段彩紅，張巧云，柳芳梅，姬秀花

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寧夏血液中心2014-2016年虹吸法制備冷沉淀質(zhì)控抽檢分析

段彩紅，張巧云，柳芳梅，姬秀花

目的分析虹吸法制備冷沉淀不合格率及影響因素，為采供血機構制備出高質(zhì)量的血液制品提供依據(jù)。方法回顧性分析對采用虹吸法制備的冷沉淀質(zhì)量控制數(shù)據(jù)，計算不合格率，分析不合格原因，找出影響冷沉淀質(zhì)量制備時的關鍵環(huán)節(jié)。結果冷沉淀制品的不合格項主要集中在FⅧ因子的含量上。結論除個體差異及儀器設備缺陷不可控因素外，要從采集、融化、制備及檢測過程等各個環(huán)節(jié)進行質(zhì)量控制，以達到減少或預防不合格血液制品的出現(xiàn)。

虹吸法；冷沉淀；質(zhì)量控制；影響因素

冷沉淀不但用于甲型血友病、纖維蛋白原及凝血因子缺乏所致的出血性疾病的治療，也用于手術后出血、嚴重外傷及彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)、深度燒傷、黏膜和皮膚病的替代治療等[1-2]。而冷沉淀纖維蛋白原和Ⅷ因子(FⅦ)含量是直接影響治療效果的因素。為了向臨床提供高質(zhì)量的冷沉淀，我們回顧性分析了2014年1月-2016年12月用虹吸法制備冷沉淀質(zhì)控結果，現(xiàn)分析報告如下。

1 材料與方法

1.1 樣本來源：由400 mL新鮮全血在采集后6 h內(nèi)制備的原料漿，再采用虹吸法制備冷沉淀。

1.2 試劑與儀器:Ⅷ因子活性測定試劑盒(德國Siemens)，纖維蛋白原檢測試劑盒(德國Siemens)，全自動凝血分析儀(CA-1500)，大容量離心機(賀利氏6000i)，全血制備分離機 (德國)，數(shù)字控制水浴血液融化箱(美國)，血漿速凍機(德國盧森堡)，熱合機(韓國森通)。

1.3 方法

1.3.1 冷沉淀制備方法：采用虹吸法制備冷沉淀。具體步驟：往低溫融化箱內(nèi)加水至水箱約四分之三處，打開低溫融化箱電源，按泵啟動鍵和制冷啟動鍵開始制冷。當溫度恒定到6 ℃時，將準備好的新鮮冰凍血漿放到水槽中，每次不超過30袋，同時按搖擺鍵，儀器開始工作。待導管變軟后，從水槽中取出空袋放在臺面上，使兩袋之間形成高度落差，打開卡夾，調(diào)至虹吸狀態(tài)。當血漿融化剩余68～78 g白色不融血漿時關閉卡夾，取出融化箱內(nèi)冷沉淀袋，用毛巾擦干袋體和導管水漬，稱重后熱合斷離冷上清袋和冷沉淀袋，同時粘貼冷沉淀產(chǎn)品碼，及時出庫交予待檢庫。特別注意要迅速在-50 ℃以下的速凍機中凍成固體狀態(tài)，然后保存在-20℃以下的冰箱中[3]。

1.3.2 質(zhì)控抽檢:2014年1月-2016年12月，每月隨機抽檢4袋冷沉淀，連續(xù)36個月，共抽檢144袋，每袋產(chǎn)品檢測項目包括外觀、容量、Ⅷ因子含量、纖維蛋白原含量及無菌試驗。Ⅷ因子、纖維蛋白原含量檢測按試劑盒操作說明書進行檢測。

2 結果

2.1 抽檢結果：2014年1月-2016年12月共抽檢36批次產(chǎn)品,每次4袋，共計144袋。抽檢結果:不合格產(chǎn)品23袋，總不合格率16%，總合格率84%，冷沉淀合格率呈上升趨勢，見表1。

表1 2014-2016年冷沉淀指控結果合格情況

2.2 虹吸法制備冷沉淀不合格產(chǎn)品檢測結果：不合格產(chǎn)品共計23袋，每袋產(chǎn)品批次不同，均為Ⅷ因子含量低于國家標準，F(xiàn)Ⅷ(58.63±12.25)IU/袋，(168.23±17.23)Fbgmg/袋，容量(44.78±3.42)mL/袋。其中，《全血及成分血質(zhì)量要求》GB18469-2012中規(guī)定，冷沉淀質(zhì)量標準：由400 mL全血制備的冷沉淀FⅧ≥ 80 IU,纖維蛋白含量≥150 mg。

3 討論

從抽檢結果來看，不合格原因主要為因子Ⅷ含量不足。冷沉淀中的 FⅧ因子是一種不穩(wěn)定的凝血因子，易失活，主要因為因子Ⅷ在在體外的半衰期為12～24 h，它的含量會隨著制備時間的延長而下降，或在室溫停留時間較長，12 h可減少41.17%,24 h可減少42.82%[4-5]。溫度和時間貫穿于制備冷沉淀的整個環(huán)節(jié)。冷沉淀的制備經(jīng)歷了全血、新鮮冰凍血漿、冷沉淀制備三個階段。因此，血液離體后，影響不穩(wěn)定凝血因子質(zhì)量的因素很多，溫度、時間、工作人員的操作方式等[6]，任何一個環(huán)節(jié)的誤差均可影響到冷沉淀制品的質(zhì)量。首先，正常人群中FⅧ因子水平存在明顯差異，這是目前制備冷沉淀的不可控因素。其次，質(zhì)量控制應從采集血液的源頭抓起，要求一針見血，如采血不暢、出現(xiàn)凝塊、二針采血，這些都要進行標識，不得制備冷沉淀的原料血漿。每袋血采集結束后，要及時進行電腦信息錄入，然后將血袋豎直地放置于4～6 ℃儲血冰箱。盡快低溫分離成分血，控制制備時間、溫度這兩個關鍵環(huán)節(jié)，能夠最大限度地減少血漿中FⅧ因子等不穩(wěn)定成分的損失。制備時需注意 提前開啟恒溫濾白柜和離心機進行預溫，將全血懸掛于恒溫濾白柜中濾除白細胞，如濾除白細胞時間過長及濾除不順利時，及時給予標識，同時不用于制備原料血漿；血液離心后進行分離制備，保持血漿中無紅細胞成分，因其在血漿冷凍時可使紅細胞破裂，釋放促凝血活性物質(zhì)，可激活凝血系統(tǒng)，影響第Ⅷ因子(FⅧ)的穩(wěn)定性。第三，融化和制備過程因素。目前，本血液中心采用虹吸法制備冷沉淀，在制備時嚴格按照冷沉淀制備儀的要求進行操作，嚴禁超量放置，應安排專人巡查制備冷沉淀。在整個過程中要隨時觀察，保證虹吸順暢，但避免將原料血漿從水浴箱中反復拿出進行觀察，使之暴露在室溫時間過長，導致因子Ⅷ失活。冷沉淀制備好后，及時出庫交予待檢庫，置于-50 ℃速凍機快速冷凍，然后裝入相應的紙盒內(nèi)置于-20 ℃低溫冰箱保存待用。裝入紙盒為了避免冰凍血漿之間發(fā)生碰撞，質(zhì)控科的人員在檢測時，水浴箱的溫度應控制在30～37 ℃，融化時間不超過10 min[7]。在整個制備過程中，人員是貫穿于整個冷鏈環(huán)節(jié)的重要因素。因此，加強對工作人員的冷鏈培訓，增強冷鏈意識，每個環(huán)節(jié)的人員應嚴格落實執(zhí)行，冷鏈才能得到保障。

從連續(xù)3年的抽檢結果看，我中心通過不斷加強從全血到成分血各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制，用虹吸法制備冷沉淀制品的合格率逐年呈上升趨勢。這樣不但保證患者的療效，而且可以減少用量，從而在一定程度上緩解了冷沉淀供給的緊張局面。

總之，冷沉淀制品的用量在臨床應用日益呈上升趨勢，為了向臨床提供優(yōu)質(zhì)的冷沉淀制品，采供血機構應該重視影響冷沉淀質(zhì)量的各個環(huán)節(jié)。除了配備必要的設備外，還需要對工作人員進行強化培訓，加強其責任性，提高采血、制備方面的技術。加強各級人員過程控制意識,從各個環(huán)節(jié)嚴格控制冷沉淀質(zhì)量，為臨床提供優(yōu)質(zhì)、高效的冷沉淀制品。

[1] 衛(wèi)生部聯(lián)合國家標準化管理委員會.全血及成分血質(zhì)量要求(GB18469-2012)[S].2012.

[2] 劉景漢，汪德清，蘭烱采.臨床輸血學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：40-41.

[3] 單泓，王姣杰.虹吸法制備冷沉淀質(zhì)控不合格原因分析[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2015，2：94-96.

[4] 易中梅，王紅蘋，李晨晨，等.全血手工制備濃縮血小板后的血漿再制備冷沉淀的質(zhì)量評價[J].中國輸血雜志，2013，26(2)：117-120.

[5] 章澤，邱穎婕，近魏名，等.冷沉淀制備時間對凝血因子的影響[J].臨床輸血與檢驗，2013，15(2)：169-170.

[6] 劉軍.2010-2012年冷沉淀凝血因子質(zhì)控結果分析[J].醫(yī)學檢驗與臨床，2013，24(3)：43-44.

[7] 楊振宇，譚萍，張福，等.淺談血站冷鏈的關鍵控制點[J].臨床輸血與檢驗，2014，16(2)：221-223.

10.13621/j.1001-5949.2017.10.0938

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寧夏血液中心，寧夏 銀川 750001

2017-04-17責任編輯王凱榮