潘 穎， 鄭穎穎， 瑪依熱·麥合木提， 阿布地熱合曼·吐尓孫尼牙孜， 買吾蘭·艾買提，孜海依拉·艾合買提， 謝 翔

(1新疆醫(yī)科大學(xué)臨床5+3一體化專業(yè)本碩2015-2班， 烏魯木齊 830011; 2新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟中心， 烏魯木齊 830054;3新疆醫(yī)科大學(xué)， 烏魯木齊 830011)

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(coronary heart disease, CHD)是多種因素共同作用的一種慢性心血管性疾病，其發(fā)病率和死亡率都非常高，是發(fā)達國家和大多數(shù)發(fā)展中國家成年人發(fā)病和死亡的主要原因。我國冠心病發(fā)病率的速度一直處于上升趨勢[1]，對于動脈硬化的病因?qū)W及發(fā)病機制尚未闡明。在眾多相關(guān)的危險因素中僅有50%～60% 的發(fā)病原因能解釋冠心病發(fā)病原因，其余的則可能歸因于遺傳因素[2-3]。近年來一些研究發(fā)現(xiàn)了一種新型硒蛋白S (selenoprotein S, SelS)作為血清淀粉樣蛋白A(Serum amyloid A, SAA)的受體參與機體調(diào)節(jié)。而SAA在炎癥反應(yīng)、膽固醇轉(zhuǎn)運和胰島素抵抗等諸多環(huán)節(jié)起著重要的作用。本研究在前期的工作中發(fā)現(xiàn)，SAA 基因多態(tài)性與心血管疾病的多種危險因素存在關(guān)聯(lián)[4-8]?，F(xiàn)有針對SelS與冠心病發(fā)病的關(guān)聯(lián)研究較少，關(guān)于二者之間的相互作用機制仍不清楚。因此，本研究對SelS水平與冠心病相關(guān)性的研究進行報道，旨在說明二者之間的關(guān)系，為冠心病的診斷和防治提供理論基礎(chǔ)和實驗依據(jù)。

1 資料與方法

1.1分組及診斷標準選取2014 年6月-2017 年6月于新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院的患者，嚴格執(zhí)行納入標準和排除標準將其分為冠心病組和對照組。冠心病組納入標準：采用Judkin′s法行選擇性冠狀動脈造影術(shù)，結(jié)合臨床癥狀、病史、實驗室檢查發(fā)現(xiàn)及心電圖改變至少一支或以上主要冠狀動脈直徑≥50%。冠心病組共納入188例，其中男性134例，女性54例。對照組納入標準：無冠心病的家族史，并且胸部X線片、標準12導(dǎo)聯(lián)心電圖、血生化檢查均未見異常，以胸部不適癥狀就診且行冠狀動脈造影正常者。對照組共納入101例，其中男性66例，女性41例。冠心病組和對照組人群年齡、性別比較的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，在納入研究前簽署入選知情同意書。

1.2排除標準合并嚴重感染性疾病、急性心力衰竭、心肌病、心肌炎和NYHA心功能分級Ⅲ～Ⅳ級；冠心病病史并置入支架或行冠狀動脈旁路移植術(shù)者； 血液系統(tǒng)疾病者；合并慢性肝腎功能不全、結(jié)締組織疾病和惡性腫瘤者；既往有長期服用或近3 個月內(nèi)服用硒蛋白制劑或服用影響體內(nèi)SelS水平的藥物者。

1.3基線資料基線資料包括身高、體質(zhì)量、年齡、性別、吸煙、飲酒和高血壓等。高血壓的診斷參照“中國高血壓防治指南”(2010年修訂版)的診斷標準[9]。高脂血癥診斷標準參考《內(nèi)科學(xué)》(第8版，人民衛(wèi)生出版社，2014年)診斷。

1.4血生化指標檢測冠心病組和對照組患者需空腹8 h以上，采集靜脈血，測定患者生化指標，包括血脂項目：總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血糖、肝功能、腎功能的檢測，檢測指標均由新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗中心測定。

1.5SelS的檢測冠心病組和對照組患者入院后，采用8號針管、19 號針頭采肘前靜脈血5 mL，置于EDTA-Na抗凝管中，輕柔混勻，置于室溫20 min，以3 000 r/min離心20 min，用離心管分裝，并置于-80℃冰箱內(nèi)待測，實驗前常溫解凍待用。抽取血樣標本時盡量一次成功，避免反復(fù)穿刺血管，由同一實驗人員在一天中的同一時間采血。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)測定SelS水平，所用試劑盒均由Cusabio公司同一批次生產(chǎn)提供。實驗前先于室溫環(huán)境下復(fù)溫各試劑和標本30 min，同批次試劑盒檢測所有待測樣本以減少誤差。操作嚴格按照說明書進行。

2 結(jié)果

2.1冠心病組與對照組一般臨床資料的比較冠心病組高血壓、吸煙 、TC高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；冠心病組HDL-C、TG低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；冠心病組飲酒、LDL-C高于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；冠心病組SelS水平高于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

表1 冠心病組和對照組之間臨床資料比較

注：HP: 高血壓; SelS: 硒蛋白S; TG: 甘油三酯； TC: 總膽固醇；HDL-C: 高密度脂蛋白；LDL-C:低密度脂蛋白。

2.2SelS與冠心病關(guān)系的多因素Logistic回歸分析多因素logistic回歸分析顯示，吸煙、HDL-C與冠心病均具有相關(guān)性，但SelS與冠心病之間無明顯相關(guān)性(P=0.201，OR=1.001，95%CI: 1.000～1.002)(表2)。

表2 多因素非條件Logistic回歸分析結(jié)果

注： SelS: 硒蛋白S; TG: 甘油三酯； TC: 總膽固醇；HDL-C: 高密度脂蛋白；LDL-C:低密度脂蛋白。

3 討論

SelS是近年來發(fā)現(xiàn)的一種新型的葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白，在生物體內(nèi)有著廣泛分布，在心臟、肝臟、腎臟、脂肪和骨骼肌等組織中均有表達。SelS具有抗氧化作用，可保護細胞免受內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激原誘導(dǎo)的應(yīng)激損傷；與炎性細胞因子之間存在反饋調(diào)節(jié)作用；作為血清淀粉樣蛋白A(SAA)的受體參與炎性反應(yīng)，而且還與血糖、胰島素抵抗核血脂水平具有相關(guān)性[10]。

冠心病的發(fā)病基礎(chǔ)是動脈粥樣硬化。病理學(xué)研究表明，氧化應(yīng)激、內(nèi)膜損傷、炎性反應(yīng)、脂質(zhì)浸潤、免疫反應(yīng)等參與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程。國內(nèi)外許多關(guān)于SelS生物學(xué)功能的研究，證實其可能參與冠心病發(fā)病過程。

SelS參與抗氧化損傷作用：硒蛋白家族都具有抗氧化性的功能，以保護細胞免受損傷。內(nèi)皮細胞損傷是動脈粥樣硬化最重要的始動環(huán)節(jié)。過表達的SelS可能通過對氧化作用的調(diào)控從而保護內(nèi)皮細胞免受氧化損傷，達到降低冠心病發(fā)生的目的。

SelS具有類胰島素作用： Walder等[11]研究發(fā)現(xiàn)2型糖尿病模型大鼠禁食24 h后，肝中SelS基因的表達水平明顯增高。胰島素抵抗可通過引起2型糖尿病、血脂代謝異常、內(nèi)皮細胞功能異常等間接引起冠心病的發(fā)生[12]。SelS的類胰島素作用可能間接促進冠心病的發(fā)生。

SelS參與炎癥和免疫反應(yīng)：通過酵母雙雜交分析顯示，SelS與SAA之間存在相互作用，并可能作為后者的受體而發(fā)揮作用[13]。有研究顯示，SAA可以影響HDL的抗炎作用[14]，激活NF-κB途徑使趨化因子和促炎細胞因子的表達水平提高[15]。SAA是一種急性反應(yīng)期蛋白，與胰島素和動脈粥樣硬化高度相關(guān)，可以作為心血管事件的獨立預(yù)測因子[16]。SelS作為SAA的受體可能參與冠心病的反生。 因此，認為SelS可能以上述3種作用方式參與冠心病發(fā)病過程，且不同的SelS水平對冠心病發(fā)生的影響不同。本研究測定冠心病組和對照組患者血清中SelS水平來驗證作者的假說。

本研究運用病例-對照的研究方法，發(fā)現(xiàn)冠心病組SelS濃度較對照組高，但兩者的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.581，P=0.210)。多因素非條件Logistic回歸分析剔除了混雜因素的干擾后發(fā)現(xiàn)，SelS水平未入選主效應(yīng)(P=0.201,OR=1.001, 95%CI: 1.000～1.002)。這些結(jié)果可能與本研究的樣本量少有關(guān)，SelS水平與冠心病的相關(guān)性尚需要更大的樣本量才能進一步解釋。

綜上所述，本實驗?zāi)壳暗难芯拷Y(jié)果僅表明SelS可能與冠心病無相關(guān)性，不是冠心病的獨立危險因素。SelS水平與冠心病的相關(guān)性問題仍有待深入探討，本實驗為后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ)。

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