陳紅娟

（上海市寶山區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院藥劑科中藥房，上海 201999

天麻降壓膠囊系民間驗(yàn)方，由天麻、白芥子、蒼術(shù)、川芎等8味中藥組成的復(fù)方制劑，具有化濕、祛痰、熄風(fēng)的作用，臨床上用于痰濁型高血壓病。天麻含有天麻素、天麻苷元等成分，天麻素能顯著改善在高血壓發(fā)生發(fā)展中起重要作用的內(nèi)皮素、血管緊張素Ⅱ等的作用，使患者血壓下降[1]。天麻苷元和天麻素的作用部位均位于神經(jīng)中樞，使血管阻力降低，小動脈及微血管擴(kuò)張，避免激活交感神經(jīng)，能長時間平穩(wěn)有效控制血壓[2]。天麻為該處方中主要成成分之一，為了控制該制劑的質(zhì)量，采用HPLC測定該制劑中天麻素的含量，該方法結(jié)果滿意，專屬性強(qiáng)、操作簡便，能有效地控制該制劑的質(zhì)量，報道如下。

1 儀器與試藥

2010AHT高效液相色譜儀（島津）；紫外檢測器；CLASS-VP色譜工作站；UV-260可見-紫外分光光度計（島津），ER-180A型分析天平（瑞士，梅特勒）。天麻素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：1108072-20120）；天麻降壓膠囊（蘇州雷奧制藥有限公司制備）；水為超純水，乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方 法

2.1 色譜條件。色譜柱：Phenomenex Gemini C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：乙腈-0.05%磷酸（3∶97）；流速：1.0 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測波長：220 nm；進(jìn)樣量10 μL。在此條件下，天麻素與其他色譜峰分離良好，理論板數(shù)以天麻素峰計算，應(yīng)不低于3000。

2.2 對照品溶液的制備：精密稱取在80 ℃減壓干燥1 h的天麻素對照品適量，精密稱取天麻素4.998 mg，置100 mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液（49.98 μg/mL）[3]。

2.3 供試品溶液制備：取本品適量，研細(xì)，取1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%乙醇，稱定重量，超聲提取45 min，放冷，再稱定重量，用50%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液10 mL，濃縮至近干，殘渣加流動相溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，并用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得[4]。

2.4 陰性對照試驗(yàn)：按處方取缺天麻的陰性對照藥，按供試品溶液制備方法，制得陰性對照溶液，進(jìn)樣，依法測定，結(jié)果陰性對照液在相同位置處無與天麻素相對應(yīng)的色譜峰，表明處方中其他藥材和輔料不干擾天麻素的測定。

2.5 線性關(guān)系的考察：分別精密吸取對照品溶液5、10、15、20、25 μL進(jìn)樣，以峰面積（Y）對進(jìn)樣量（X）進(jìn)行回歸，天麻素的回歸方程為Y=1857.6X+153.3，r=0.9998，表明進(jìn)樣量在0.250～1.25 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6 精密度實(shí)驗(yàn)：精密吸取上述對照品溶液10 μL，按照上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，測定天麻素峰面積值，計算天麻素RSD為1.37%（n=5），表明儀器精密度良好。

2.7 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：精密吸取同一供試品溶液10 μL，分別于0、2、4、8、24 h測定天麻素峰面積，結(jié)果RSD為1.48%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.8 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：精密稱取同一批次的樣品6份，按照供試品溶液制備方法得到供試品溶液，依上述色譜條件測定天麻素的含量，其RSD為1.87%，表明本方法重復(fù)性良好。

2.9 加樣回收率實(shí)驗(yàn)：采用加樣回收法測定，取已知含量的樣品（批號：161219）研細(xì)，取約0.5 g，精密稱定，精密加入天麻素對照品適量，制成各自的供試品溶液，依法測定，計算加樣回收率。結(jié)果見表1。2.10 樣品測定：取3批樣品，各取1 g，精密稱定，按供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，10 μL進(jìn)樣。結(jié)果見表2。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果

表2 樣品測定結(jié)果

3 討 論

本文應(yīng)用HPLC法對天麻降壓膠囊中天麻素含量進(jìn)行測定，通過線性、回收率、重復(fù)性、以及精密度實(shí)驗(yàn)等及其數(shù)據(jù)分析，可以得出該測定方法具有良好的線性及回收率高，本分析方法操作簡便、快速、準(zhǔn)確，可用于麻降壓膠囊質(zhì)量控制。

本文對提取溶劑進(jìn)行了考察，采用了50%、70%甲醇和50%、70%的乙醇作為提取溶劑進(jìn)行比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)50%乙醇作為提取溶劑提取相同的樣品所得的天麻素含量較高且峰形較好。故采用50%乙醇作為提取溶劑。本文對提取方法進(jìn)行了選擇，比較了超聲提取45 min和回流提取45 min兩種方法，結(jié)果表明，超聲提取45 min和回流提取45 min所得天麻素含量相差不大，從方便、節(jié)能的角度考慮，采用超聲提取45 min方法[5]。

[1] 冼慧,王文利.天麻素對高血壓的影響[J].中國民間療法,2007,15(4):24-25.

[2] 陳江,朱黎明.全天麻膠囊聯(lián)合硝苯地平緩釋片對原發(fā)性高血壓患者血液流變學(xué)及終點(diǎn)時間的影響[J].光明醫(yī)學(xué),2011,26(10):2090-2091.

[3] 陳韻蓓.應(yīng)用HPLC法測定天麻頭風(fēng)靈膠囊中天麻素含量[J].實(shí)用醫(yī)院臨床雜志,2014,11(6):154-156.

[4] 隆穎,袁惠霞,喬莉,等.高效液相色譜法測定腦栓通膠囊中天麻素的含量[J].今日藥學(xué),2015,25(4):236-238.

[5] 楊榮艷,秦玉俠.HPLC測定通絡(luò)痹痛丸中天麻素的含量[J].中國現(xiàn)代中藥,2011,13(3):36-42.