康小會(huì)

(安陽(yáng)市第二人民醫(yī)院，河南 安陽(yáng) 455000)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在梅毒螺旋體感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值

康小會(huì)

(安陽(yáng)市第二人民醫(yī)院，河南 安陽(yáng) 455000)

目的：分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)在梅毒螺旋體感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法：選擇2015年3月—2016年6月收治的80 例梅毒患者為研究對(duì)象，采集所有受檢者空腹靜脈血5 mL，離心取血清，分別采用ELISA與甲基胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)檢測(cè)，記錄兩種檢測(cè)方式診斷梅毒螺旋體感染的準(zhǔn)確率、特異性以及靈敏度。結(jié)果：ELISA檢查診斷準(zhǔn)確率為95.00%，與TRUST檢查的83.75%相比有明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)；ELISA檢查靈敏度與特異性分別為96.25%和93.75%，TRUST檢查靈敏度與特異性分別為82.50%和83.75%，兩種方法相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)。結(jié)論：采用ELISA診斷梅毒螺旋體感染患者效果顯著，具有較高的靈敏度與特異度，診斷準(zhǔn)確率較高，可為臨床治療梅毒提供有效的診斷依據(jù)。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；梅毒螺旋體；感染；甲基胺紅不加熱血清試驗(yàn)

梅毒是臨床常見(jiàn)的一種性疾病，具有危害性大、傳染性強(qiáng)等特點(diǎn)[1]。性交傳染是本病的主要傳染途徑。梅毒表現(xiàn)極為復(fù)雜，可侵犯全身各器官，使多器官遭到嚴(yán)重?fù)p害[2]。梅毒螺旋體是本病的主要病原體，臨床針對(duì)梅毒診斷常采用血清學(xué)檢測(cè)。以往常采用非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)檢查梅毒螺旋體的表達(dá)情況，其中包括不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)與甲基胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)等，但該類實(shí)驗(yàn)存在一定的假陰性率與假陽(yáng)性率，且特異性較低[3]。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)具有自動(dòng)化程度高、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)，能較好地檢測(cè)樣本，是一種梅毒螺旋體表達(dá)的新型診斷方式[4]。本研究選擇2015年3月—2016年6月我院收治的80 例疑似梅毒螺旋體感染患者，分析ELISA在梅毒螺旋體感染診斷中的應(yīng)用價(jià)值。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年3月—2016年6月我院收治的經(jīng)血清學(xué)檢測(cè)診斷和臨床診斷確診的80 例梅毒患者，其中男39 例，女41 例；年齡(44.63±2.52) 歲；梅毒分期：Ⅲ期20 例，Ⅱ期33 例，Ⅰ期27 例。

1.2 方法

于晨起時(shí)采集所有受檢者空腹靜脈血5mL，3 000 r/min離心，取血清，放置于-20 ℃冰箱中待檢測(cè)。分別采用ELISA與TRUST兩種方法進(jìn)行檢測(cè)。其中ELISA檢查選擇北京萬(wàn)泰生物公司提供的試紙盒；TRUST檢查選擇上海榮盛生物公司提供的試紙盒。

1.3 觀察指標(biāo)

診斷準(zhǔn)確率：ELISA檢查與TRUST檢查診斷出梅毒螺旋體感染陰陽(yáng)性占總例數(shù)的百分比。靈敏度：ELISA檢查與TRUST檢查準(zhǔn)確判斷出陽(yáng)性的比例。特異性：ELISA檢查與TRUST檢查準(zhǔn)確判斷出陰性的比例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 診斷準(zhǔn)確率

ELISA檢查診斷準(zhǔn)確率為95.00%，與TRUST檢查的83.75%相比有明顯提高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)(見(jiàn)表1)。

表1 ELISA檢查和TRUST檢查診斷準(zhǔn)確率對(duì)比 例(%)

2.2 靈敏度與特異性

兩種檢查方法的靈敏度與特異性相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)(見(jiàn)表2)。

表2 兩種檢查方法的靈敏度與特異性對(duì)比 %

3 討 論

梅毒是一種以危害性大、傳染性強(qiáng)為特點(diǎn)的流行性性疾病，在我國(guó)具有較高的發(fā)病率，本病主要是因梅毒螺旋體感染所致[5]。梅毒分為胎傳梅毒與獲得性梅毒兩種，前者是梅毒螺旋體由臍帶血循環(huán)經(jīng)胎盤傳染給胎兒，螺旋體在胎兒組織和內(nèi)臟中大量繁殖，導(dǎo)致胎兒出現(xiàn)全身感染，可引起產(chǎn)婦流產(chǎn)或死亡；而后者是經(jīng)性接觸傳染[6]。梅毒一般分為Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期，臨床表現(xiàn)各有不同，如：Ⅰ期主要表現(xiàn)為梅毒感染部位的硬下疳或潰瘍；Ⅱ期表現(xiàn)為淋巴結(jié)腫大與皮膚黏膜損害；Ⅲ期則表現(xiàn)為受累心臟、胃、神經(jīng)、耳、眼及損害樹(shù)膠腫等。其中Ⅰ期、Ⅱ期梅毒為早期，其對(duì)患者機(jī)體的破壞性不大，傳染性較小；Ⅲ期梅毒為晚期，對(duì)患者機(jī)體具有極大的破壞性，同時(shí)病程較長(zhǎng)，傳染性相對(duì)較大[7]。梅毒引發(fā)的并發(fā)癥，主要表現(xiàn)為以下幾點(diǎn)。第一，梅毒性心血管病，可導(dǎo)致患者發(fā)生單純性心肌梗死、主動(dòng)脈瓣關(guān)閉不全、主動(dòng)脈炎、主動(dòng)脈瘤等，甚至猝死；第二，神經(jīng)梅毒可導(dǎo)致患者發(fā)生脊髓膜炎，脊髓受到壓迫后可引發(fā)癱瘓、痙攣等；第三，可導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)梅毒性骨軟骨炎，主要因嬰兒干骺端(四肢長(zhǎng)骨)長(zhǎng)期受到病菌侵犯，局部發(fā)生梅毒性肉芽腫，導(dǎo)致骨骺線破壞，使骨發(fā)育受阻。目前本病的發(fā)生機(jī)制尚不明確，一旦患者出現(xiàn)梅毒螺旋體感染，就會(huì)對(duì)其心理及生活質(zhì)量造成極大的影響。因而，科學(xué)有效地檢測(cè)梅毒螺旋體感染，對(duì)預(yù)防與治療梅毒具有積極意義。

隨著醫(yī)療事業(yè)的迅速發(fā)展與臨床對(duì)梅毒認(rèn)知程度的不斷加深，臨床診斷梅毒的方式逐漸增多。非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)檢查是以往檢查梅毒的常見(jiàn)方式，其中TRUST檢查在觀察梅毒臨床療效及篩查中應(yīng)用較為廣泛[8]。人體受到梅毒螺旋體感染后有較長(zhǎng)的潛伏期，一般1～2個(gè)月才能在血清中檢測(cè)到部分抗體，與非特異性抗體相比，特異性抗體出現(xiàn)較早，非特異性抗體在實(shí)施治療后會(huì)逐漸轉(zhuǎn)為陰性。醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，在Ⅰ期梅毒中采用TRUST檢查特異性較低，存在一定假陰性和假陽(yáng)性。同時(shí)對(duì)潛伏期梅毒的檢查敏感性不高。ELISA法檢查是酶免疫測(cè)定技術(shù)，是一種新型的梅毒診斷技術(shù)。基因工程是ELISA應(yīng)用的主要技術(shù)。ELISA是將已知抗體或抗原在其固相載體的表面進(jìn)行吸附，對(duì)抗原與抗體的反應(yīng)用酶進(jìn)行標(biāo)記，然后將液相中游離成分采用洗滌法洗掉，通過(guò)對(duì)底物鹽水的觀察，判斷梅毒螺旋體的表達(dá)。大量研究結(jié)果顯示，ELISA法將酶化學(xué)靈敏度和抗原抗體反應(yīng)特異性進(jìn)行緊密結(jié)合，進(jìn)而提高梅毒的臨床診斷效果[9]。

本研究結(jié)果顯示，ELISA檢查診斷準(zhǔn)確率與TRUST檢查相比有明顯提高，表明與TRUST相比，對(duì)梅毒螺旋體感染患者采用ELISA檢查具有較高的準(zhǔn)確率，在診斷梅毒疾病中應(yīng)用價(jià)值較高。ELISA檢查靈敏度和特異性與TRUST檢查相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明采用ELISA診斷梅毒螺旋體感染患者特異性強(qiáng)、靈敏度高。分析原因在于ELISA法檢查使用的是有機(jī)催化劑酶，少量的酶便可發(fā)生大量的催化反應(yīng)，便于觀察顯色。ELISA法檢查可較好地顯示抗體與抗原的具體位置于亞細(xì)胞或者細(xì)胞水平上，利于臨床對(duì)抗體與抗原實(shí)施全面的定量分析，進(jìn)而有效提高梅毒螺旋體的靈敏度。此外，ELISA法檢查中的抗體與抗原相結(jié)合只在抗原抗體結(jié)合點(diǎn)和抗原決定簇發(fā)生，能更好地利用空間結(jié)構(gòu)與化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，進(jìn)而提升抗體與抗原反應(yīng)的特異性。臨床研究顯示，對(duì)梅毒螺旋體感染患者實(shí)施ELISA法檢查時(shí)無(wú)需采用特殊設(shè)備行輔助檢查，其操作較為簡(jiǎn)單，同時(shí)應(yīng)用范圍較廣[10]。

綜上所述，采用ELISA診斷梅毒螺旋體感染患者效果顯著，具有較高的靈敏度與特異度，診斷準(zhǔn)確率較高，可為臨床治療梅毒提供有效的診斷依據(jù)。

[1]林于櫻，常曉，朱威，等.梅毒螺旋體脂蛋白刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子及脂蛋白耐受的機(jī)制研究[J].實(shí)用皮膚病學(xué)雜志，2016，9(4)：236-239；242.

[2]延義芹，孫艷，丁國(guó)良，等.2004—2014年?yáng)|營(yíng)市無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒螺旋體感染情況的調(diào)查分析[J].國(guó)際輸血及血液學(xué)雜志，2016，39(4)：288-293.

[3]邵先兵，張燕，張娜.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)及甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢測(cè)中的檢驗(yàn)效能評(píng)價(jià)[J].中國(guó)性科學(xué)，2015，24(5)：49-52.

[4]房篤智，陽(yáng)建，楊榮志，等.梅毒螺旋體四種膜蛋白克隆重組表達(dá)和ELISA法建立的應(yīng)用研究[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(1)：75-77；81.

[5]夏浩海，錢小蓮.快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)及酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在梅毒診斷中的應(yīng)用[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，36(8)：1141-1142.

[6]鄒紅霞，郝軍，倪麗娜.四種梅毒螺旋體抗體血清學(xué)試驗(yàn)方法的臨床評(píng)價(jià)[J].國(guó)際免疫學(xué)雜志，2014，37(3)：260-262.

[7]東立.ELISA法在診斷梅毒螺旋體感染中的臨床價(jià)值及應(yīng)用[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，12(1)：61；63.

[8]虞國(guó)其，白頡，陳錚錚，等.ELISA檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的結(jié)果不確定度評(píng)定[J].放射免疫學(xué)雜志，2013，26(6)：824-826.

[9]狄靜，衛(wèi)芳，蘇婭玲，等.貴州省凱里市高危人群梅毒螺旋體抗體檢測(cè)結(jié)果分析[J].職業(yè)與健康，2014，30(10)：1368-1370.

[10]潘錫龍，吳瑞萍，何淑玲，等.中山市住院精神病患者HIV、HBV、HCV和梅毒螺旋體感染血清學(xué)調(diào)查[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2014，41(13)：2443-2445；2456.

2017-02-27

(本文編輯：王作利)

1671-8631(2017)11-0845-03

R446.6

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康小會(huì)(1983— )，女，河南省安陽(yáng)市人，主管檢驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)工作。