鄭穎華

（菏澤市立醫(yī)院 重癥醫(yī)學(xué)科，山東 菏澤 274000）

過氧乙酸又稱過醋酸或乙酸，可在室內(nèi)家具、居室表面、空氣中廣泛消毒。過氧乙酸的檢測方法常見有動力學(xué)比色法、碘量法和其他分光光度法等[1]。碘量法操作十分繁瑣，終點觀察的穩(wěn)定性較差，5 min內(nèi)返藍現(xiàn)象多次出現(xiàn)，影響最終結(jié)果[2]；探究消毒液檢測過氧乙酸的方法有重要價值，故本研究探究予以陽離子表面活性劑及增敏動力學(xué)聯(lián)合檢測消毒液中的過氧乙酸，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

0.1 mg分析天平為北京天平儀器公司提供，可見分光光度計（7230G型）為上海美析科技有限公司提供；按照衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》（2002）對CH3COOOH標(biāo)準(zhǔn)溶液予以碘量法精確評估，二次稀釋濃度為1.50×10-4mol/L；溶解水適宜，110℃下干燥硫酸亞鐵至質(zhì)量穩(wěn)定，二價鐵離子標(biāo)準(zhǔn)容積，加入3 mol/L硫酸至清亮，容積瓶為1 L，表面活性劑為十八烷基三甲基溴化銨、十四烷基溴吡啶（體積均為2 g/L，質(zhì)量濃度均為56 μg/ml）混合；鄰二氮雜菲溶液2 g/L、硫酸溶液、生理鹽水均為1 mol/L。

1.2 方法

取50 ml容積的容量瓶2個，分別加入二價鐵離子標(biāo)準(zhǔn)溶液（2.5 ml 56 μg/ml）、硫酸溶液（3 ml），待測的過氧乙酸溶液適度加入容積瓶中（阻抑體系標(biāo)識），充分振蕩后將氫氧化鈉溶液6 ml加入，混合表面活性劑及鄰二氮菲溶液（2 ml），混合充分后10 min靜置，醋酸-醋酸鈉緩沖液予以稀釋至刻度；與不含鐵的空白試液進行對比，1 cm比色皿檢測510 nm處分光度計的阻抑體系吸光度A、非阻抑體系吸光度A0，且計算△A=A0-A。

2 結(jié)果

2.1 吸收光譜

在400～600 nm的波長范疇中，非阻抑體系VCH3COOOH=0.00 ml吸收峰為510 nm，尖銳峰形，峰值高，單一峰數(shù)，強吸收出現(xiàn)在2.20×104mol吸光系數(shù)，在510 nm處吸光譜未發(fā)生變化，阻抑體系為最大吸收值，吸光度值在加入過氧乙酸為階梯式下降。見圖1。

圖1 吸收光譜

2.2 實驗條件的選擇

2.2.1 表面活性劑 陽離子表面活性劑的激活中吸光度升高，TPB-STAB混合體系出現(xiàn)明顯優(yōu)勢，當(dāng)TPB、STAB劑量相同時，吸光度突然升高，在2.20×104mol吸光系數(shù)吸收波長max。見圖2。

圖2 表面活性劑不同劑型中鄰二氮菲配合物的吸光譜

2.2.2 硫酸用量 過氧乙酸在酸性條件下有助于抑制水解三價鐵離子，硫酸的用量對溶液褪色程度的影響，結(jié)果顯示，控制硫酸在0～2.0 ml范圍內(nèi)，△A隨之增大；△A在2.0～4.0 ml范圍內(nèi)逐漸平穩(wěn)，大于4.0 ml時則下降，本研究為3.0 ml。

2.2.3 鄰二氮菲用量 鄰二氮菲含量0.6～2.0 ml，鄰二氮菲和△A用量呈正相關(guān)，當(dāng)鄰二氮菲用量超過2.0 ml時，△A達到最大值且較平穩(wěn)，本研究選擇2.0 ml。

2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)二價鐵離子溶液用量 當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)二價鐵離子溶液為2.5 ml時，非阻抑吸光度約為1.20，因此標(biāo)準(zhǔn)Fe2+溶液適宜用量為2.5 ml。

2.2.5 穩(wěn)定性和反應(yīng)時間 反應(yīng)時間和吸光度在反應(yīng)起始時間呈正比例，但其達到最大吸光度值及趨于恒定的時間具有一定的差異；當(dāng) PCH3COOOH=0 μg/ml時，非阻抑體系5～8 min（A值）緩慢上升，9 min后逐漸穩(wěn)定；當(dāng)PCH3COOOH=1.0 μg/ ml時，阻抑體系 A值在 1～5 min內(nèi)增高顯著，6 min后趨于平穩(wěn)。在1 h左右A值無顯著改變；本研究在10 min顯色反應(yīng)后對吸光度予以檢測。

2.3 共存離子的影響

當(dāng)過氧乙酸濃度為2 μg/ml時，對無機離子和有機化合物體系予以檢測，當(dāng)誤差＜5%時，MnO2-4、Cr2O2-7濃度相同時產(chǎn)生干擾，10倍的氫氧化氮、Zn2+、Ca2+、Mg2+、葡萄糖、三價鋁離子、3 倍的二價銅離子、一價NO離子、碳酸氫離子等檢測未發(fā)生變化。

2.4 工作曲線

工作曲線予以實驗方式制定，移取不同量的過氧乙酸標(biāo)準(zhǔn)液。條件最佳時，△A和0.05～2.00 μg/ ml的過氧乙酸的線性關(guān)系較佳，線性回歸方程為：△A為1.3234 PCH3COOOH-0.0154，相關(guān)系數(shù)r =0.9997，按照實驗方式對空白平行檢測10次，標(biāo)準(zhǔn)偏差s為0.01，按照3 s/k（k為標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程的斜率）計算方法的檢出限為0.02 μg/ml。見圖 3。

圖3 工作曲線

2.5 樣品分析

2.5.1 處理試樣 取過氧乙酸-1#、過氧乙酸-2#均為5 ml，混合后置存24 h，加入10 ml的H2SO4溶液（2 mol/L），加入高錳酸鉀溶液（0.1 mol/L）至出現(xiàn)粉紅色溶液，溶液中加水至1 L，稀釋液超過10 ml后再加水，最終稀釋液為250 ml。

2.5.2 檢測含量結(jié)果 按實驗方式檢測且加標(biāo)回收待測液1 ml；加入、回收量大體相同，樣品回收率為97.0%～101.7%，見表1。

表1 樣品結(jié)果分析（n =6）

3 討論

本研究于2015年1月‐2016年12月探析菏澤市立醫(yī)院50 ml消毒液內(nèi)予以陽離子表面活性劑和增敏動力學(xué)光充法檢測過氧乙酸，結(jié)果 顯 示： 在 0.05～1.50 μg/ml范 圍 內(nèi) 檢 出 限 為0.02 μg/ml，過氧乙酸及吸光度呈現(xiàn)遞減式線性關(guān)系；在400～600 nm的波長范疇中，非阻抑體系VCH3COOOH=0.00 ml吸收峰為510 nm，尖銳峰形，峰值高，單一峰數(shù)，強吸收出現(xiàn)在2.20×104mol吸光系數(shù)，在510 nm處吸光譜未發(fā)生變化，阻抑體系為最大吸收值，吸光度值在加入過氧乙酸為階梯式下降；吸光度在陽離子表面活性劑的激活中升高，TPB-STAB混合體系出現(xiàn)明顯優(yōu)勢，當(dāng)TPB、STAB劑量相同時，吸光度突然升高，在2.20×104mol吸光系數(shù)吸收波長max。反應(yīng)時間和吸光度在反應(yīng)起始時間呈正比例，但其達到最大吸光度值及趨于恒定的時間具有一定的差異；當(dāng)PCH3COOOH=0 μg/ml時，非阻抑體系5～8 min（A值）緩慢上升，9 min后逐漸穩(wěn)定；當(dāng)PCH3COOOH=1.0 μg/ml時，在1～5 min內(nèi)阻抑體系A(chǔ)值增高顯著，6 min后趨于平穩(wěn)[3-6]。

試驗結(jié)果顯示，吸收光譜說明Fe2+和過氧乙酸僅出現(xiàn)氧化還原反應(yīng)，生成物Fe3+未影響Fe2+二的顯色反應(yīng)，在溶劑效應(yīng)的激活中，460 nm為吸收峰最小值，本吸收峰為Fe2+，檢測吸光度（510 nm）無影響。在選擇試驗條件時，吸光度在予以陽離子表面活性劑發(fā)生程度不同的升高，為發(fā)生協(xié)同增敏機制[7-10]：長鏈STAB是兩性功能化分子，鄰二氮菲混合疏水劑，水溶性增強，與Fe2+接觸較多，進而形成配位反應(yīng)，TPB的吡啶基結(jié)構(gòu)，可進行配位[11-13]，在STAB的刺激下，TPB、鄰二氮菲、二價鐵離子反應(yīng)生成顏色更深的三元絡(luò)合物，摩爾吸光系數(shù)變大，增強光吸收度[14-16]；TPB-STAB體系顯著提高配合物的光敏感度，達到助溶、催化、增敏的功能[17]。其他試驗顯示，CTMAB等陽離子表面活性劑的催化反應(yīng)的增敏功能強大，檢出限為7.5 ng/ml，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4×10-3%，與本研究結(jié)果相符[18]。試驗顯示，在體積50 ml內(nèi)有混合表面活性劑2 ml時，吸光度出現(xiàn)峰值且較平穩(wěn)。酸性環(huán)境中，過氧乙酸對三價鐵離子的水解進行抑制，應(yīng)用2.0～4.0 ml硫酸時，△A逐漸平穩(wěn)，本研究選擇3.0 ml；在反應(yīng)的初始階段吸光度隨著反應(yīng)時間的增加而增大，但其達到最大吸光度值及趨于恒定的時間不等；當(dāng)PCH3COOOH=0 μg/ml時，非阻抑體系5～8 min（A值）緩慢上升，9 min后逐漸穩(wěn)定；當(dāng)PCH3COOOH=1.0 μg/ml時，在1～5 min內(nèi)阻抑體系A(chǔ)值增高顯著，6 min后趨于平穩(wěn)。按實驗方式檢測且加標(biāo)回收1 ml待測液，加入、回收量大體相同，樣品回收率為97.0%～101.7%。綜上所述，鐵（II）-鄰二氮雜菲分光光度法檢測過氧乙酸效果確切。