徐龍英
摘要:植物病害標(biāo)本是植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)對病害癥狀最好的描述。因此,病害標(biāo)本的采集、制作和保存是植物病理學(xué)科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中必不可少的基礎(chǔ)知識和技能。探討了不同類型的植物病害標(biāo)本的采集、制作和保存技巧。
關(guān)鍵詞:植物病害標(biāo)本;采集;制作;保存
植物病害標(biāo)本是高等農(nóng)業(yè)院校植物病理學(xué)科本科教學(xué)不可缺少的實(shí)物,它在教學(xué)中具有直觀、不受季節(jié)和區(qū)域限制的特點(diǎn)。因此,植物病害標(biāo)本的采集、制作和保存是植物病理學(xué)科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中必不可少的基礎(chǔ)知識和技能。
一、植物病害標(biāo)本的采集
在北方由于季節(jié)分明,作物品種豐富,植物病害發(fā)生頻繁,大部分的植物病害標(biāo)本都能從田間采集到。但是,病害的發(fā)生有一定的規(guī)律,要充分掌握病害發(fā)生的季節(jié)規(guī)律及寄主的生長規(guī)律才能收獲癥狀特征比較典型的標(biāo)本。
植物病害大多發(fā)生在根、莖、葉和果實(shí)上,因此所用工具要針對不同的部位,常用的工具有刀、剪、鋤、鋸等,還有標(biāo)本夾、標(biāo)本箱、標(biāo)本紙、小玻瓶、紙袋、標(biāo)簽和記錄本等。
(一)標(biāo)本的采集
大田采集主要分為按季節(jié)采集和按寄主采集。按季節(jié)采集主要是針對每年只在特定時期發(fā)生的病害。如白粉病具有性階段,小麥白粉病多在每年5—6月能夠采集到;植物的灰霉病則在低溫陰雨的條件下容易發(fā)病,每年3—5月最容易采到。按寄主采集主要針對寄主范圍廣泛的病害,如霜霉病,可以在很多植物病害的葉片上發(fā)現(xiàn),常見的有萵苣、葡萄、白菜等;疫病如番茄、馬鈴薯、辣椒疫病等。
(二)采集標(biāo)本的記錄
為了區(qū)分采集的不同的標(biāo)本,采集時要進(jìn)行記載。主要包括寄主名稱、時間和地點(diǎn)、采集人姓名、主要發(fā)生情況和必要的生態(tài)環(huán)境因子。
二、植物病害標(biāo)本的制作
采集的標(biāo)本通過鑒定以后,除去作為分離用的標(biāo)本外,一般都用干燥法或浸漬法進(jìn)行保存,要求能夠盡量保存標(biāo)本的本來性狀。一些微小的可以做成玻片標(biāo)本,比較難以保存的和特殊的標(biāo)本可通過多媒體掃描系統(tǒng)或顯微系統(tǒng)存入計算機(jī)中,制成相應(yīng)的文體圖形、動畫、視頻圖像等。
(一)標(biāo)本干燥制作法
(1)壓制法。采到的植物病害標(biāo)本,若干燥后容易卷縮的(如稻葉),最好隨采隨壓。其他的可以放到采集箱內(nèi)帶回去后壓在吸水紙中,用標(biāo)本夾夾緊,日曬任其干燥。在此期間,要經(jīng)常更換標(biāo)本紙。夏季溫度和濕度較高,容易使標(biāo)本發(fā)霉變色,標(biāo)本紙要勤更換。
(2)燙干法或硅膠烘干法。不準(zhǔn)備作為分離用的標(biāo)本可以采用此2種方法。為了加快標(biāo)本的干燥速度,更好地保持標(biāo)本原有的色澤,可以將剛采集的標(biāo)本放在吸水紙或布中用電熨斗來回迅速燙干或?qū)⑵浼虞d草紙和干燥過的硅膠粉的標(biāo)本夾中捆緊,放入50 ℃烘箱中使其很快干燥。
(3)冷凍干燥法。是目前比較好的方法。標(biāo)本在冷凍的情況下干燥,幾乎能完全保持原有的色澤和形狀。
(二)浸漬標(biāo)本制作法
對于果實(shí)病害和汁液較多的病害以及肉質(zhì)的子囊菌和擔(dān)子菌的子實(shí)體,均可以采用浸漬法保存。但此方法占的面積大,保存時間有限,只能用于保存少量的標(biāo)本,這些標(biāo)本大多用于教學(xué)和示范。
(1)保色浸漬液的配制。根據(jù)植物果實(shí)病害的寄主植物的顏色,可將保色的浸漬液分為保存綠色浸漬液、保存黃色和桔色的浸漬液、保存紅色的浸漬液等。保存綠色的浸漬液很多,要根據(jù)不同的植物病害標(biāo)本選擇適當(dāng)?shù)姆椒?,才能達(dá)到好的效果。如醋酸銅浸漬液:將醋酸銅結(jié)晶逐漸加在50%的醋酸溶液中,到不再溶解為止,原液要根據(jù)標(biāo)本顏色的不同將其用水稀釋3~4倍,然后使用。將標(biāo)本加入到煮沸的稀釋液中,繼續(xù)加熱,標(biāo)本的綠色開始褪去,經(jīng)3~4 min,使綠色恢復(fù)后,將其取出,用清水沖凈,保存于5%的福爾馬林溶液中,或壓制成干燥的標(biāo)本。這種方法保色效果良好,但與原色稍有出入。不能煮的如淡綠色蘋果、梨、綠色葡萄等的病害標(biāo)本可直接浸泡在1%亞硫酸100mL、95%酒精100mL、水800mL配成的溶液中浸泡10~20 d,然后取出,沖洗干凈,再保存在5%的福爾馬林溶液中。另外,還有硫酸銅亞硫酸浸漬液、瓦查浸漬液等,也是保存綠色標(biāo)本常用的方法。對于紅色的果實(shí)病害標(biāo)本如草莓、辣椒、馬鈴薯以及其他的植物紅色組織,選擇病害癥狀典型的標(biāo)本,可以將標(biāo)本浸入瓦查的紅色浸漬液(硝酸亞鈷15 g福爾馬林25mL,氯化錫10 g,水1 000mL)內(nèi),2周后取出沖洗干凈,浸泡在亞硫酸30~50mL,福爾馬林10mL,酒精(95%)10mL,水1 000mL配成的溶液中加以保存。含葉黃素和胡蘿卜素的果實(shí)如杏、梨、柿子、柑橘等,用亞硫酸溶液保存比較適宜。方法是將亞硫酸(含SO2 5%~6%)配成4%~10%的水溶液(含SO2 0.2%~0.5%)中。
三、植物病害標(biāo)本的保存
(一)蠟葉標(biāo)本的保存
(1)散裝標(biāo)本。將干燥好的蠟葉標(biāo)本放進(jìn)消毒室或消毒箱內(nèi),傳統(tǒng)的方法是用酒精、升汞液消毒,或?qū)硵澄坊蛩穆然寂c二硫化碳混合液置于玻皿內(nèi),利用毒氣熏殺標(biāo)本上的蟲或蟲卵,約3 d后即可取出。有條件也在-40 ℃低溫處理消毒。將消毒好的蠟葉標(biāo)本鑒定、整理,然后裝進(jìn)標(biāo)本袋中,貼好標(biāo)簽,以備實(shí)驗(yàn)課用作實(shí)物標(biāo)本,供學(xué)生上課使用。
(2)制作盒裝標(biāo)本。將植物病害癥狀典型的蠟葉標(biāo)本和干燥的果實(shí)標(biāo)本,可利用玻面紙盒的方法進(jìn)行保藏。按照標(biāo)本的大小,選擇合適的紙盒(一般為長28 cm、寬20 cm、高1.5~3.0 cm),在紙盒中鋪1層棉花,棉花上放標(biāo)本和標(biāo)簽,注明寄主植物、寄生菌的名稱、采集時間等,然后加上玻蓋。棉花中可加入少量的樟腦粉或驅(qū)蟲的藥劑。這種方法制作的標(biāo)本可長期保存,循環(huán)使用。
(3)塑封標(biāo)本。適合保存葉片標(biāo)本和較小的莖稈(如小麥、水稻)標(biāo)本。做法是:根據(jù)植物病害標(biāo)本的大小選擇適當(dāng)?shù)淖o(hù)卡膜,將1張比護(hù)卡膜稍小的白紙放入護(hù)卡膜中,在白紙右下角寫上該標(biāo)本的標(biāo)簽,然后把標(biāo)本放在白紙上擺好,再把膜放平,放入預(yù)熱到160 ℃的過塑機(jī)封塑即可。
(二)浸漬標(biāo)本的保存
將已鑒別的標(biāo)本適當(dāng)處理后放在盛有保存液的標(biāo)本瓶中,用蠟或火棉膠封口后,將標(biāo)簽貼在標(biāo)本瓶上進(jìn)行保存。由于浸漬液所使用的藥品大都為揮發(fā)性的,或容易氧化,因此浸漬標(biāo)本最好放在暗處,以減少藥液的氧化,或瓶口因溫度變化而造成破裂。
參考文獻(xiàn):
[1] 方中達(dá).植病研究方法[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,1996.
[2] 黃艷花,覃連紅,梁萍等.植病制片材料的準(zhǔn)備與簡易保存技術(shù)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(11):4577-4578.