龔濤武 劉書明 楊洋 林夏妃 朱昭瓊 佘廷志(通訊作者)

（1遵義醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 貴州 遵義 563000）（2遵義醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院 貴州 遵義 563000）

隨著我國(guó)逐漸步入老齡化社會(huì)及醫(yī)療技術(shù)的快速發(fā)展，接受手術(shù)治療的老年患者日益增多。老年患者術(shù)后中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，尤其是術(shù)后認(rèn)知功能障礙（Postoperative cognitive dysfunction，POCD）已成為近年來社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)問題。地氟醚作為一種新型鹵代吸入麻醉劑，因其血?dú)夥峙湎禂?shù)（0.42）最低，并且具有起效快、蘇醒迅速和可控性強(qiáng)的特點(diǎn)，而在臨床廣泛使用[1]。有關(guān)地氟醚的使用是否會(huì)導(dǎo)致老年患者手術(shù)后發(fā)生學(xué)習(xí)記憶能力的損害受到越來越多的關(guān)注。本研究擬借助動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)地氟醚對(duì)老年大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。

1.材料與方法

1.1 主要試劑與儀器

地氟醚（批號(hào)：H094F622）；Morris水迷宮測(cè)試儀（成都泰盟科技有限公司）；Fabius麻醉機(jī)，Vamos氣體監(jiān)護(hù)儀（Draeger公司，德國(guó)）；吸入麻醉箱（自制）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

健康雄性SD老年大鼠30只，體重450～550g，20月齡，由重慶第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[SCXK(渝)2012-0005]。采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，其中實(shí)驗(yàn)組分為4個(gè)亞組即麻醉后蘇醒2h（Des-2組）、12h（Des-12組）、24h（Des-24組）、72h（Des-72組），每組6只。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

麻醉前所有大鼠先進(jìn)行Morris水迷宮適應(yīng)性訓(xùn)練。包括定位航行（5d）和空間探索實(shí)驗(yàn)（1d）。定位航行實(shí)驗(yàn)：設(shè)置平臺(tái)與水面距離為2cm，每天訓(xùn)練4次。大鼠分別于4個(gè)象限中點(diǎn)面向池壁入水，限定大鼠在120s內(nèi)找到并爬上平臺(tái)休息10s，若120s內(nèi)未找到，則引導(dǎo)其找到并置于平臺(tái)上休息10s，記錄逃避潛伏期和總路程?？臻g探索實(shí)驗(yàn)：第6天同一時(shí)間撤去平臺(tái)，大鼠從第四象限入水，游泳120s，記錄平臺(tái)象限停留時(shí)間百分比、平臺(tái)象限運(yùn)動(dòng)距離百分比、平臺(tái)象限進(jìn)入次數(shù)百分比。水迷宮適應(yīng)性訓(xùn)練完成后，CON組于吸入麻醉箱中吸入1L/min Air+1L/min O230min；實(shí)驗(yàn)組吸入8%地氟醚30min。該吸入麻醉箱是一自制（75cm×40cm×15cm）的密閉容器，箱內(nèi)鋪墊少量鈉石灰以吸收CO2，通過控制揮發(fā)罐刻度使大鼠吸入的地氟醚濃度始終維持在8.0%。CON組、Des-2組在分別吸入1L/min Air+1L/min O2和8%地氟醚30min后完全蘇醒2h行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)；Des-12組、Des-24組、Des-72組麻醉完全蘇醒后12h、24h、72h再次行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，所有記錄數(shù)據(jù)同麻醉前。。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（±s）表示，組間各指標(biāo)比較采用單因素方差分析。

2.結(jié)果

麻醉前逃避潛伏期與總路程隨著時(shí)間的推移逐漸縮短；各組原平臺(tái)象限滯留時(shí)間百分比、運(yùn)動(dòng)距離百分比、平臺(tái)進(jìn)入次數(shù)百分比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1、表2。麻醉后各組大鼠的逃避潛伏期、游泳總路程、平臺(tái)象限滯留時(shí)間百分比、運(yùn)動(dòng)距離百分比、平臺(tái)進(jìn)入次數(shù)百分比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3、表4。

表1 麻醉前水迷宮訓(xùn)練逃避潛伏期與總路程（±s，n=30）

表1 麻醉前水迷宮訓(xùn)練逃避潛伏期與總路程（±s，n=30）

注：與第1d比較，aP＜0.05；與第2d比較，bP＜0.05。

組別 逃避潛伏期（s） 總路程（mm）第1d 64.6±5.3 2517.0±337.1第2d 35.8±8.1a 1361.2±243.3a第3d 25.6±8.1ab 1157.9±432.1a第4d 22.2±1.8ab 1046.0±167.3a第5d 20.7±9.0ab 874.2±274.2ab

表2 麻醉前各組大鼠空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比較（±s，n=30）

表2 麻醉前各組大鼠空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比較（±s，n=30）

平臺(tái)象限進(jìn)入次數(shù)百分比(%)CON 組 37.7±1.3 36.5±6.5 31.7±5.4 Des-2 組 38.2±12.9 35.4±9.7 31.8±8.0 Des-12 組 39.1±7.5 36.7±6.9 32.1±6.7 Des-24 組 38.7±11.7 36.3±11.3 33.3±9.1 Des-72 組 38.3±6.3 36.3±8.6 31.3±8.7組別 平臺(tái)象限停留時(shí)間百分比（%）平臺(tái)象限運(yùn)動(dòng)距離百分比(%)

表3 麻醉后各組大鼠逃避潛伏期與總路程（±s，n=30）

表3 麻醉后各組大鼠逃避潛伏期與總路程（±s，n=30）

組別 逃避潛伏期（s） 總路程（mm）CON 組 21.6±7.4 862.4±388.5 Des-2 組 19.0±6.0 712.3±173.8 Des-12 組 18.6±4.6 850.8±155.1 Des-24組 18.7±10.8 849.6±500.4 Des-72組 20.9±13.0 818.6±456.9

表4 麻醉前各組大鼠空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比較（±s，n=30）

表4 麻醉前各組大鼠空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比較（±s，n=30）

平臺(tái)象限進(jìn)入次數(shù)百分比（%）CON 組 37.9±14.3 37.6±10.3 32.2±5.3 Des-2 組 43.2±7.3 40.9±5.4 35.5±7.2 Des-12 組 41.9±10.9 38.7±8.7 34.0±8.4 Des-24 組 42.2±12.6 40.0±10.3 35.5±9.9 Des-72 組 38.5±7.5 35.5±6.6 31.8±8.4組別 平臺(tái)象限停留時(shí)間百分比（%）平臺(tái)象限運(yùn)動(dòng)距離百分比（%）

3.討論

POCD的發(fā)生不僅影響手術(shù)后患者的日常生活，而且還增加手術(shù)后死亡率，至今其發(fā)病機(jī)制尚不明確。影響POCD的因素眾多，而年齡為其中唯一明確的危險(xiǎn)因素，隨年齡的增長(zhǎng)，POCD的發(fā)生率越高[2]。因此，本研究選擇老年大鼠為研究對(duì)象。

Morris水迷宮是Morris于1981年設(shè)計(jì)并應(yīng)用于腦學(xué)習(xí)記憶機(jī)制研究的一種經(jīng)典實(shí)驗(yàn)手段，在AD的基礎(chǔ)研究中應(yīng)用最為普遍。測(cè)試內(nèi)容主要包括定位航行和空間探索實(shí)驗(yàn)兩部分。實(shí)驗(yàn)主要用于評(píng)價(jià)動(dòng)物的空間學(xué)習(xí)記憶功能、回憶探究能力[3]。本實(shí)驗(yàn)老年大鼠麻醉前的逃避潛伏期和總路程隨著時(shí)間的推移逐漸縮短，5d的定位航行適應(yīng)性訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)中逐漸形成了穩(wěn)定的空間學(xué)習(xí)記憶能力?？臻g探索實(shí)驗(yàn)中的各組行為學(xué)檢測(cè)指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明各組老年大鼠對(duì)已形成的空間學(xué)習(xí)記憶的提取無(wú)影響。

地氟醚作為一種新型吸入麻醉劑，在臨床上使用日益增加，地氟醚的使用能否導(dǎo)致POCD已成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。目前有關(guān)地氟醚麻醉對(duì)老年大鼠學(xué)習(xí)記憶能力是否造成影響報(bào)道不一致。本研究中地氟醚使用濃度為臨床常用濃度，并參考文獻(xiàn)選擇8%地氟醚為研究使用濃度。結(jié)果顯示，老年大鼠吸入8%的地氟醚30min后蘇醒2h、12h、24h、72h的逃避潛伏期和總路程與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，各組大鼠空間探索實(shí)驗(yàn)的行為學(xué)指標(biāo)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示8%地氟醚麻醉30min對(duì)老年SD大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力未造成損害。這與Callaway JK等的研究報(bào)道結(jié)果一致，其研究結(jié)果顯示老年大鼠在吸入1MAC的地氟醚后學(xué)習(xí)記憶能力沒有下降。而與文獻(xiàn)[4,5]的報(bào)道不一致，推測(cè)可能原因是：研究對(duì)象年齡不同；使用的吸入藥物濃度和麻醉時(shí)間不同所導(dǎo)致。

綜上所述，地氟醚麻醉后對(duì)老年大鼠的短期學(xué)習(xí)記憶能力未造成損害。而有關(guān)地氟醚在不同吸入濃度、不同吸入時(shí)間和長(zhǎng)期認(rèn)知功能方面的影響仍需進(jìn)一步研究。

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