韓峰，鄭正茂

（上饒市第二人民醫(yī)院，江西 上饒 334000）

--臨床研究--

乙肝血清標志物聯(lián)合HBV DNA檢測在HBV感染診斷中的應用研究

韓峰，鄭正茂

（上饒市第二人民醫(yī)院，江西 上饒 334000）

目的探討乙肝血清標志物聯(lián)合乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)DNA檢測在HBV感染診斷中應用價值。方法 選擇乙肝患者142例，均采集空腹靜脈血進行檢測，根據(jù)HBV水平分為A、B、C組，觀察并記錄HBV DNA和HBV血清標志物（包括抗-HBe、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc、HBsAg）的含量。結(jié)果A組HBV DNA陽性率為96.77%（30/31），B組HBV DNA陽性率為60.42%（29/60），C組HBV DNA陽性率為5.88%（3/51），組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與C組比較，A組和B組HBV DNA定量結(jié)果明顯提高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；HBV DNA檢出符合率為73.94%（105/142），HBsAg檢出符合率為72.54%（103/142），兩者比較差異無統(tǒng)計學意義。結(jié)論 對HBV感染患者實施乙肝血清標志物聯(lián)合HBV DNA檢測，能起到互補作用，提高診斷準確率，為臨床治療HBV感染提供可靠的參考依據(jù)。

血清標志物；乙肝病毒；HBV DNA

乙肝是臨床常見的一種傳染性疾病，據(jù)統(tǒng)計，慢性乙型肝炎病毒感染者在全球范圍內(nèi)約有2.4億人，其中死于HBV感染相關并發(fā)癥的人數(shù)高達78萬，對人類健康造成嚴重的威脅[1]。HBV DNA定量檢測和HBV血清學標志物檢測是目前判斷和診斷HBV傳染性及傳染程度的常用手段。血清學標志物檢測方法簡單快速，在大批量的乙肝病毒篩查中應用較為廣泛，但卻無法反映HBV DNA復制情況[2]。HBV DNA定量檢測能直接反映HBV是否存在、監(jiān)測HBV DNA復制情況，在診斷乙肝的突變株方面具有明顯的優(yōu)勢，同時能幫助臨床預測不同時期乙肝的感染[3]。本研究選擇本院門診接診的部分乙肝患者為研究對象，分析乙肝血清標志物聯(lián)合HBV DNA檢測在HBV感染診斷中應用價值?，F(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年3月～2016年8月在本院門診就診的乙肝患者142例，其中男92例，女50例；年齡10～73歲，平均年齡（38.65±4.88）歲。根據(jù)HBV水平分為3組，其中HBsAg、抗HBc陽性、HBeAg為A組（31例）；HBsAg、抗HBc陽性、抗HBe陽性為B組（60例）；抗-HBe、抗-HBs、抗-HBc陽性，抗-HBc、抗-HBs陽性，抗-HBc、抗-HBe陽性，抗-HBs陽性，抗-HBc陽性，全陰性以及HBsAg等為C組（51例）。

1.2 方法 采集所有患者空腹靜脈血，將其進行3 h的靜置，離心，取血清，隨后保存在-20℃環(huán)境下待測。選用上海博耀生物科技有限公司提供的乙型肝炎血清標志物ELISA定性試劑盒進行檢測，嚴格按照其說明書進行操作和判斷結(jié)果。在100μL DNA濃縮液中加入100μL血清，混勻后，離心棄上清。將20μL HBV DNA提取液加入管底沉淀中，將其充分混勻后。進行10 min的恒溫煮沸，離心取上清備用；將標準品和處理后的樣品各2μL加入PCR反應管，離心30 s后，將其放置于儀器樣品槽，并對其反應參數(shù)進行相應設置，讀取熒光值。

1.3 觀察指標 觀察并記錄HBV DNA和HBV血清標志物（包括抗-HBe、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc、HBsAg）的含量。HBV DNA定量檢測的判斷標準：HBV DNA濃度＜5.0 lg copies/mL為陰性，≥5.0 lg copies/mL為陽性。血清學標志物定量檢測的判斷標準：抗-HBe濃度＜0.3 PEIU/mL為陰性，≥0.3 PEIU/mL為陽性；抗-HBs濃度＜10.0 mIU/mL為陰性，≥10.0 mIU/mL為陽性；HBeAg濃度＜0.2 ng/mL為陰性，≥0.2 ng/mL為陽性；抗-HBc濃度＜0.9 PEIU/mL為陰性，≥0.9 PEIU/mL為陽性；HBsAg濃度＜0.5 PEIU/mL為陰性，≥0.5 PEIU/mL為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件，計量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，組間率（%）的比較采用Χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV DNA結(jié)果 A組HBV DNA陽性率為96.77%（30/31），B組HBV DNA陽性率為60.42%（29/60），C組HBV DNA陽性率為5.88%（3/51），組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。與C組比較，A組和B組HBV DNA定量結(jié)果明顯提高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 HBV DNA定量結(jié)果對比（±s，lg copies/mL）

表1 HBV DNA定量結(jié)果對比（±s，lg copies/mL）

注：與C組比較，aP＜0.05

組別A組B組C組例數(shù)3160 51 HBV DNA定量結(jié)果7.28±1.41a 4.39±1.38a 3.56±1.64

2.2 血清標志物和HBV DNA陽性率相比 在62例HBV DNA陽性標本中，檢出HBsAg 59例，占95.16%；檢出HBeAg 29例，占46.77%。兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。HBV DNA檢出符合率為73.94%（105/142），HBsAg檢出符合率為72.54%（103/142），兩者比較差異無統(tǒng)計學意義，見表2。

表2 血清標志物和HBV DNA陽性率相比[n（%）]

2.3 HBV DNA在不同血清學模式下的測定結(jié)果 HBV DNA含量為2.7～5.0 lg copies/mL時，B組所占比例最高為59.26%；5.0～7.0 lg copies/mL時，以A組居多，占61.54%，其次為B組，占38.46%；＞7.0 lg copies/mL時，主要以A組多見，占85.71%，見表3。

表3 血清標志物和HBV DNA陽性率相比[n（%）]

3 討論

醫(yī)學研究顯示，在機體受到HBV感染時會產(chǎn)生免疫殺傷的作用，HBV感染程度及其轉(zhuǎn)歸情況與免疫功能水平高低有密切聯(lián)系，當機體免疫功能較差時，HBV DNA會出現(xiàn)復制，且呈持續(xù)性的分泌HBeAg；當患者病情好轉(zhuǎn)或免疫功能較好時，HBV則不會復制，抗-HBe呈陽性，HBeAg呈陰性[4-5]。HBV DNA能準確、直接反映HBV的復制情況，而乙肝血清學標志物（抗-HBe、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc、HBsAg）則能較好反映出機體受到HBV感染時的免疫功能狀態(tài)[6]。因而，臨床將HBV DNA分子生物學檢測和乙肝血清學標志物檢測作為診斷HBV感染的重要手段。目前，臨床常采用ELISA法對乙肝血清學標志物實施檢測，具有價廉、快速、簡便等優(yōu)勢，能有效判定患者是否受到HBV感染，但難以動態(tài)、及時的顯示HBV傳染性及復制情況[7]。HBV DNA目前常以熒光定量PCR予以檢測，能有效避免乙肝血清學標志物出現(xiàn)的弊端。

本研究結(jié)果顯示，A組HBV DNA陽性率為96.77%（30/31），B組HBV DNA陽性率為60.42%（29/60），C組HBV DNA陽性率為5.88%（3/51），可見HBV在HBeAg陽性患者體內(nèi)的復制較為頻繁，具有較好的傳染性。在62例HBV DNA陽性標本中，檢出HBsAg 59例（95.16%），檢出HBeAg 29例（46.77%），表明HBV DNA陽性者大多攜帶HBsAg。HBsAg和HBV DNA檢出符合率之間無明顯的差異，表明HBV DNA含量與HBsAg值之間有一定的聯(lián)系。HBV DNA在不同血清學模式下的測定結(jié)果顯示，當HBV DNA含量＞7.0 lg copies/mL時，A組所占比例遠高于其他兩組，表明HBeAg水平與HBV DNA含量呈正相關。臨床可通過對HBeAg檢測，間接判斷HBV傳染和復制情況。本研究中，HBV DNA含量為5.0～7.0 lg copies/mL時，以A組居多，占61.54%，分析原因可能與HBV變異株有關。臨床研究顯示，HBV復制在患者體內(nèi)HBV DNA含量＞5.0 lg copies/mL時最為活躍，當體內(nèi)HBV DNA含量＜5.0 lg copies/mL時的患者感染狀態(tài)較低[8]。因而，臨床可在實施乙肝血清學標志物檢測的同時定量檢測HBV DNA，利于判斷患者體內(nèi)病毒復制情況。此外，HBV DNA定量檢測在對乙肝患者抗病毒的診治中能對血清學轉(zhuǎn)換起到預測作用，有效判斷外顯型和隱匿性HBV的傳染性、復制活躍程度及其藥物療效。

綜上所述，對HBV感染患者實施乙肝血清標志物聯(lián)合HBV DNA檢測，能起到互補作用，提高診斷準確率，能為臨床治療HBV感染提供可靠的參考依據(jù)。

[1] 王海寧,李萬順,孫巨軍.乙肝病毒血清標志物、外周血T淋巴細胞HBV-DNA的相關性分析[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志,2016,31(4):113-116.

[2] 李惠軍,吳斌,李彩東.HBV感染者HBV血清標志物水平與HBV DNA及肝功能的相關性[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2016,37(6):784-786.

[3] 溫小云,方先松,邱芳.乙肝病毒標記物陽性表型血清標本乙型肝炎病毒(HBV)-DNA臨床檢驗分析的應用價值探討[J].當代醫(yī)學,2016,22(3):63-64.

[4] 黃粱鑌,張雄,龍欣,等.兩種方法定量檢測HBV異常血清標志物與血清HBV DNA水平的關系[J].浙江臨床醫(yī)學,2015,17(4):629-630.

[5] 張寶,李世龍,田珊紅,等.河北唐山地區(qū)乙肝患者血清標志物七項與乙型肝炎病毒DNA定量的對比研究[J].醫(yī)學綜述,2014,20(20):3793-3796.

[6] 朱珉之,杭雙熊,申紅玉.乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦血清標志物模式與血清及乳汁HBV-DNA相關性研究[J].海南醫(yī)學,2014,25(13):1958-1960.

[7] 蔣莉,陳春華,濮翔科.分析HBsAg與抗-HBs雙陽患者血清模式與HBV DNA載量的臨床意義[J].當代醫(yī)學,2016,22(17):4-45.

[8] 胡靜,盧本亮,梁冰,等.乙肝病毒血清標志物與HBV-DNA定量同步檢測的應用價值[J].江蘇醫(yī)藥,2013,39(2):225-226.

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.34.023