陳蓮姣,閻青青,王 丹

(1.海南省樂東黎族自治縣婦幼保健院兒科 572500；2.海南醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院兒科，?？?570102)

結核病是威脅人類健康的一大傳染病，相關研究顯示，全世界有1/3的人口感染結核分枝桿菌[1-2]。世界衛(wèi)生組織報道，截止2015年12月，全球新發(fā)結核病2 125萬病例，其中有100萬例為兒童。我國雖有較高的卡介苗接種率，但是每年仍然有60萬左右的新發(fā)病例[3-4]。肺結核的發(fā)病率和病死率居于我國傳染病首位，防治結核病的形勢依然非常嚴峻。在重癥肺結核和結核性腦膜炎中，兒童患者呈顯著上升趨勢。筆者綜合分析γ-干擾素釋放試驗在兒童肺結核的診斷效果及對臨床治療的指導意義，為治療肺結核患兒提供參考。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年2月至2016年10月海南省樂東黎族自治縣婦幼保健院收治的100例肺結核患兒作為研究對象，其中男66例、女34例；年齡6～14歲，平均(10.21±3.21)歲；體質量(30～52)kg，平均(45.32±2.41)kg。疫苗接種：未接種卡介苗42例，接種卡介苗58例。納入標準：(1)符合中華醫(yī)學會兒科學分會呼吸學組制訂的兒童肺結核臨床診斷標準；(2)最終均確診為兒童肺結核；(3)所有入組患兒以及患兒家屬均對本次研究知情同意。排除標準：(1)排除原發(fā)性免疫缺陷性疾病和中途退出者；(2)合并嚴重心、肝、腎功能異常及明顯精神異常者；(3)難以遵循醫(yī)囑完成相關檢查者。

1.2 方法

1.2.1 試劑和設備 結核桿菌特異性細胞免疫反應檢測試劑盒購自武漢海吉力生物科技有限公司，結核菌素購自成都生物制品研究所，抗酸染色液購自珠海貝索生物科技有限公司。

1.2.2 γ-干擾素釋放試驗方法 采集所有患兒2～3 mL靜脈血，采用肝素鈉進行抗凝處理，在室溫下進行運輸和儲存， 在5 h內進行樣品刺激，嚴格按照試劑盒說明書進行相關操作。

1.2.3 結核菌素皮膚試驗 所有患兒均于采血后24 h內在手臂上注射0.1 mL結核菌素， 由醫(yī)院結核科的相關工作人員進行相關操作；3 d后檢測出最終結果，采用直尺來量取硬結塊平均直徑；以紅腫硬塊直徑>15 mm來判斷卡介苗接種者和未接種者；以紅腫硬塊直徑>5 mm作為判斷感染結核分枝桿菌的標準。

1.2.4 抗酸染色法 用接種環(huán)挑取帶血小塊，制成厚涂片之后，將制好的涂片進行抗菌染色處理，加溫使得菌體能夠著色，再使用亞甲藍溶液復染處理，在油鏡下進行觀察，抗酸性細菌呈現紅色，非抗酸性細菌呈現藍色。

1.3 觀察指標 分析不同診斷方法的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值等參數指標。

靈敏度=真陽性/(真陽性+假陰性)×100%；特異度=真陰性/(真陰性+假陽性)×100%； 陽性預測值=真陽性/(真陽性+假陽性)×100%；陰性預測值=真陰性/(真陰性+假陰性)×100%。

2 結 果

2.1 不同診斷方法靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值比較 γ-干擾素釋放試驗的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值明顯高于結核菌素皮膚試驗(P<0.05)，見表1。

2.2 肺結核患者抗酸染色陽性率和陰性率比較 100例肺結核患者抗酸染色陽性有33例，陰性有67例，其中抗酸染色陽性肺結核患者的γ-干擾素釋放試驗陽性率為84.85%(28/33)，陰性肺結核患者的γ-干擾素釋放試驗陽性率82.09%(55/67)。

表1 兩種研究方法靈敏度、特異度、陽性預測值、 陰性預測值比較(%)

3 討 論

準確診斷結核病，并進行規(guī)范化的治療，對控制結核病的流行非常重要。診斷結核病的過程比較復雜，由于卡介苗和結核分枝桿菌與其他肺結核分枝桿菌存在交叉反應，所以在過去幾十年中所廣泛使用的結核菌素皮膚試驗在我國卡介苗的高接種地區(qū)使用價值非常有限。相比起結核菌素皮膚試驗使用的純化蛋白衍生物，γ-干擾素釋放試驗是近年來發(fā)展起來的新型結核病診斷手段[6-8]。

γ-干擾素釋放試驗是通過采用酶聯(lián)免疫吸附試驗定量檢測外周血單核細胞在結核菌特異性抗原刺激下釋放的γ-干擾素，再監(jiān)測機體是否存在結核菌感染[9-11]。結核病高負擔國家一直將卡介苗作為免疫規(guī)劃中的重要疫苗之一，診斷潛伏性結核感染時排除卡介苗接種的交叉干擾能夠提高肺結核疾病診斷的準確率。即使γ-干擾素釋放試驗很難排除卡介苗的交叉反應，但由于γ-干擾素釋放試驗具有價格低且經濟實惠等特點，仍能夠作為篩查結核病患者的參考標準。γ-干擾素釋放試驗通過對T細胞經結核特異性抗原刺激之后產生和釋放γ-干擾素水平進行定量檢測能夠判斷患者是否存在結核感染，在國際上被廣泛使用。本文所采取的國產γ-干擾素釋放試驗方法與結核菌素皮膚試驗方法基本相同，均通過直接刺激和培養(yǎng)外周血，從而區(qū)別抗原，明顯減少卡介苗接種因素干擾。

本研究結果顯示，γ-干擾素釋放試驗的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均明顯高于結核菌素皮膚試驗(P<0.05)。γ-干擾素釋放試驗對肺結核的檢出率比較高，均超過80%[12-13]。本研究結果顯示，100例肺結核患者抗酸染色陽性有33例，陰性有67例，其中抗酸染色法陽性肺結核患者的γ-干擾素釋放試驗陽性率為84.85%(28/33)，陰性肺結核患者的γ-干擾素釋放試驗陽性率82.09%(55/67)。臨床中，當患者具有顯著肺結核特點時，T細胞γ-干擾素釋放試驗為陽性時，肺結核的靈敏度和特異度均顯著提高，因此能夠為抗結核的治療提供有力的指導。除此之外，γ-干擾素釋放試驗在提高肺結核診斷效率時，耗費的成本也應該引起高度重視。

綜上所述，γ-干擾素釋放試驗比結核菌素皮膚試驗診斷肺結核病有較高的靈敏度、陽性預測值、陰性預測值、特異度，對抗酸染色陰性肺結核有較高的檢出率，有良好的臨床應用前景。

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