薄艷秋

（遼寧省沈陽(yáng)二四五醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 沈陽(yáng) 110043）

近年來(lái)，由于抗生素濫用現(xiàn)象不斷加劇，致使臨床中各種感染性疾病致病菌的敏感性與耐藥性發(fā)生變異，進(jìn)而增加了臨床診治難度[1]。因此，積極探索有效、快速的細(xì)菌鑒定方法對(duì)于感染性疾病診治具有積極的作用。當(dāng)前臨床細(xì)菌鑒定常用方法有常規(guī)檢驗(yàn)、直接藥敏試驗(yàn)等。本文為對(duì)比分析直接藥敏試驗(yàn)、常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用價(jià)值，于2017年4月至2017年10月特選擇390份血液標(biāo)本展開(kāi)研究，其具體的過(guò)程和結(jié)果見(jiàn)如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料：2017年4月至2017年10月選擇390份血液標(biāo)本作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，選用美國(guó)BD公司的B ACTEC9050全自動(dòng)血培養(yǎng)儀進(jìn)行血培養(yǎng)，篩選出157份陽(yáng)性血液樣本，將其冷藏保存待檢。

1.2 方法

1.2.1 直接藥敏試驗(yàn)：①應(yīng)用無(wú)菌注射器吸取157份陽(yáng)性血液樣本并置于無(wú)菌試管中，以1500 r/min的速率離心處理5 min；②吸取上清液以3000 r/min的速率再次離心處理15 min，后棄上清液取沉淀物加入適量0.9%生理鹽水洗滌2次；③洗滌后收集細(xì)胞黏液進(jìn)行涂片革蘭染色，并觀察其細(xì)菌形態(tài)。若可見(jiàn)革蘭陽(yáng)性（G+）球菌且呈鏈狀，則應(yīng)用水解酪蛋白胨（MH）瓊脂平板+羊血平板以進(jìn)行初步藥敏試驗(yàn)，并以此結(jié)果為依據(jù)選擇合適的酶試驗(yàn)方法，將菌液濃度調(diào)整至6.2×102cfu/L后在藥敏綜合板上進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。若收集的細(xì)胞黏液中觀察到為一般菌則直接接種于MH瓊脂平板上，并應(yīng)用無(wú)菌拭子將其涂抹均勻，貼上藥敏紙片后進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。

1.2.2 常規(guī)藥敏試驗(yàn)：用無(wú)菌注射器抽取適量的陽(yáng)性血液樣本，接種于麥康凱平板、血平板等，并將其置于室溫37 ℃、二氧化碳（CO2）濃度5%的環(huán)境中孵育20～24 h。然后進(jìn)行涂片、革蘭染色和鏡檢，依據(jù)其檢測(cè)結(jié)果選擇合適的氧化酶或觸酶進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)，其中細(xì)菌鑒定選用優(yōu)利特ES3000 生物鑒定儀檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)：①對(duì)比兩組方法檢測(cè)細(xì)菌的符合率；②比較兩種方法對(duì)抗菌藥物的敏感性；③記錄兩種方法檢測(cè)所需時(shí)間，并進(jìn)行組間比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：選用SPSS20.0軟件，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量數(shù)據(jù)以（±s）表示，用t檢驗(yàn)。若P＜0.05為差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組方法檢測(cè)細(xì)菌的符合率比較：157份陽(yáng)性血液樣本中，直接法鑒定出G+球菌、G-桿菌與常規(guī)法鑒定的符合率分別為77.78%、87.60%，且總符合率達(dá)到85.35%（134/157），見(jiàn)表1。

表1 兩組方法檢測(cè)細(xì)菌的符合率比較

2.2 兩種方法的藥敏結(jié)果比較：兩種方法對(duì)G+球菌、G-桿菌的敏感、中度敏感、耐藥結(jié)果比較未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩種方法的藥敏結(jié)果比較

2.3 兩種方法檢測(cè)所需時(shí)間比較：直接法檢測(cè)所需時(shí)間為（9.97±2.69）h，明顯短于常規(guī)法的（71.52±9.01）h，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=31.528，P=0.000）。

3 討 論

長(zhǎng)期臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)[2]，在抗生素濫用的情況下細(xì)菌的耐藥性極易增強(qiáng)，且可誘發(fā)全身感染等相關(guān)并發(fā)癥，影響患者的實(shí)際治療效果，甚至危及其生命安全。因此，有效的細(xì)菌鑒定與藥物敏感性檢測(cè)是臨床合理用藥的前提條件。目前臨床采用的常規(guī)細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)檢測(cè)速度較慢，導(dǎo)致醫(yī)師無(wú)法及時(shí)用藥治療，延誤最佳治療時(shí)機(jī)，影響患者的臨床結(jié)局。近年，隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，直接藥敏試驗(yàn)在臨床中的應(yīng)用越來(lái)越普遍，其主要是直接將陽(yáng)性血液標(biāo)本接種于平板上，且在貼上相關(guān)抗生素藥敏紙片后直接進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。與常規(guī)法相比，該檢測(cè)方法省略了細(xì)菌分離培養(yǎng)這一步驟，大大提高了檢驗(yàn)速度，為臨床治療提供較準(zhǔn)確且更快的參考依據(jù)[3]。結(jié)合本研究結(jié)果來(lái)看，在細(xì)菌鑒定方面，直接法鑒定出G+球菌符合率為77.78%、G-桿菌符合率87.60%，且兩種方法細(xì)菌鑒定總符合率達(dá)到85.35%，與賀春連[4]的研究結(jié)果基本一致，提示直接法能夠?qū)+球菌、G-桿菌進(jìn)行較為準(zhǔn)確的鑒定。另外，直接法與常規(guī)法對(duì)G+球菌、G-桿菌的敏感、中度敏感、耐藥結(jié)果比較未見(jiàn)顯著性差異（P＞0.05），且直接法檢測(cè)所需時(shí)間為（9.97±2.69）h，明顯短于常規(guī)法（71.52±9.01）h，說(shuō)明與常規(guī)法相比，直接法存在良好的藥敏性，同樣能夠準(zhǔn)確地測(cè)出致病菌的敏感性，且可以縮短臨床醫(yī)師獲取檢驗(yàn)報(bào)告的時(shí)間，為病患贏得治療時(shí)機(jī)。

綜上所述，直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的效果相似，但直接藥敏試驗(yàn)?zāi)軌蚩s短檢測(cè)時(shí)間，快速明確病原菌與藥敏結(jié)果，利于臨床早期用藥治療，減少盲目治療。

[1]趙東明.直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)在臨床血液細(xì)菌鑒定與檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果比較[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2013,11(26):391-392.

[2]盧綺萍.醫(yī)院感染相關(guān)細(xì)菌耐藥的現(xiàn)狀與對(duì)策[J].中華消化外科雜志,2014,13(7):511-515.

[3]羅永慧,吳昌志,舒向榮.血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)的評(píng)價(jià)[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2013,31(5):450-451.

[4]賀春連.直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用探討[J].吉林醫(yī)學(xué),2015,36(17):3739-3741.