鄒秀月

[摘 要] 通過病原生物學(xué)系列實驗，樹立護士生有菌、無菌觀念，培養(yǎng)無菌操作技術(shù)。實現(xiàn)課程內(nèi)容與職業(yè)標準對接，以職業(yè)需求為導(dǎo)向、以實踐能力培養(yǎng)為重點，培養(yǎng)技術(shù)技能型護士。

[關(guān) 鍵 詞] 無菌觀念；有菌觀念；無菌技術(shù)

[中圖分類號] G712 [文獻標志碼] A [文章編號] 2096-0603（2018）05-0123-01

一、樹立有菌觀念

微生物是肉眼看不見，經(jīng)顯微鏡或電子顯微鏡放大后才可見的微小生物。病原生物中最常見的微生物是細菌，雖然單個細菌肉眼看不見，但群體的細菌是肉眼可見的，如菌落。根據(jù)這個特點，開設(shè)系列實驗，樹立學(xué)生的有菌意識。

（一）空氣中細菌的檢查

將已滅菌好的瓊脂平板開蓋，讓無菌的瓊脂培養(yǎng)基暴露于空氣中10分鐘，然后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。次日，觀察實驗結(jié)果。

次日，學(xué)生肉眼觀察到培養(yǎng)基表面有菌落生長，這些菌落就是空氣中的細菌掉落進去繁殖出來的，一個細菌繁殖成為一個菌落，記錄細菌菌落數(shù)，菌落數(shù)的多少說明空氣的清潔度。該實驗證明空氣中確實有細菌存在。

（二）皮膚上細菌的檢查

用一根手指在已滅菌好的瓊脂平板的培養(yǎng)基表面輕輕劃線，然后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。次日，觀察實驗結(jié)果。

次日，學(xué)生肉眼觀察到培養(yǎng)基表面有菌落生長，這些菌落就是手指上的細菌繁殖出來的，一個細菌繁殖成為一個菌落，記錄細菌菌落數(shù)，菌落數(shù)的多少說明手指皮膚的清潔度。該實驗證明手指上確實有細菌存在。

（三）咽喉部細菌的檢查

用咳碟法進行試驗。取一皿血瓊脂平板，打開皿蓋，距離培養(yǎng)基5～10 cm處對著無菌的培養(yǎng)基咳嗽3～5次，蓋好皿蓋后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。次日觀察實驗結(jié)果。

次日，學(xué)生肉眼觀察到培養(yǎng)基表面有菌落生長，這些菌落就是咳嗽時噴出的咽喉部細菌繁殖出來的，一個細菌繁殖成為一個菌落。該實驗證明咽喉部確實有細菌存在。

取以上這些實驗培養(yǎng)出來的細菌經(jīng)革蘭染色后，在顯微鏡油鏡下觀察。學(xué)生觀察到革蘭染色陽性和陰性的各種形態(tài)的細菌。

通過這樣一系列實驗，學(xué)生從肉眼看不到細菌個體到肉眼看到細菌群體，有菌觀念從感性認識上升到理性認識，認識得到升華。人們看不見細菌不等于它不存在，環(huán)境中和人體上都有大量細菌存在的，護士生必須牢固樹立有菌觀念。

二、樹立無菌觀念

滅菌是指殺滅所有微生物包括細菌的芽孢。無菌是無任何活的微生物，滅菌后的物體就是無菌的，無菌需要滅菌來實現(xiàn)。

（一）瓊脂培養(yǎng)基的制備

人工培養(yǎng)細菌需要制備培養(yǎng)基。培養(yǎng)目的菌必須培養(yǎng)在無菌的培養(yǎng)基上，因此要想培養(yǎng)細菌得從制備無菌的培養(yǎng)基開始。

（二）培養(yǎng)細菌

1.滅菌實驗

按需要量稱量各種物質(zhì)配制好培養(yǎng)基，然后進行高壓蒸汽法滅菌，以無菌操作分裝好培養(yǎng)基做好備用。取兩皿培養(yǎng)基，甲皿中轉(zhuǎn)種上細菌，乙皿不種，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。次日觀察甲、乙兩皿培養(yǎng)基上細菌生長情況。

次日，觀察到甲皿中出現(xiàn)細菌菌落，乙皿無細菌菌落，說明高壓蒸汽法確實殺滅了培養(yǎng)基中的所有細菌。

2.滅菌對照實驗

配制普通瓊脂培養(yǎng)基，甲份進行高壓蒸汽法滅菌，乙份不滅菌。將兩份培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。次日，觀察細菌生長情況。

物品要實現(xiàn)有菌變無菌需要滅菌，滅菌后的物品才是無菌的物品。滅菌的方法有多種，病原生物實驗室常用高壓蒸汽滅菌法、燒灼法、煮沸法對實驗用品進行滅菌。臨床用的注射器、輸液器等都是滅菌后獨立包裝的無菌包。當(dāng)包裝破損時，由于環(huán)境中微生物的污染，它們將變成有菌的。因此，使用前必須檢查包裝是否完好。

通過以上的實驗，提高學(xué)生對有菌和無菌的認識，樹立起有菌和無菌觀念。在將來的工作中，能區(qū)分有菌物品及有菌區(qū)域和無菌物品及無菌區(qū)域，避免交叉污染和感染的發(fā)生。

三、學(xué)會無菌操作

無菌操作是指防止微生物進入人體或其他物品的操作技術(shù)。在進行醫(yī)療技術(shù)操作和微生物實驗時均需要嚴格執(zhí)行無菌操作，防止微生物感染和污染的發(fā)生。

微生物實驗中細菌轉(zhuǎn)種實驗需要多次進行無菌操作，特別能訓(xùn)練學(xué)生的無菌操作能力，形成無菌操作技術(shù)。細菌轉(zhuǎn)種實驗是學(xué)生樹立“有菌和無菌觀念”，練習(xí)“無菌操作”最好的實驗。“有菌、無菌、無菌操作”反復(fù)出現(xiàn)，多次練習(xí)，有利于“有菌、無菌”觀念的樹立，同時培養(yǎng)“無菌操作能力。下面以普通瓊脂培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)種葡萄球菌為例來說明，具體的實驗操作過程見下表。

葡萄球菌轉(zhuǎn)種實驗結(jié)束后，將待種培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，次日觀察實驗結(jié)果，可能出現(xiàn)兩種情況：一種是待種培養(yǎng)皿中有菌落生長，說明轉(zhuǎn)種成功；另一種是待種培養(yǎng)皿中無菌落生長，說明無細菌生長繁殖。分析原因，一種是接種環(huán)燒灼后未待其完全冷卻就去取菌種，將菌種燙死；另一種是取菌種時未取到菌種，從而導(dǎo)致沒有細菌生長繁殖。

在實踐教學(xué)中樹立學(xué)生的有菌、無菌意識，形成無菌技術(shù)，對詮釋抽象理論教學(xué)不僅有驗證作用，而且能讓學(xué)生刻骨銘心地掌握無菌技術(shù)，并在將來的醫(yī)療技術(shù)操作中嚴格執(zhí)行無菌操作技術(shù)，對防止醫(yī)源性感染有極其深遠的意義。

參考文獻：

訾自強，楊秀珍.病原生物與免疫學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.