李玉芝 張磊 王鵬 卞合濤

多發(fā)性硬化(multiple selerosis, MS)是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system， CNS)炎性脫髓鞘病變?yōu)樘卣鞯淖陨砻庖咝约膊1]。近年來研究表明，自身免疫可能是其主要的致病機(jī)制，血腦屏障的破壞、異常激活的淋巴細(xì)胞通過血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)可能是發(fā)生自身免疫反應(yīng)的起始[2]。基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloprotein-9, MMP-9)是一種鋅鈣依賴性蛋白水解酶，在正常機(jī)體環(huán)境下僅少量表達(dá)，發(fā)揮正常的生理作用，但在一些病理生理?xiàng)l件下大量表達(dá)，活性增加，參與組織的損傷和修復(fù)，包括降解緊密連接蛋白導(dǎo)致血腦屏障的破壞[3]。小凹蛋白-1(caveolin-1，Cav-1) 是一個(gè)膜整合蛋白，是形成小凹的關(guān)鍵性蛋白，參與細(xì)胞的內(nèi)吞作用、小泡運(yùn)輸、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等功能[4]。已有研究發(fā)現(xiàn)Cav-1與MMP-9之間存在相互作用[5]，Cav-1在內(nèi)皮細(xì)胞遷移過程中對(duì)MMP-9的正確定位、活性具有重要的作用。目前關(guān)于Cav-1在多發(fā)性硬化中的作用尚無報(bào)道。本文研究通過對(duì)15例多發(fā)性硬化患者血清中Cav-1及MMP-9的表達(dá)情況進(jìn)行分析，探討其對(duì)多發(fā)性硬化的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

資料與方法

一、一般資料

濟(jì)寧市第一人民醫(yī)院從2015年1月至2016年11月共收治多發(fā)性硬化患者15例，診斷標(biāo)準(zhǔn)采用2001年國際神經(jīng)病學(xué)委員會(huì)提出的Mc Donald 診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]。急性期或復(fù)發(fā)期15例(男性5例，女性10例)。年齡26～56歲。另外選擇同期健康體檢者15例作為對(duì)照組，兩組在性別構(gòu)成、年齡、文化程度、職業(yè)等差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。排除標(biāo)準(zhǔn)為患者存在急性近期感染、肝腎功能障礙、惡性腫瘤及其他自身免疫性疾病。

二、檢測(cè)方法

所有患者分別于受檢當(dāng)日抽取清晨空腹肘靜脈血; 血標(biāo)本以3000 r/min，離心10 min， 吸取上清分裝至0.5 ml EP 管， -80℃冰箱保存待用。血清Cav-1、MMP-9濃度由酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測(cè)，試劑盒購自美國 R&D 公司。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間Cav-1及MMP-9的水平比較采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

與對(duì)照組比較，多發(fā)性硬化患者組血清Cav-1及MMP-9的表達(dá)均高于正常對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，表1)。

表1 兩組受檢者血清Cav-1及MMP-9的表達(dá)

注：與正常對(duì)照組比較，aP<0.01；Cav-1指小凹蛋白-1；MMP-9指基質(zhì)金屬蛋白酶-9

討 論

多發(fā)性硬化以中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)炎性脫髓鞘病變?yōu)橹饕攸c(diǎn)的自身免疫病，本病最常累及的部位為腦室周圍白質(zhì)、視神經(jīng)、脊髓、腦干和小腦[7]。多發(fā)性硬化在臨床上具有時(shí)間、空間多發(fā)性的特點(diǎn)，是遺傳易感性個(gè)體在病毒感染等環(huán)境因素作用下出現(xiàn)的免疫調(diào)節(jié)功能紊亂所致，以中樞神經(jīng)系統(tǒng)小血管周圍出現(xiàn)單核細(xì)胞浸潤、髓鞘脫失、軸索損傷和膠質(zhì)瘢痕形成為主要的病理特點(diǎn)[8]。多發(fā)性硬化發(fā)病前感染的病毒與中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓鞘蛋白或少突膠質(zhì)細(xì)胞間存在共同抗原。

血腦屏障是存在于腦組織和血液之間的一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng), 能夠控制血腦兩側(cè)的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn), 保證中樞神經(jīng)組織內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定[9]。已有研究發(fā)現(xiàn)，血腦屏障的損傷在多發(fā)性硬化中起到重要作用[10]。多種因素參與了血腦屏障結(jié)構(gòu)功能的改變, 血腦屏障結(jié)構(gòu)功能的變化則與各種炎性細(xì)胞的浸入中樞神經(jīng)系統(tǒng)密切相關(guān)。

越來越多的證據(jù)表明基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteins, MMPs)涉及多發(fā)性硬化發(fā)病機(jī)制的各個(gè)步驟，包括血腦屏障損害，周圍淋巴細(xì)胞浸潤，破壞髓鞘的形成脫髓鞘斑塊等。MMP-9是MMPs家族中重要的成員，已有研究發(fā)現(xiàn)MMP-9參與血腦屏障的破壞[11]。小凹是細(xì)胞質(zhì)膜上呈多種形態(tài)的凹陷結(jié)構(gòu), 具有胞吞、胞內(nèi)運(yùn)輸及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等作用，參與細(xì)胞多種生物功能[12]。小凹主要由小凹蛋白、多種糖基化磷脂酰肌醇錨定蛋白、糖脂和膽固醇等組成，其中Cav-1是小凹的標(biāo)志蛋白，也是其主要結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)成分。在小凹內(nèi),信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要調(diào)節(jié)者是小凹蛋白,它可通過其腳手架域與信號(hào)分子直接接觸作用,調(diào)節(jié)它們的功能。已有研究發(fā)現(xiàn)Cav-1和MMP-9之間存在相互作用[13]。但Cav-1是否通過MMP-9參與多發(fā)性硬化中的發(fā)生發(fā)展目前尚不明確。

本研究觀察多發(fā)性硬化患者血清Cav-1和MMP-9的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)Cav-1和MMP-9在急性期或復(fù)發(fā)期多發(fā)性硬化患者血清中均明顯升高，我們推測(cè)Cav-1和MMP-9可能通過血腦屏障的破壞參與多發(fā)性硬化的發(fā)生發(fā)展，但其具體作用機(jī)制還尚需進(jìn)一步研究。本研究為探討多發(fā)性硬化的發(fā)病機(jī)制提供一定的理論依據(jù)。