張優(yōu)明 王麗 駱海濤

[摘要] 血清堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）是一組特異的磷酸酯酶，屬于單酯磷酸水解酶，存在于機體的很多組織器官中，但各器官堿性磷酸酶的理化性質都有不同，由以骨骼，牙齒和肝臟等部位堿性磷酸酶含量較多。由于兒童期生長發(fā)育迅速，骨組織中此酶的含量相對增高，因此有必要了解兒童期血清堿性磷酸酶（ALP）水平，探討其參考區(qū)間及其與性別、年齡之間的相關性，不同年齡組之間應該建立各自的參考區(qū)間，并結合臨床實際情況區(qū)分出生理和病理原因的升高，為相關疾病的診斷提供依據。

[關鍵詞] 兒童期；血清堿性磷酸酶；活性；參考區(qū)間；探討

[中圖分類號] R446.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2018）03（c）-0166-03

血清堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）是一組特異的磷酸酯酶，屬于單酯磷酸水解酶，此酶能催化核酸分子基因的轉換，它不是單一的酶，是一種同工酶，存在于機體的很多組織器官中，但各器官堿性磷酸酶的理化性質都有不同，由以骨骼，牙齒和肝臟等部位堿性磷酸酶含量較多。成人血清堿性磷酸酶水平一般用于判斷肝膽疾病，是肝功檢查組合的一項重要指標。正常人血清中的堿性磷酸酶主要來自骨骼，它是骨骼在發(fā)育期破骨細胞釋放的一種酶，骨ALP由成骨細胞產生，是成骨細胞特異標志物之一，兒童骨骼生長迅速骨ALP是兒童血清ALP的主要來源，兒童血清堿性磷酸酶是兒科醫(yī)生比較重視的一個重要指標，因此有必要建立學齡前兒童血清堿性磷酸酶（ALP）參考值區(qū)間，以便對疾病的診斷作出正確的判斷[1]。

1 對象與方法

1.1 研究對象

為2016年3月—2017年5月來該院兒科體檢的學齡前兒童1 580名，其中男856名，女724名，年齡2～6歲。健康成人為2016年5—12月來該院健康體檢者365名，其中男167名，女198名，年齡19～32歲。通過列表對兩組數據進行比較。

1.2 儀器與試劑

采用BECKMANCOULTER UniCel DxC800 synchron clinical System自動生化分析儀，堿性磷酸酶測定試劑盒，Eeagent Kit for Alkaline Phosphatase Test，該試劑盒可以檢測細胞或組織中的裂解液或勻漿液、血漿、血清等樣品中的堿性磷酸酶活性，Pare-nitrophenyl phosphate是一種常用的磷酸酶顯色底物液，在堿性條件下可以在磷酸酶的作用下生成黃色產物，在400～415 nm波長下檢測吸光度，根據黃色產物的深淺判斷堿性磷酸酶的含量，一般兩者成正比關系。操作過程嚴格按照實驗室SOP文件進行。

1.3 實驗方法

正常抽取兒童空腹靜脈血約4.0 mL，離心分離出血清備用，避免樣品溶液中混入EDTA、氟離子和檸檬酸鹽等堿性磷酸酶的抑制劑，實驗前用標準血清將儀器進行調節(jié)至最佳工作狀態(tài)，然后將測試血清和標準血清同時進行檢測以保證檢測結果的可接受性程度，對檢測數據進行統計學分析，計算對比列表得到相應的參考范圍，對超過檢測區(qū)間的數據另用骨堿性磷酸酶進行下一步分析，但要保證采血后2 h內測試進行完畢。判斷標準：BALP≤213 U/L為正常，213 U/L308 U/L為重度升高。血清堿性磷酸酶活性過低也和一些疾病相關[2]。

1.4 統計方法

按照不同性別和不同年齡兩組間數據均數進行比較，統計分析檢測數據進行正態(tài)性檢驗。采用兩組獨立樣本t檢驗，按年齡多組間均數比較采用單因素方差分析和SNK-q法，取檢驗水準α=0.05。

2 結果

比較性別不同兩組間兒童期血清堿性磷酸酶結果，分析兩者之間血清堿性磷酸酶（ALP）水平差異無統計學意義（t=0.771 4，P=0.440，P>0.05），均成正態(tài)分布，見表1。

比較年齡不同兩組間血清堿性磷酸酶結果，分析每組間血清堿性磷酸酶（ALP）水平差異無統計學意義，并且（F=0.106，P=0.951，P>0.05），均成正態(tài)分布，見表2。

分析1 580名學齡前兒童2～6歲血清堿性磷酸酶水平均呈正態(tài)分布，且與年齡、性別無關，學齡前兒童2～6歲血清堿性磷酸酶檢測結果為（228.66±56.719）U/L，95的可信區(qū)間為（118.53～336.32）U/L，可以作為2～6學齡前兒童血清堿性磷酸酶參考值區(qū)間。

對超出兒童期血清血清堿性磷酸酶參考區(qū)間的6名兒童進行了骨源堿性磷酸酶測定，骨源堿性磷酸酶測定對佝僂病的診斷具有重要意義，其中有4名骨堿性磷酸酶輕度升高，1名中度升高，1名重度升高，其血清堿性磷酸酶測定值均>210 U/L，最低為518 U/L，最高為988 U/L。

不同年齡段兒童血清堿性磷酸酶水平與成人血清堿性磷酸酶水平的比較；1 580名2～6歲學齡前兒童血清ALP水平（228.66±56.719）U/L與365名成人血清ALP水平（79.26±15.168）U/L進行比較，均成正態(tài)分布，且兩者有顯著差異。與成人比較，學齡前兒童血清堿性磷酸酶水平明顯升高（t=-42.405 9，P=0.000，P<0.05）。符合兒童期生理特點。

3 討論

堿性磷酸酶（ALP）大部分分布于人體骨骼和肝臟等組織部位，并經肝臟向膽道外排出的一種酶，但是此酶不是單一的酶，是一種同工酶，目前發(fā)現ALP有6種同功酶，其中ALP1、ALP2、ALP6均來自肝臟，ALP1陽性見于肝外阻塞性黃疸、轉移性肝癌、肝膿腫。ALP2陽性見于肝內膽汁淤滯、急性肝炎、原發(fā)性肝癌等。ALP3來自骨細胞陽性見于骨腫瘤和腫瘤骨轉移，佝僂病和骨軟化病。成人血清堿性磷酸酶水平是判斷肝膽疾病的重要指標，但由于兒童期生長發(fā)育較快，骨細胞增長極度活躍，而ALP3又來自骨細胞，它是骨骼在發(fā)育期破骨細胞釋放的一種酶，是一種正常的生理現象，所以兒童期堿性磷酸酶明顯高于成人，不能用成人的堿性磷酸酶參考范圍作為參考作出錯誤的判斷，誤認為病理性升高，每個人體內都有許多維護身體代謝平衡的激素，如胃內有胃酸，胰臟內有胰島素，生長發(fā)育需要生長激素，這些激素也有著各種各樣不為人知的作用，因此有必要建立學齡前兒童血清堿性磷酸酶參考值區(qū)間，血清堿性磷酸酶是我們人體十分重要的指標。

通過以上數據分析比較不同年齡和不同性別之間血清堿性磷酸酶均成正態(tài)性分布，且按統計學原理分析差異無統計學意義，應采取平均值的95%可信區(qū)間作為參考值區(qū)間。兒童期血清堿性磷酸酶有生理性或病理性增高和降低.在分析病情時一定要加以分析。生理性增高是由于兒童期生長發(fā)育迅速，骨骼細胞發(fā)育活躍，生長期兒童血清堿性磷酸酶主要來自成骨細胞，血清堿性磷酸酶活力可比正常人增高。病理性升高則主要有以下幾種情況：①骨骼系統疾病，如佝僂病、軟骨病、變形性骨炎，成骨細胞癌；②肝膽系統疾病，如肝外膽道阻塞、肝癌、肝硬化等；③應用某些激素類藥物感染等；④病理性降低常見于重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺機能不全或減退、乳糜泄，維生素C缺乏癥壞血病，營養(yǎng)不良，呆小癥，遺傳性低磷酸酶血癥等疾病。

不同年齡段兒童血清堿性磷酸酶水平與成人血清堿性磷酸酶水平的比較。比較年齡不同兩組間血清堿性磷酸酶結果，分析每組間血清堿性磷酸酶（ALP）水平無統計學意義，均成正態(tài)分布。通過該次實驗建立了2～6歲學齡前兒童血清堿性磷酸酶的95%可信區(qū)間作為參考值區(qū)間，其中發(fā)現6例兒童血清堿性磷酸酶活性異常升高，臨床上懷疑為佝僂病，因此該次實驗建立的參考區(qū)間有助于兒童期佝僂病的篩查。

[參考文獻]

[1] 王衛(wèi)兵.血清堿性磷酸酶測定結果的溯源性研究[J].中國醫(yī)療設備，2015，30（12）：49-52.

[2] 錢麗萍.2～6歲學齡前兒童血清堿性磷酸酶活性分析[J].江蘇衛(wèi)視保健，2014（1）：18.

（收稿日期：2017-12-22）