(shù)脂（日本三菱）。

西南獐芽菜植物樣品采自云南省玉溪新平縣哀牢山，經(jīng)云南省中醫(yī)學(xué)院楊禮攀博士鑒定為西南獐牙菜（Swertia cincta），植物標(biāo)本存于云南民族大學(xué)民族藥資源化學(xué)國(guó)家民委—教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本室（標(biāo)本號(hào)：0601007）。

2 提取與分離

常溫陰干的西南獐牙菜全草5.0 kg粉碎后，先用80%的甲醇低溫超聲提取，共10次，每次4 h，提取液過(guò)濾、濃縮合并得棕色浸膏約800 g；然后加水?dāng)嚢柚翍腋睿枚燃淄槎啻屋腿?。水相部分濃縮后經(jīng)MCI脫色后合并，經(jīng)大孔樹(shù)脂脫糖洗脫，得到水（100%）部分156 g、甲醇（70%）部分273 g、甲醇（100%）部分45 g；取水部分浸膏45 g用HPLC制備（制備色譜柱為XDB-C18（21.2 mm × 250 mm）；進(jìn)樣量為250 μL；洗脫劑為V甲醇/V水=35/65（滴加3滴甲酸）；流速為8 mL·min-1得到Fr. 1-Fr. 5，再用艾杰爾半制備柱（Venusil XBP-C18 10 mm × 250 mm）；進(jìn)樣量為10 μL；洗脫劑為V甲醇/V水=8/92；流速為2 mL·min-1對(duì)其中的Fr. 1進(jìn)行純化制備，得到化合物1（11 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定與分析

化合物1 無(wú)色固體（MeOH），mp145～148 ℃。 [α]D19-8° （c 0.070， MeOH）。ESI--MS m/z=425（M+Cl），HR-ESI-MS m/z=425.0850（C16H22O11Cl），推測(cè)分子式為C16H22O11，IR（KBr）cm-1：3431（-OH），1624（C=O），UV中λmax=203 nm。1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。從表1可以看出，1H-NMR和13C-NMR中顯示分子結(jié)構(gòu)中含有4個(gè)亞甲基、9個(gè)次甲基和3個(gè)季碳，13C-NMR譜中低場(chǎng)區(qū)碳信號(hào)δ161.2提示化合物結(jié)構(gòu)中存在一個(gè)內(nèi)酯羰基，烯碳信號(hào)δ157.3，122.4可推斷化合物結(jié)構(gòu)中存在一個(gè)C=C。

分析化合物的1H-NMR，質(zhì)子信號(hào)δ2.95～δ4.32之間有特征的葡萄糖基信號(hào)，結(jié)合13C-NMR中δ98.1，73.1，76.5，69.9，76.9，60.9等數(shù)據(jù)進(jìn)一步確定，化合物經(jīng)酸水解分析確認(rèn)苷元為D-葡萄糖，苷元端基質(zhì)子偶合常數(shù)為8.0 Hz，可確定糖的相對(duì)構(gòu)型為beta構(gòu)型。1H，1H-COSY譜中可以看出C-H （9）與C-H （8）、C-H （1）相連，C-H （8）與CH2 （10）相連，CH2 （6）與CH2 （7）相連。結(jié)合13C-NMR及 1H-NMR譜可以看出8位的碳有一個(gè)-OH取代。HMBC譜表明H-1與C-1′相關(guān)，表明苷元連在C-1上，H-1與C-3相關(guān)可得知C-1與C-3之間通過(guò)O相連， 同時(shí)H-1還與C-5、C-8相關(guān)， H-3與C-10、C-5、C-11，H-6與C-4有相關(guān)性；H-7與C-11、C-5相關(guān)，可推測(cè)化合物結(jié)構(gòu)中存在六元內(nèi)酯結(jié)構(gòu)， H-9與C-4、C-10存在聯(lián)系，相關(guān)核磁波譜數(shù)據(jù)與化合物swertiacinctosides B（Jie et al，2015）、sweitiajaposide A（Masao et al，2005）、sweitiajaposide C（Masafumi et al，2008）進(jìn)行比對(duì)后推測(cè)該化合物為裂環(huán)烯醚萜苷，結(jié)合H-3與C-10的相關(guān)性可推導(dǎo)C-H （3）與CH2 （10）之間通過(guò)O相連形成七元氧雜環(huán)。

4 結(jié)論

依據(jù)化合物的結(jié)構(gòu)解析見(jiàn)圖1，通過(guò)查詢(xún)國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)以及數(shù)據(jù)庫(kù)均未見(jiàn)有相關(guān)的報(bào)道。因此，確定該化合物為新化合物，命名為西南獐牙菜內(nèi)酯C。

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