（招遠(yuǎn)市張星獸醫(yī)站宋家分站，山東招遠(yuǎn) 265405）

當(dāng)前人工授精技術(shù)在國內(nèi)的發(fā)展歷史有30年左右，近幾年由于關(guān)注這一問題的人數(shù)增加，所以相關(guān)技術(shù)也得到了快速發(fā)展。在牛人工授精發(fā)情期所采用的觀察方法常見的有直腸檢查法、外部觀察法以及激素檢測法，主要是對發(fā)情期的各種行為表現(xiàn)以及生理反應(yīng)進(jìn)行有效分析，開展實(shí)時(shí)授精，使配種授精率得到顯著提高[1]。

1 人工授精的前期準(zhǔn)備工作

1.1 精液的解凍和保存技術(shù)

目前采用細(xì)管凍精技術(shù)對精液進(jìn)行保管，凍精解凍水溫控制影響凍精質(zhì)量。解凍水溫可以根據(jù)配種季節(jié)、室溫變化靈活調(diào)節(jié)。38℃～40℃是適宜的解凍溫度。冬季水溫可適當(dāng)調(diào)高一度，夏季水溫可以降低0.5℃，以提供凍精質(zhì)量。

1.2 凍精解凍方法

之前傳統(tǒng)的凍精辦法是顆粒凍精，采用此方法可以將盛有解凍液的試管放在水溫為39℃～42℃的溫水中進(jìn)行預(yù)熱，再從液氮中取出一粒凍精將其投入溶解液中。投放后不斷搖晃并觀察精液顆粒融化情況，待其融化后從水中取出。若采用細(xì)管凍精需要將從液氮中取出的凍精置于適宜的水溫環(huán)境，搖晃約10s后凍精融化，取出。對解凍的精子置于顯微鏡下進(jìn)行活力檢測，在達(dá)到直線運(yùn)動(dòng)精子為1500～3000萬以上，精子活力在0.36以上可用于正常輸精。

2 牛人工授精發(fā)情期觀察方法及流程

本次關(guān)于牛人工授精發(fā)情期觀察方法采用的主要是外部觀察法，外部直觀觀察法是最簡單的鑒定辦法，通過觀察母牛外部行為表現(xiàn)，精神狀態(tài)、陰道和子宮分泌物的變化，判斷母牛處于哪個(gè)發(fā)情期，并做出是否輸精的決定。母牛發(fā)情期短，且外部行為特征明顯，采用外部觀察法是最直接、簡單的判斷方法。

2.1 發(fā)情初期行為表現(xiàn)及精神狀態(tài)不安

初期母牛表現(xiàn)為不再靜臥到處走動(dòng)，個(gè)別母牛反芻不正常，飼養(yǎng)員會(huì)經(jīng)常發(fā)現(xiàn)母牛與其他牛以額抵額的現(xiàn)象。在將其和牛群隔離的時(shí)候經(jīng)常大聲哞叫，在舍飼群是也會(huì)時(shí)常哞叫，以吸引注意。放牧?xí)r會(huì)有公牛追逐并爬跨，這時(shí)母牛一般不接受爬跨。一般該階段會(huì)維持3～8h不等，其間飼料的攝入量會(huì)減少，奶牛的產(chǎn)奶量也會(huì)降低，并在數(shù)小時(shí)后進(jìn)入發(fā)情盛期。個(gè)別水牛在這一時(shí)期還會(huì)出現(xiàn)脫韁奔跑現(xiàn)象，被農(nóng)戶習(xí)慣稱為“飄風(fēng)”。與休情期不同，發(fā)情初期陰道及子宮頸輕微充血腫脹，黏液分泌量相對于休情期增多且呈透明，此時(shí)分泌物黏液堿性最低，黏性最差。發(fā)情初期不宜授精。

2.2 發(fā)情初期行為穩(wěn)定及情緒暴躁

隨后進(jìn)入發(fā)情盛期，母牛隨處游走的外部表現(xiàn)減少，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)弓背排尿現(xiàn)象。經(jīng)常哞叫，接受爬跨，但是行為敏感，容易暴躁，并且食欲明顯減弱。為了方便觀察，一般會(huì)讓試情公牛間隔3h跟隨爬跨，直到試情結(jié)束[2]。試情時(shí)母牛低頭豎耳，尾根微微聳起，后肢開張，并且保持靜立。處于發(fā)情盛期的母牛，陰道及子宮頸分泌物發(fā)生明顯變化，相較于初期黏液堿性增強(qiáng)，黏性較大且具有較強(qiáng)的牽縷性。銀戶常見玻璃棒狀黏液并流在地上，或粘于腳底。子宮顏色更加鮮紅，且出現(xiàn)腫脹發(fā)亮，伴隨較大的開口。這一時(shí)期，通常出現(xiàn)在發(fā)情15～20h時(shí)間范圍內(nèi)。

2.3 發(fā)情期末回歸平靜，進(jìn)食正常

處于發(fā)情末期的母?；貧w平靜，不再接受公牛的爬跨。具體表現(xiàn)為臀部避讓，并向前挪動(dòng)一兩步，尾根緊貼陰門，一般情況下，采食量恢復(fù)正常。處于發(fā)情末期的母牛分泌的黏液量減少，且不再呈現(xiàn)透明狀，會(huì)混雜乳白色絲狀物，分泌物較之盛情時(shí)期，黏性和成絲性較差。發(fā)情1～3d后，陰道會(huì)出血，且隨母牛所處的階段在50%～90%左右不等。少量出血并不是妨礙受胎，而大量出血時(shí)則會(huì)發(fā)生不易受孕的情況。發(fā)情末期是人工授精的最佳時(shí)機(jī)，一般人工授精率為70%，若凍配人員操作精準(zhǔn)此時(shí)授精成功率可達(dá)80%及以上。

3 人工授精工作具體操作步驟

授精工作的各項(xiàng)使用器具都應(yīng)該嚴(yán)格消毒。每頭母牛使用一支輸精器外套，嚴(yán)禁重復(fù)使用，并保證塑料外套潔凈。將需要授精的母牛遷往輸精固定欄，將牛尾固定在一側(cè)，并對直腸內(nèi)的存續(xù)無進(jìn)行清理，保證外陰和周圍部位的潔凈，在清洗過后可以使用涼開水或生理鹽水再做最后沖洗，擦拭干凈。

發(fā)情期可進(jìn)行兩次輸精，第一次可以在發(fā)情后期接受爬跨時(shí)，第二次可以選擇在之后的6～8h進(jìn)行補(bǔ)配，每次使用一個(gè)劑量的精液。對于進(jìn)行直腸檢查法的母?？梢赃x擇在選擇在卵泡發(fā)育成熟期到排卵期進(jìn)行輸精，此時(shí)能達(dá)到最高的授精率，并且可以節(jié)省凍精，減少凍配人員的工作量[3]。

一般的輸精步驟為穿戴工作服，并進(jìn)行消毒。對使用的輸精器進(jìn)行沖洗，并吸取解凍后的精液，打開母牛陰唇并將輸精管插入母牛陰道內(nèi)。用水沾濕左手，以呈錐形伸入直腸，將宿糞清出。手以錐形，手心向下往前伸，將直腸往后方扒，尋找位于骨盆腔內(nèi)的子宮頸。子宮頸呈水平狀，將輸精槍送至子宮頸口部位，之后隨子宮頸內(nèi)褶皺的變化調(diào)整輸精槍的方向。在沒有褶皺阻擋時(shí)就到子宮體，然后完成輸精。輸精時(shí)避免使用蠻力導(dǎo)致母牛受創(chuàng)，靈活調(diào)整方向就可以順利通過 子宮頸管。若輸精槍進(jìn)入子宮頸口，母牛發(fā)怒，則應(yīng)暫停輸精動(dòng)作，帶母牛狀態(tài)穩(wěn)定后繼續(xù)向前推送。為了避免輸精過程造成戳傷，可以在通過子宮頸三分之二處進(jìn)輸精，在輸精期抽出子宮之前不能離開直腸以防精液逆流，降低授精率。

授精結(jié)束后，保證母牛的營養(yǎng)供給也是提高授精率的關(guān)鍵?？茖W(xué)的飼料配置可以提供充足科學(xué)的營養(yǎng)元素，既保證維生素、礦物質(zhì)的攝入，也不會(huì)超重。保放牧?xí)r間，加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)，同時(shí)遠(yuǎn)離公牛，留心觀察母牛身體變化，直到安全產(chǎn)出，做好孕期護(hù)理。