吳麗娜 黃麗芳 黃翠梅 賴玉玲 胡雪梅

梅毒的病原體為梅毒螺旋體, 對于其病原體的直接檢測目前尚存在困難［1］, 因此, 梅毒的血清學(xué)檢測在梅毒的早期發(fā)現(xiàn)與篩檢中應(yīng)用很廣, 并且不同的檢測方法具有不同的特點, 對于各個臨床時期的梅毒患者檢測方法也不盡相同［2-4］。本研究比較TPPA、梅毒螺旋體免疫熒光法抗體定量檢測、RPR3種不同的梅毒臨床檢測方法對于不同時期梅毒檢測的敏感性和特異性, 從而為篩選敏感性和特異性較高的診斷方法提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年6月～2017年7月間本院收治的梅毒確診患者共60例作為陽性組。納入標準：梅毒各期患者, 尚未進行驅(qū)梅治療。排除標準：不愿意參加者, 凝血功能障礙者。在這60例樣本中包括一期梅毒35例, 二期梅毒22例, 胎傳梅毒3例。另選取同期60例非梅毒患者作為陰性組, 包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者28例, 新生兒4例, 孕婦15例, 健康人13例。

1.2 方法 在征得受試者同意后, 采集受試者血樣3 ml, 靜置待血液凝固后使用離心機(白洋離心機B600A)4000 r/min分離血清后分別進行TPPA、梅毒螺旋體免疫熒光法抗體定量檢測和RPR實驗, TPPA檢測試劑選取日本富士株式會社生產(chǎn)的梅毒螺旋體明膠凝集試驗試劑盒進行, 梅毒螺旋體免疫熒光法抗體定量檢測試劑由蘇州新波技術(shù)有限公司提供。RPR檢測試劑由上?？迫A生物工程股份有限公司提供。檢測操作由專門的實驗人員嚴格按照試劑說明書進行。實驗結(jié)果一式兩份, 由2名組員使用Epidada 3.0 雙錄入, 后經(jīng)數(shù)據(jù)核查后輸出到SAS 9.4進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2.1 梅毒陽性組的一般情況 梅毒陽性組共60例, 其中男36例, 女24例；年齡4周～53歲；一期梅毒35例, 二期梅毒22例, 胎傳梅毒3例。見表1。

2.2 3 種檢測方法對于梅毒的檢測正確率 RPR檢測正確率為81.67%, TPPA檢測正確率為90.83%, 免疫熒光法抗體定量檢測正確率為85.00%。見表2。

2.3 3 種檢測方法的敏感性與特異性比較 3種檢測方法中特異性最高的是TPPA檢測, 為88.3%；一期梅毒的檢測敏感性最高的是TPPA檢測與免疫熒光法抗體定量檢測, 均為97.1%, 正確指數(shù)最高的是TPPA檢測, 為85.4%；二期梅毒的檢測敏感性最高的是TPPA檢測, 為100.0%, 正確指數(shù)最高的是TPPA檢測, 為88.3%；胎傳梅毒的檢測敏感性最高的是免疫熒光法抗體定量檢測, 為100.0%, 正確指數(shù)最高的是免疫熒光法抗體定量檢測, 為73.3%。見表3。

表1 梅毒陽性組的一般情況(n, %)

表2 3種檢測方法對于梅毒的檢測結(jié)果(n)

表3 三種檢測方法的敏感性與特異性比較(%)

3 討論

本研究的結(jié)果對于臨床不同分期的梅毒檢測具有一定的指導(dǎo)意義, 在研究中觀測到對于一期梅毒的檢測, TPPA與免疫熒光法抗體定量的敏感性最高, 而對于二期梅毒TPPA的正確率最高。對于胎傳梅毒的檢測, RPR與TPPA的正確指數(shù)都不高, TPPA為對于梅毒血清免疫球蛋白G(IgG)檢測為特異性最高的手段［5-8］, 但是由于其無法區(qū)別IgG的胎體或母體來源故而敏感性并不高, 但對于胎兒年齡＜1歲并且未接受治療者的檢測結(jié)果為陰性或胎兒母體反映為陰性者可作為排除診斷［9-11］。

相比之下, 免疫熒光法抗體定量的檢測結(jié)果更加可靠,此外對于免疫球蛋白M(IgM)的檢測結(jié)果更為可靠, 相比之于IgG, IgM無法通過胎盤, 且胎兒從24周時便可以產(chǎn)生特異性的IgM, 故陰性的IgM無法排除胎傳梅毒, 但IgM的陽性結(jié)果可以作為胎傳梅毒感染的確切證據(jù)［12-14］。但由于其對實驗室條件與人員技術(shù)水平的要求較高, 而且所用試劑比較昂貴,因此并不適合梅毒的初篩, 并且由于類風(fēng)濕因子等因素的干擾, 其特異度并不高［15，16］。相比之下各項敏感性與特異性都一般的RPR的操作簡單, 應(yīng)用試劑盒便可完成。故而比較適用于下級醫(yī)院或是偏遠地區(qū)的梅毒篩查。

梅毒螺旋體由于無法進行實驗室培養(yǎng), 且針對其病原體的檢測較為困難(兔接種試驗要求時間過長, 而暗視野顯微鏡檢測螺旋體方式需在實驗室中進行［17,18］。但由于多數(shù)梅毒感染者為無癥狀或皮損癥狀為一過性, 故而梅毒的血清學(xué)檢測應(yīng)用更加廣泛。梅毒陽性組男36例，女24例；年齡4周～53歲；一期梅毒35例，二期梅毒22例，胎傳梅毒3例。對于梅毒檢測，RPR檢測正確率為81.67%，TPPA檢測正確率為90.83%，免疫熒光法抗體定量檢測正確率為85.00%。3種檢測方法中特異性最高的是TPPA檢測，為88.3%；一期梅毒的檢測敏感性最高的是TPPA檢測與免疫熒光法抗體定量檢測，均為97.1%，正確指數(shù)最高的是TPPA檢測，為85.4%；二期梅毒的檢測敏感性最高的是TPPA檢測，為100.0%，正確指數(shù)最高的是TPPA檢測，為88.3%；其中針對胎傳梅毒的檢測3種方法的正確指數(shù)均不高，正確指數(shù)最高的是免疫熒光法抗體定量檢測，為73.3%，RPR與TPPA的正確指數(shù)分別為13.3%、0，這可能與樣本量過少有關(guān)系。在一項綜述［19］中報告對于胎傳梅毒, RPR的靈敏度僅有4%～13%。因此對于胎傳梅毒的早期檢測, 對于IgM的血清學(xué)檢測可能更為可靠, 在一項研究中顯示［20］, 對于IgM的免疫印跡法, 其靈敏度較高, 而且特異度為100.0%。

綜上所述, 對于不同階段的梅毒, 3種方法的靈敏度與特異度不全相同, 因此對于不同時期梅毒檢測的應(yīng)用, 應(yīng)當根據(jù)患者情況以及當?shù)氐牧餍星闆r慎重選擇檢查方法。