周廣輝，馮 艷，陳如華，丁 輝

（江蘇省宜興市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江蘇宜興214200）

·論著·

COPD患者HMGB1、免疫細(xì)胞和纖維蛋白原聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義

周廣輝，馮 艷，陳如華，丁 輝

（江蘇省宜興市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江蘇宜興214200）

0 引言

慢性阻塞性肺?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種具有氣流受限特征的肺部疾病，與多種原因引起的肺部異常炎癥反應(yīng)相關(guān)，最終導(dǎo)致氣道阻塞，引起呼吸衰竭［1］．近年來對(duì)COPD臨床和機(jī)制有了深入研究，但COPD發(fā)病率及病死率呈逐年上升趨勢(shì)，依然是眾多學(xué)者研究的難點(diǎn)和重點(diǎn)之一［2］．以往研究［3－4］證實(shí)，COPD 體內(nèi)相關(guān)因子表達(dá)變化可加速肺部炎癥和臨床癥狀惡化，影響預(yù)后．曾強(qiáng)等［5］研究發(fā)現(xiàn)，高遷移率蛋白 1（high-mobility group box1，HMGB1）參與COPD氣道炎癥的發(fā)生和發(fā)展．為進(jìn)一步證實(shí)相關(guān)因子表達(dá)在COPD診斷、預(yù)后判斷的指導(dǎo)意義，本研究選取2012－10／2016－04江蘇省宜興市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科收治的80例COPD患者作為研究對(duì)象，聯(lián)合檢測(cè)其血清HMGB1、纖維蛋白原（fibrogen，F(xiàn)IB）及中性粒細(xì)胞／淋巴細(xì)胞水平（neutrophils lymphocyte ratio， NLR），結(jié)合肺功能變化及臨床轉(zhuǎn)歸，探討相關(guān)因子聯(lián)合檢測(cè)對(duì)COPD急性加重（acute esacerbations of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD）病情嚴(yán)重程度及預(yù)后的指導(dǎo)價(jià)值．

1 資料和方法

1．1 一般資料 選取 2012－10／2016－04 江蘇省宜興市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科收治的80例因呼吸道感染引起COPD急性加重的患者作為觀察組，符合COPD急性加重期的診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］，且均達(dá)到住院治療標(biāo)準(zhǔn)；排除：①糖尿病、腫瘤及自身免疫相關(guān)疾病等，器官移植術(shù)后患者；②妊娠及哺乳期婦女；③近1個(gè)月內(nèi)使用類固醇類藥物，近3 d使用茶堿、長(zhǎng)效β-受體激動(dòng)劑；④具有語言障礙、自理能力差或其他原因未能進(jìn)行治療者．其中男54例，女26例；年齡63～84（平均73．4±10．1）歲．其中部分 COPD 患者經(jīng)治療后癥狀改善作為COPD緩解組（n＝40），剩余列為COPD非緩解組（n＝40）．同期健康體檢者作為對(duì)照組（n＝40），其中男 23 例，女17 例，年齡 58～79（平均68．5±10．4）歲．所有入組患者均簽署知情同意書，兩組患者的性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05），具有可比性．

1．2 檢測(cè)方法 觀察組于入院次日清晨，對(duì)照組于體檢當(dāng)日清晨外周靜脈抽血12 mL，取其中9 mL加入離心管，同時(shí)加入抗凝劑枸櫞酸鈉1 mL，3000 rpn離心10 min，收集上清液．采用SYSMAX-CA1500全自動(dòng)凝血分析儀和原裝配套試劑進(jìn)行檢測(cè)血漿纖維蛋白原水平．通過雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清HMGB1濃度．HMGB1的ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)買于上海晶抗生物工程有限公司，按產(chǎn)品使用說明書進(jìn)行操作．取剩余3 mL全血通過Coulter-LH755全自動(dòng)血液分析儀和原裝配套試劑進(jìn)行檢測(cè)血清中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞水平，按說明書進(jìn)行，計(jì)算NLR，＜3為低NLR，＞3為高 NLR．

肺功能檢測(cè)采用肺功能檢測(cè)儀（HP Deskjet 3748），主要測(cè)定第一秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比（FEV1%pred）及用力呼氣量占用力肺活量比值（FEV1／FVC）．肺功能均在患者達(dá)到穩(wěn)定期后檢測(cè)，且均重復(fù)3遍，取平均值．按照 COPD指南［5］，肺功能分級(jí)為輕-中度、重-極重度．

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 利用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以±s表示，組間均數(shù)比較采用單因素方差分析，相關(guān)性分析采用pearson檢驗(yàn)，P＜0．05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義．

2 結(jié)果

2．1 COPD各組患者炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平比較 與對(duì)照組相比，COPD患者FIB和血清HMGB1表達(dá)水平明顯增強(qiáng)，且NLR明顯增多，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；與COPD非緩解組相比，COPD緩解組患者血漿FIB和血清HMGB1表達(dá)降低，且NLR水平減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05，表1），提示COPD患者NLR、HMGB1和FB表達(dá)水平與疾病轉(zhuǎn)歸相關(guān)．

表1 COPD各組患者炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平比較 （n＝40，±s）

表1 COPD各組患者炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平比較 （n＝40，±s）

aP＜0．05 vs對(duì)照組；cP＜0．05 vs COPD 非緩解組．

組別 HMGB1 （μg／L） FIB （COPD 非緩解組 8．01±0．71a 537．1 COPD 緩解組 6．24±0．65ac 338．6對(duì)照組 4．61±0．31 172．8 mg／dL） NLR 7±67．81a 4．52±0．28a 3±46．44ac 3．67±0．16ac 1±19．23 2．73±0．13

2．2 不同病情嚴(yán)重程度 COPD患者炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平比較 根據(jù)COPD診治指南，通過肺功能檢測(cè)評(píng)估COPD患者病情嚴(yán)重程度，分為輕-中度和重-極重度組（表2）．通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，重-極重度組 COPD患者 FIB、血清 HMGB1表達(dá)及NLR水平明顯高于輕-中度組患者；輕-中度組患者FIB、血清HMGB1表達(dá)及NLR水平高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05），提示 COPD 患者 NLR、HMGB1和FIB表達(dá)水平與病情嚴(yán)重程度相關(guān)．

表2 不同病情嚴(yán)重程度COPD患者炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平比較 （±s）

表2 不同病情嚴(yán)重程度COPD患者炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平比較 （±s）

aP＜0．05 vs對(duì)照組；cP＜0．05 vs輕-中度組．

肺功能 n HMGB1（μg／L） FIB （mg／dL） NLR重-極重度組 25 7．84±0．68c 528．91±72．16c 4．48±0．31c輕-中度組 30 6．37±0．51a 370．62±52．81a 3．71±0．21a對(duì)照組 40 4．61±0．31 172．81±19．23 2．73±0．13

2．3 COPD患者預(yù)后與炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平的關(guān)系 為進(jìn)一步研究相關(guān)指標(biāo)與COPD預(yù)后的關(guān)系，觀察3年選取的COPD患者經(jīng)積極治療后存活 63例，死亡 17例．存活患者 FIB、血清HMGB1表達(dá)及NLR水平均低于死亡患者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05，表 3）．

表3 COPD患者預(yù)后與炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平的關(guān)系 （±s）

表3 COPD患者預(yù)后與炎癥細(xì)胞、HMGB1和FIB表達(dá)水平的關(guān)系 （±s）

aP＜0．05 vs死亡患者．

組別 n HMGB1 （μg／L） FIB （mg／dL） NLR死亡 17 7．37±0．53a 489．83±68．74a 4．17±0．33a存活 63 4．78±0．44 161．17±17．37 2．53±0．11

3 討論

COPD作為一種慢性呼吸系統(tǒng)疾病，以小氣道的慢性阻塞性病變?yōu)榛静±肀憩F(xiàn)，其發(fā)生和發(fā)展機(jī)制復(fù)雜，受多種因素影響．氣道菌群失衡誘發(fā)炎癥反應(yīng)，可促使 COPD急性加重，加劇病情惡化和進(jìn)展［6－7］，導(dǎo)致肺功能受損．多種炎癥細(xì)胞激活可釋放大量炎性因子，進(jìn)一步破壞肺組織的解剖結(jié)構(gòu)，加重中性粒細(xì)胞所致炎癥反應(yīng)嚴(yán)重程度［8］．通過聯(lián)合觀察COPD外周血炎癥細(xì)胞和炎性因子的表達(dá)變化，結(jié)合肺功能分級(jí)，對(duì)COPD疾病分期和評(píng)估患者預(yù)后具有重要的臨床價(jià)值．

COPD炎癥反應(yīng)激活中性粒細(xì)胞，減慢中性粒細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)在肺部聚集，通過釋放彈性蛋白及氧自由基破壞肺泡組織及毛細(xì)血管內(nèi)皮，導(dǎo)致毛細(xì)血管通透性增加，加劇肺部損傷．以往研究認(rèn)為中性粒細(xì)胞／淋巴細(xì)胞比值是臨床上理想的機(jī)體炎癥標(biāo)記物和檢測(cè)指標(biāo)［9］．倪高順等［10］發(fā)現(xiàn) NLR 可反應(yīng)機(jī)體炎癥程度，作為CODP急性加重的診斷標(biāo)記物．本研究發(fā)現(xiàn)COPD肺功能重-極重度患者NLR升高，且NLR高的COPD急性加重患者對(duì)治療效果不敏感，證實(shí)了NLR在反應(yīng)COPD炎癥程度和疾病嚴(yán)重程度中的重要作用．進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，COPD死亡患者NLR過高，提示 NLR 與 COPD 預(yù)后相關(guān)．既往文獻(xiàn)［11－12］報(bào)道，術(shù)前NLR過高與胃癌患者預(yù)后較差相關(guān)，NLR是胃癌術(shù)后患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素．COPD患者多伴有慢性炎癥和免疫功能下降，作為反應(yīng)機(jī)體免疫狀況的重要指標(biāo)，NLR對(duì)提示COPD患者預(yù)后具有指示意義．既往研究［13］發(fā)現(xiàn)，COPD患者由于組織缺氧導(dǎo)致血液酸堿失衡，易引起血液高凝促進(jìn)肺部血栓形成，從而形成肺動(dòng)脈高壓，并加速COPD惡化．肝臟細(xì)胞分泌FIB，不僅作為微血栓發(fā)生的指示因子，也是機(jī)體炎癥反應(yīng)的應(yīng)激指標(biāo)．本研究亦證實(shí)肺功能嚴(yán)重的COPD患者，由于全身及氣道炎癥嚴(yán)重，COPD改善不明顯，F(xiàn)IB水平明顯增高，說明FIB參與COPD氣道炎癥，作為COPD病情嚴(yán)重程度的有效指標(biāo)．王辰等［14］對(duì)COPD急性加重期死亡患者尸檢后發(fā)現(xiàn)FIB增高和肺小動(dòng)脈血栓．本研究進(jìn)一步研究證實(shí)，COPD死亡患者表達(dá)FIB增多，提示FIB是反應(yīng)患者預(yù)后的有效指標(biāo)．

本研究結(jié)果顯示，COPD肺功能不全重度和COPD非緩解組患者血清HMGB1表達(dá)明顯增高，提示HMGB1對(duì)COPD疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后具有指導(dǎo)意義．既往研究［15］發(fā)現(xiàn)，HMGB1具有促炎作用，能激活多核白細(xì)胞及單核巨噬細(xì)胞等，促使炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生和釋放，參與炎癥反應(yīng)．由于多種因素活化單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞，促進(jìn)HMGB1釋放，維持高水平狀態(tài)，進(jìn)一步作用于體內(nèi)炎癥細(xì)胞促進(jìn)IL-6、IL-8及TNF-α等炎性因子的釋放［16－17］，加重 COPD 的炎癥反應(yīng)．曾強(qiáng)等［5］認(rèn)為COPD患者血清HMGB1高水平提示治療預(yù)后差，且HMGB1濃度水平與FEV1%pred負(fù)相關(guān)．COPD死亡患者血清HMGB1高水平進(jìn)一步證實(shí)HMGB1對(duì)COPD預(yù)后的影響．以上研究證實(shí)HMGB1參與了COPD氣道炎癥，且可能作為反映COPD炎癥的血清學(xué)指標(biāo)．

對(duì)于COPD患者診斷潛在標(biāo)志物和炎癥反應(yīng)指標(biāo)的研究依然需進(jìn)一步深入．本研究通過對(duì)NLR，HMGB1和FIB三個(gè)標(biāo)志物在COPD疾病中的價(jià)值進(jìn)行分析，提示NLR、HMGB1和FIB聯(lián)合檢測(cè)對(duì)判斷COPD疾病嚴(yán)重程度和病情預(yù)后具有重要臨床意義．下一步將細(xì)化NLR、HMGB1和FIB在COPD加重及惡化中的具體機(jī)理研究．

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Clinical significance of combined detection of serum levels of HMGB1，immune cells and fibrinogen in COPD patients

ZHOU Guang-Hui， FENG Yan， CHEN Ru-Hua， DING Hui
Department of Respiratory Medicine， Yixing People's Hospital，Yixing 214200，China

AIM：To investigate the effect of high mobility group box 1 （HMGB1）， immune cell combined with fibrinogen （FIB），neutrophil-to-lymphocyte ratio（NLR） on the severity degree and prognosis of COPD patients．METHODS：A total of 80 COPD patients admitted into Department of Respiratory Medicine，Yixing People's Hospital were selected as research objects．According to the treatment effect，the patients were divided into remission group and no-remission group， with 40 patients in each group．According to lung function，the patients were divided into mild to moderate group （n＝30）， severe to profound group （n＝25）．A total of 40 healthy patients were treated as control group．The relationship between serum indexes，treatment effect and lung function indices of COPD were analyzed．The patients were followed for three years and prognosis of COPD patients were observed．RESULTS：The levels of HMGB1， FIB and NLR in COPD patients were higher than those of normal people，with statistically significant differences （P＜ 0．05）．The levels of HMGB1，F(xiàn)IB and NLR in remission group were lower than those of no-remission group，with statistically significant differences（P＜0．05）．The levels of HMGB1， FIB and NLR in severe to profound group were higher than those of mild to moderate group，with statistically significant differences （P＜0．05）．The COPD patients with high levels of HMGB1，F(xiàn)IB and NLR suffered high mortality， with statistically significant differences （P＜ 0．05）．CONCLUSION：Combined detection ofserum levelsof HMGB1， FIB and NLR is significant to judge the severity degree，lung function and the prognosis of COPD patients．

COPD； HMGB1； FIB

目的：探討高遷移率蛋白1（HMGB1）、免疫細(xì)胞聯(lián)合纖維蛋白原（FIB）、中性粒細(xì)胞／淋巴細(xì)胞水平（NLR）在COPD病情嚴(yán)重程度及預(yù)后中的作用．方法：選取2012－10／2016－04江蘇省宜興市人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科收治的COPD患者80例作為研究對(duì)象，按照治療效果分為COPD緩解組（n＝40）及非緩解組（n＝40），依據(jù)肺功能分輕-中度組（n＝30），重-極重度組（n＝25），以健康體檢者共40例作為對(duì)照組．觀察相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)與COPD治療效果、肺功能指標(biāo)的關(guān)系，并對(duì)患者進(jìn)行3年隨訪，觀察其與預(yù)后的關(guān)系．結(jié)果：COPD患者HMGB1、FIB和NLR水平明顯高于健康體檢者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；COPD 緩解組 HMGB1、FIB 和 NLR 水平低于非緩解組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；COPD患者肺功能重-極重度組HMGB1、FIB和NLR表達(dá)較高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；HMGB1、FIB 和 NLR 高水平的 COPD患者死亡率較高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）．結(jié)論：HMGB1、FIB和NLR聯(lián)合檢測(cè)對(duì)判斷COPD疾病嚴(yán)重程度、肺功能分級(jí)和病情預(yù)后具有重要臨床意義．

慢性阻塞性肺疾??；高遷移率蛋白1；纖維蛋白原

R563．9

A

2095-6894（2017）12-17-03

2017－08－10；接受日期：2017－08－28

國(guó)家自然科學(xué)基金（81500049）；江蘇省衛(wèi)計(jì)委科教強(qiáng)衛(wèi)項(xiàng)目（QNRC2016210）；江蘇省衛(wèi)生廳醫(yī)改科研課題基金（YG201408）

周廣輝．碩士生．E-mail：staff1505＠ yxph．com

丁 輝．碩士生導(dǎo)師．研究方向：間質(zhì)性肺疾病分子機(jī)制．E-mail：dh1350519＠ 163．com