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(1.唐山師范學(xué)院，唐山市動物營養(yǎng)與飼料工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北 唐山 063000；2.唐山市有巢農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司，河北 遷西 064300)

0 引言

植物單寧是廣泛存在于植物體內(nèi)的次生代謝產(chǎn)物, 為分子量500～3000Da的多酚類化合物, 按其結(jié)構(gòu)的不同可分為水解單寧和縮合單寧兩大類。單寧的化學(xué)性質(zhì)活潑, 尤其是飼料中的單寧易與蛋白質(zhì)、糖類、金屬離子等結(jié)合而成為難以消化吸收的復(fù)合物, 使其具有抗?fàn)I養(yǎng)作用[1-2]。對于反芻動物而言，高含量的單寧可以與唾液中的蛋白質(zhì)、粘蛋白在口腔發(fā)生作用而產(chǎn)生澀味，影響動物的采食量；單寧的抑菌作用也會影響瘤胃的發(fā)酵功能，限制食草動物對營養(yǎng)物質(zhì)的利用[3]。近年來，板栗產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速，種植面積不斷增加，栗樹葉的產(chǎn)量也大大增加。研究表明，栗樹葉中含有較豐富的粗蛋白、粗脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)，可作為反芻動物優(yōu)質(zhì)的粗飼料，具有很好的開發(fā)價值。但因單寧含量高，目前只是作為鹿用粗飼料。研究表明[3]，某些微生物可以將單寧降解，從而降低其抗?fàn)I養(yǎng)作用。鑒于此，本研究利用微貯發(fā)酵技術(shù)處理栗樹葉，以研究其對栗樹葉中單寧含量的影響，以便為栗樹葉的深入開發(fā)利用提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 樣品采集及處理

從河北省唐山市遷西縣板栗生產(chǎn)基地采集栗樹葉樣品，樣品采集后，按照菌種活化→菌液配制→栗樹葉處理→裝罐→密封等步驟對樣品進(jìn)行微貯發(fā)酵，每個組設(shè)3個重復(fù)，發(fā)酵時間45 d。栗樹葉微貯發(fā)酵配方及分組見表1。發(fā)酵結(jié)束后，取各組栗樹葉發(fā)酵物400 g，一部分烘干、粉碎、保存?zhèn)溆?，一部分用于測定pH。

表1 各組微貯成分搭配

注：表中“-”表示未添加該試劑。

1.2 測定指標(biāo)及方法

1.2.1 pH測定

對采集的微貯栗樹葉樣品各取100 g，加入900 mL蒸餾水，冷藏保存24 h，制成浸提液，用pH測定儀立即測定浸出液pH。

1.2.2 單寧測定

分光光度法[4-5]

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用Excel2010軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果及分析

對5組微貯栗樹葉的pH及單寧含量及微貯處理前的栗樹葉中單寧含量測定結(jié)果見表2。

表2 微貯栗樹葉的PH和單寧含量測定結(jié)果

注：表格中的數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤，用標(biāo)記字母法表示差異顯著性，同列數(shù)據(jù)標(biāo)有不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)；同行數(shù)據(jù)字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

從表2數(shù)據(jù)可見，各組栗樹葉微貯后pH均下降，且均在4以下，但各組間無顯著差異(P>0.05)；各組微貯栗樹葉中單寧含量分別比微貯前降低42.99%、47.25%、23.81%、39.81%和38.14%，均達(dá)到極顯著水平(P<0.01)；以2組的降低比例最大，3組的降低比例最小。說明2組配方組合微貯發(fā)酵時對單寧的降解效果最好。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果顯示，5個處理組的栗樹葉經(jīng)過微貯發(fā)酵45 d后，pH均低于4，說明發(fā)酵效果很好。張養(yǎng)東等(2016)報(bào)道[6]，pH是評定青貯飼料品質(zhì)的指標(biāo)之一，優(yōu)質(zhì)的青貯飼料pH一般低于4.2。栗樹葉微貯發(fā)酵可以極顯著降低栗樹葉中單寧含量。單寧作為抗?fàn)I養(yǎng)因子，可以與飼料中蛋白質(zhì)、礦物元素等結(jié)合，降低營養(yǎng)物質(zhì)利用率，還可以降低飼料的適口性，從而降低動物的采食量。

何強(qiáng)等(2001)報(bào)道[7]，對于飼料中的單寧可以通過加入競爭試劑、蒸汽加熱、微波加熱等熱處理、加入碳酸氫鈉等堿處理方法降低單寧的抗?fàn)I養(yǎng)作用。很多文獻(xiàn)顯示單寧可抑制某些細(xì)菌活性，而很多霉菌、酵母菌或細(xì)菌對單寧具有很好的降解作用。李東生(2006)研究了黑荊棘樹單寧的含量、抑菌效果和作用機(jī)理，結(jié)果顯示，黑荊棘樹單寧具有很好的抑菌效果[8]。張梅梅研究了單寧對反芻動物瘤胃微生物的影響，發(fā)現(xiàn)一定添加量的單寧可以降低瘤胃總細(xì)菌、厭氧真菌、三種纖維降解菌、普雷沃氏菌、丁酸弧菌和產(chǎn)甲烷菌的數(shù)量，說明單寧對細(xì)菌生長有一定限制作用[9]。艾慶輝等(2011)報(bào)道[10]，可以通過微生物處理技術(shù)降低植物飼料中單寧含量，某些霉菌、芽孢桿菌屬的細(xì)菌、少數(shù)種類的酵母菌和乳酸菌對降解單寧均有一定的效果。王曉東(2012)報(bào)道[11]，通過篩選，獲得了18株單寧降解菌，可以降解菜籽粕中單寧含量，18株單寧降解菌包括細(xì)菌6株、酵母菌1株、霉菌11株。本研究中用于栗樹葉微貯發(fā)酵的菌劑中含有酵母菌、乳酸菌、芽孢桿菌等細(xì)菌，這些細(xì)菌在微貯發(fā)酵過程中通過一系列的反應(yīng)將栗樹葉中的單寧進(jìn)行分解。

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，通過微貯技術(shù)處理栗樹葉，可使栗樹葉中單寧含量明顯降低。為提高栗樹葉的利用效率飼料化開發(fā)利用提供了技術(shù)支持。