張曉芳 田逸君 任麗君 朱江波*

（第二軍醫(yī)大學(xué)藥物安全性評價(jià)中心暨衛(wèi)生毒理學(xué)教研室，上海 200433）

非臨床研究優(yōu)良實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐管理規(guī)范（good laboratory practice for nonclinical laboratory studies，GLP），強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)過程“事事有標(biāo)準(zhǔn)，事事有培訓(xùn)，事事有檢查，事事有記錄”的標(biāo)準(zhǔn)化和規(guī)范化理念[1]。這一指導(dǎo)思想和理念與現(xiàn)代大學(xué)人才培養(yǎng)目標(biāo)所體現(xiàn)的“自主、合作、創(chuàng)新”時代精神[2]相吻合。

新藥研究與評價(jià)課程主要講授從新藥發(fā)現(xiàn)到批準(zhǔn)上市整個過程的活動，其主要內(nèi)容包括新藥評價(jià)概論、新藥的藥學(xué)評價(jià)、臨床前藥理學(xué)評價(jià)、臨床前毒理學(xué)評價(jià)、實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)研究的評估、新藥臨床研究、藥品注冊、新藥評價(jià)的組織管理和新藥研究與開發(fā)等[3]。新藥評價(jià)課程的實(shí)驗(yàn)教學(xué)是基礎(chǔ)理論課的延伸和拓展，將GLP的管理理念應(yīng)用于新藥研究與評價(jià)實(shí)驗(yàn)教學(xué)，希望在培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新精神的同時，其規(guī)范意識也能得到強(qiáng)化，養(yǎng)成良好的科研習(xí)慣，為以后的工作奠定良好的基礎(chǔ)。具體做法如下：

1 結(jié)合GLP人員特點(diǎn)加強(qiáng)師資隊(duì)伍建設(shè)

實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量對學(xué)生的創(chuàng)造能力、思維能力和實(shí)踐能力綜合素質(zhì)的培養(yǎng)起到關(guān)鍵的作用。所以有必要建立一支結(jié)構(gòu)合理、素質(zhì)過硬、業(yè)務(wù)熟練的實(shí)驗(yàn)教學(xué)隊(duì)伍。目前高校師資主要來源是本校畢業(yè)的博士或者引進(jìn)的專業(yè)人才，這些年輕老師經(jīng)過多年專業(yè)學(xué)習(xí)，有著豐富的理論知識儲備，但是實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)欠缺，講授新藥研究與評價(jià)實(shí)驗(yàn)課這門應(yīng)用性較強(qiáng)的課程時如果完全照搬課本內(nèi)容，會有紙上談兵之嫌，學(xué)生無法深刻理解知識點(diǎn)，而且可能失去學(xué)習(xí)的興趣。

從事新藥臨床前安全性評價(jià)工作的研究機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)配備相應(yīng)的工作人員；研究機(jī)構(gòu)的工作人員接受與其工作相關(guān)的教育或者專業(yè)培訓(xùn)，具備所承擔(dān)工作需要的知識、工作經(jīng)驗(yàn)和業(yè)務(wù)能力GLP法規(guī)的要求。作為具備國家GLP實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)的衛(wèi)生毒理學(xué)教研室，在30多年的工作積累中，培養(yǎng)了一大批具有多年新藥評價(jià)經(jīng)歷，工作經(jīng)驗(yàn)豐富，業(yè)務(wù)能力強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)人員，通過教學(xué)技能培訓(xùn)和教學(xué)質(zhì)量考核合格后補(bǔ)充到實(shí)驗(yàn)教學(xué)隊(duì)伍，使師資隊(duì)伍結(jié)構(gòu)趨于合理。這樣的實(shí)驗(yàn)教學(xué)團(tuán)隊(duì)能通過自身的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)使課堂案例思路更清晰、更吸引人，將專業(yè)技術(shù)身體力行的傳授給學(xué)生，通過實(shí)際案例教學(xué)培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問題、分析問題和解決問題的能力，培養(yǎng)對相關(guān)專業(yè)的興趣。

2 結(jié)合GLP實(shí)驗(yàn)室優(yōu)勢豐富課程內(nèi)容

傳統(tǒng)新藥研究與評價(jià)實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式大多數(shù)是教師在課堂上照本宣科，學(xué)生在操作時照貓畫虎，師生之間缺乏互動，學(xué)生之間缺乏交流。于是有著多年工作經(jīng)驗(yàn)，開展過多個新藥實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)教學(xué)團(tuán)隊(duì)，進(jìn)行了教學(xué)方式改革的嘗試。在講述新藥研究與評價(jià)實(shí)驗(yàn)課程時，擯棄傳統(tǒng)的教學(xué)模式，讓學(xué)生直接參與到正在開展的新藥安全性評價(jià)項(xiàng)目中，首先把正確的試驗(yàn)方法以及規(guī)范的藥物研究與開發(fā)過程介紹給學(xué)生，包括正確設(shè)計(jì)、有效實(shí)施和科學(xué)總結(jié)等。然后在專人帶領(lǐng)下，讓學(xué)生直接參與整個實(shí)驗(yàn)過程。如在急性毒性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，帶領(lǐng)學(xué)生直接參與到正在開展的“XXX新藥小鼠急性毒性試驗(yàn)研究”課題中，按照GLP法規(guī)要求學(xué)生制定出一份包含以下內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)方案：研究的名稱、目的；所有參與研究的人員；研究所依據(jù)的試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)指南或者文獻(xiàn)；受試物和對照品的基本信息；動物的選擇理由；動物的基本信息；動物的識別方法；試驗(yàn)的環(huán)境條件；受試物和對照品的給藥途徑、方法、劑量、頻率和用藥期限及選擇的理由；各種指標(biāo)的檢測方法和頻率；數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理方法等。并要求學(xué)生嚴(yán)格按照自己設(shè)計(jì)的內(nèi)容進(jìn)行實(shí)驗(yàn)實(shí)施，然后根據(jù)獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果撰寫總結(jié)報(bào)告。最后讓學(xué)生對提供的案例進(jìn)行分析、研究和討論，結(jié)合自身所學(xué)知識，給出自己的見解與決策。對第1次接受這種訓(xùn)練的本科生而言，確實(shí)難度較大，很多學(xué)生有畏難情緒，但經(jīng)老師多次耐心講解和示范后，學(xué)生逐漸掌握了方法，交出了令人滿意的實(shí)驗(yàn)作品。這種教學(xué)方法也叫案例教學(xué)法，有助于激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，啟發(fā)學(xué)生研究實(shí)際問題，提高學(xué)生實(shí)際運(yùn)作能力，達(dá)到優(yōu)化學(xué)生素質(zhì)，全面提高教學(xué)水平的目的。

3 結(jié)合GLP實(shí)驗(yàn)室研究特點(diǎn)提升學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能

在新藥研究與評價(jià)過程中，涉及大量的實(shí)驗(yàn)操作，包括溶液配制、動物抓捕、給藥操作、樣本采集、臨床檢測、病理切片制作、病理診斷等。但國內(nèi)大部分能夠開展新藥研究與評價(jià)課程的高校均因場地、儀器、動物種類等方面的限制只能開展有限的實(shí)驗(yàn)課程，如小鼠急性毒性試驗(yàn)、大鼠安全藥理試驗(yàn)和小鼠自發(fā)活動試驗(yàn)等，無法涵蓋新藥臨床前評價(jià)的全部試驗(yàn)項(xiàng)目，無法更好的幫助學(xué)生全面掌握和理解課堂所學(xué)理論知識。為了幫助學(xué)生更全面的掌握新藥臨床前評價(jià)與研究的實(shí)驗(yàn)技能，我們充分發(fā)揮教研室作為國家藥物GLP認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室的優(yōu)勢，在常規(guī)課程的基礎(chǔ)上增加了靜脈注射用供試品配制，動物尿液指標(biāo)檢測，病理切片制作等方面的訓(xùn)練，進(jìn)一步提升了學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能，為學(xué)生將來走上新藥研發(fā)崗位奠定了良好的基礎(chǔ)。

另外，還有一些對新藥研發(fā)非常關(guān)鍵但因各種因素確實(shí)無法讓學(xué)生動手操作的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，如犬、猴靜脈采血，動物心電圖指標(biāo)采集，動物血樣生化、血象指標(biāo)檢測，配制后供試品濃度分析，病理診斷等，只能通過錄像教學(xué)的方式開展。如在講授毒代動力學(xué)這一章節(jié)時，由于課程設(shè)置原因，無法開展相關(guān)實(shí)驗(yàn)課。為了讓學(xué)生對本章節(jié)內(nèi)容有更直觀的認(rèn)識，全程跟拍了當(dāng)時正在開展的猴毒代動力學(xué)試驗(yàn)，包括樣本采集管的制作，猴靜脈給藥，給藥后血樣采集，血樣的前處理，方法學(xué)驗(yàn)證，生物樣品的檢測等，以此為基礎(chǔ)制作了教學(xué)錄像，在講授理論課的同時在課堂上放映，以此增強(qiáng)學(xué)生的感性認(rèn)識，促進(jìn)學(xué)生對課堂知識的理解和消化，全面提升學(xué)生的學(xué)習(xí)成績，提高學(xué)生對新藥研究與評價(jià)課程的興趣。

4 結(jié)合GLP管理制度培養(yǎng)學(xué)生良好的科研習(xí)慣

良好科研習(xí)慣的養(yǎng)成是實(shí)驗(yàn)教學(xué)主要目的之一，新藥研究與評價(jià)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，融入SOP理念，對科研習(xí)慣和科學(xué)作風(fēng)的訓(xùn)練和養(yǎng)成有著重要意義。GLP法規(guī)明確規(guī)定研究機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)制定與其業(yè)務(wù)相適應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（standard operating procedure，SOP），以確保數(shù)據(jù)的可靠性。SOP是為了有效地實(shí)施和完成藥物非臨床安全性研究中的每一個工作環(huán)節(jié)或操作所制定的詳細(xì)、標(biāo)準(zhǔn)的書面規(guī)程[4]。因此把SOP的理念融入到新藥研究與評價(jià)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，對于學(xué)生從事科研工作乃至將來走上工作崗位都具有重要的意義，如提高學(xué)生的科研素養(yǎng)，保證科學(xué)研究結(jié)果的真實(shí)性、可靠性和完整性；使科研工作制度規(guī)范化，使操作的變異性降至最低，盡可能的避免和降低實(shí)驗(yàn)中的各種誤差；使各崗各位各盡其責(zé)，互相銜接，默契配合，確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，增加科學(xué)研究資料的可信度。

為了培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)淖黠L(fēng)和求真務(wù)實(shí)的態(tài)度，我們嘗試把動物隨機(jī)分組、結(jié)果統(tǒng)計(jì)處理及評定、指標(biāo)統(tǒng)計(jì)分析及數(shù)據(jù)處理等SOP引入到實(shí)驗(yàn)教學(xué)中。在小鼠自發(fā)活動試驗(yàn)中，學(xué)生學(xué)習(xí)了“動物分組方法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程”，知道在動物實(shí)驗(yàn)中分組應(yīng)按實(shí)驗(yàn)中的非處理因素如體質(zhì)量進(jìn)行隨機(jī)分組，而不是隨便分組，從而保證受試動物完全隨機(jī)地分配到各個處理組，以免因體質(zhì)量分配不均對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。另外還組織學(xué)生學(xué)習(xí)了“試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析及綜合評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程”和“異常數(shù)據(jù)分析及判定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程”，要求他們?nèi)鐚?shí)記錄觀察到的各種反應(yīng)出現(xiàn)的時間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時間等，分析各種反應(yīng)在不同劑量時的發(fā)生率、嚴(yán)重程度，最后根據(jù)觀察結(jié)果歸納分析，判斷每種反應(yīng)的劑量-反應(yīng)及時間-反應(yīng)關(guān)系，根據(jù)不同劑量組各種毒性反應(yīng)及發(fā)生率、動物死亡情況等，確定動物對受試物的無毒性反應(yīng)劑量和嚴(yán)重毒性反應(yīng)劑量。經(jīng)過訓(xùn)練，學(xué)生學(xué)會了如何對得到的結(jié)果進(jìn)行分析總結(jié)，及遇到異常數(shù)據(jù)時該如何分析處理，同時培養(yǎng)了嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)。

另外，GLP實(shí)驗(yàn)室管理制度對試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄有嚴(yán)格的規(guī)定，要求做到及時、直接、準(zhǔn)確、清楚和不易消除，同時需注明記錄日期、記錄者簽名。記錄的數(shù)據(jù)需要修改時，應(yīng)當(dāng)保持原記錄清楚可辨，并注明修改的理由及修改日期、修改者簽名。為了培養(yǎng)學(xué)生良好的科研習(xí)慣和正確的科研道德觀，要求學(xué)生實(shí)驗(yàn)課書寫原始記錄時嚴(yán)格遵守以上規(guī)定，書寫規(guī)范，字跡工整。記錄不能隨意刪除、修改或增減數(shù)據(jù)。修改必須嚴(yán)格遵循相關(guān)規(guī)范，如注明修改時間及原因，并簽名確認(rèn)。對于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)修改的規(guī)定，因在平時記課堂筆記時已經(jīng)養(yǎng)成隨意涂改的習(xí)慣，多數(shù)學(xué)生具有排斥情緒。經(jīng)授課教員耐心講解和多次訓(xùn)練，同學(xué)理解了保留原有記錄對于科學(xué)研究的重要意義，逐漸培養(yǎng)了良好的記錄習(xí)慣。

5 結(jié)合GLP法規(guī)要求提高學(xué)生人文素養(yǎng)

科學(xué)研究中實(shí)驗(yàn)動物的福利越來越受到社會的關(guān)注，遵循“減少、替代和優(yōu)化”的原則當(dāng)今已成為通識，保護(hù)動物，善待環(huán)境是社會走向文明的標(biāo)志，也是學(xué)生人文素養(yǎng)的體現(xiàn)[5]。GLP管理制度中對實(shí)驗(yàn)動物的相關(guān)規(guī)定對于此也有嚴(yán)格要求，如試驗(yàn)方案實(shí)施前應(yīng)當(dāng)獲得動物倫理委員會批準(zhǔn)，對動物尸體和廢棄物進(jìn)行妥善處理。結(jié)合GLP法規(guī)的相關(guān)要求在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中有意識的培養(yǎng)學(xué)生動物福利和環(huán)境保護(hù)思想，要求學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時在滿足需求的前提下盡量減少動物使用，實(shí)驗(yàn)過程中保護(hù)、善待動物，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后仍存活的動物實(shí)施安樂死后交到指定部門；按GLP要求處理廢棄物，用過的注射器收集在利器盒中，實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的廢液倒入指定廢液缸。目的就是為了讓這些即將走上工作崗位的學(xué)生們成為德才兼?zhèn)涞男聲r代科研工作者，提高人才競爭力和生命力，真正服務(wù)于社會。

GLP法規(guī)和理念在新藥研發(fā)中占據(jù)非常重要的地位，充分發(fā)揮GLP在新藥臨床前安全性評價(jià)中的作用，是規(guī)范實(shí)驗(yàn)操作的主要手段，從而確保研究結(jié)果的真實(shí)性和可靠性，確保藥物臨床前安全性評價(jià)的質(zhì)量，保障上市藥物的安全。通過把GLP管理體系和理念有效融入實(shí)驗(yàn)教學(xué)，加強(qiáng)了師資隊(duì)伍建設(shè)，拓寬了課程的深度和廣度，提高了學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作技能，培養(yǎng)了良好的科研作風(fēng)，為今后的科研工作奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。