鄭秀婕 洪文旭 劉志強*

1.深圳市人口和計劃生育科學(xué)研究所(518000)；2.深圳市血液中心

1 材料與方法

先證者，漢族，女性，25歲，來自于深圳市孕前優(yōu)生健康檢查對象。地中海貧血篩查指標(biāo)分別為：紅細(xì)胞平均體積(MCV)72.6 fl，平均血紅蛋白含量(MCH)22.7 pg ，血紅蛋白A(Hb A)91.7%，血紅蛋白A2(Hb A2)6.2%，抗堿血紅蛋白F(Hb F)2.1%，紅細(xì)胞計數(shù)為5.25×1012/L，血紅蛋白濃度為119 g/L。根據(jù)小細(xì)胞低色素型貧血的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]，判斷其為小細(xì)胞低色素型貧血患者。其家族成員未進(jìn)行地貧基因檢測，未發(fā)現(xiàn)有重型地貧患者。采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聯(lián)合反向斑點導(dǎo)流雜交技術(shù)，未檢出中國人常見的17個位點(19種)的β地中海貧血基因突變。使用DNA測序技術(shù)進(jìn)行基因檢測，在β珠蛋白基因(HBB)的-88位點(HBB:c.-138C>G)發(fā)現(xiàn)雜合突變(圖1)。

圖1基因測序圖

2 討論

β地中海貧血是由于β珠蛋白基因突變或缺失導(dǎo)致β珠蛋白鏈的合成受到部分或完全抑制的一種遺傳性血紅蛋白疾病[2]，是世界范圍內(nèi)最常見的常染色體隱形遺傳病之一，這種單基因遺傳病多由β珠蛋白基因點突變所致，少數(shù)為基因片段缺失[3]。

對先證者的外周血標(biāo)本進(jìn)行DNA測序，在β珠蛋白基因的-88位點發(fā)現(xiàn)HBB:c.-138C>G雜合突變。經(jīng)檢索人類血紅蛋白變異和地中海貧血的數(shù)據(jù)庫(HbVar：http://globin.bx.psu.edu/cgi-bin/hbvar/query_vars3)發(fā)現(xiàn)該位點有3種突變類型(C>A[4]、C>T[5]、C>G)， 其中C>A、C>T這兩種突變均可造成β+型地中海貧血，而C>G沒有相關(guān)文獻(xiàn)報道。在ENSEMBL網(wǎng)站中查詢，結(jié)果表明該突變是致病的，但SIFT和polyphen2無具體評分。HBB上-88位點突變，位于該基因的CAP區(qū)域(圖2)，是負(fù)責(zé)調(diào)控下游基因表達(dá)的重要部分。因此設(shè)想由于該位點的突變，影響其調(diào)控功能，使下游基因表達(dá)發(fā)生變化。我們將對先證者的家族成員做進(jìn)一步檢測，繼續(xù)驗證該設(shè)想。

圖2 HBB結(jié)構(gòu)示意圖

β珠蛋白基因上的點突變(c.-138C>G)為中國首次發(fā)現(xiàn)報道，目前此突變在國內(nèi)無相關(guān)文獻(xiàn)報道，對于該突變的致病機制尚不明確。本例發(fā)現(xiàn)不僅豐富了我國的β地中海貧血的突變譜，更有利于地中海貧血人群篩查、孕前遺傳咨詢以及產(chǎn)前診斷工作。

參考文獻(xiàn)

[1] 張之南.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M].北京:科學(xué)出版社,1998,10～12.

[2] 黃海龍,郭丹華,林娜,等.兩種中國人罕見β-地中海貧血基因突變分析[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,36(10):939-941.DOI:10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2013.10.020.

[3] 李敏敏,鄒亞偉,張碧云,等.1例罕見β地中海貧血基因突變及其家系分析[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,32(3):309-312.

[4] Rund D, Cohen T, Filon D, et al. Evolution of a genetic disease in an ethnic isolate: beta-thalassemia in the Jews of Kurdistan[J]. Proc Natl Acad Sci U S A,1991,88(1):310-314.

[5] Spritz RA, Jagadeeswaran P, Choudary PV, et al. Base substitution in an intervening sequence of a beta+-thalassemic human globin gene[J]. Proc Natl Acad Sci U S A,1981,78(4):2455-2459.