俞瑩　應筱雯　劉雯　龔玲　鮑彩麗　湯園園　吳迪　杜山青

【摘要】 目的 探討血清Ⅲ型前膠原（PCⅢ）與肝纖維化程度的相關性， 以評估血清肝纖維化指標對肝纖維化的診斷價值。方法 138例慢性肝病患者， 根據(jù)患者病情程度分為原發(fā)性肝癌組（39例）、慢性中度乙肝組（32例）、肝炎肝硬化組（40例）、慢性重度乙肝組（27例）。另選取70例體檢健康者作為正常對照組。檢測各組血清PCⅢ含量和肝功能相關酶[血清谷草轉氨酶（AST）和堿性磷酸酶（ALP）]活性以及其他常規(guī)肝功能指標[血清總膽紅素（TBIL）、直接膽紅素（DBIL）、總膽汁酸（TBA）]， 分析各組血清PCⅢ水平與肝纖維化程度的相關性。結果 原發(fā)性肝癌組、慢性中度乙肝組、肝炎肝硬化組、慢性重度乙肝組血清PCⅢ均高于正常對照組， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）， 慢性重度乙肝組血清PCⅢ均高于原發(fā)性肝癌組、慢性中度乙肝組、肝炎肝硬化組， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。肝炎肝硬化血清PCⅢ水平與TBIL、DBIL、TBA、ALP呈顯著正相關（r=0.482、0.494、0.424、0.451， P<0.01）；慢性重度乙肝血清PCⅢ水平與TBIL、DBIL、ALP呈顯著正相關（r=0.482、0.435、0.553， P<0.01）；慢性中度乙肝血清PCⅢ水平與AST、ALP呈顯著正相關（r=0.491、0.381， P<0.01）；原發(fā)性肝癌血清PCⅢ水平與TBIL、DBIL、TBA、AST、ALP呈顯著正相關（r=0.467、0.415、0.329、0.556、0.497， P<0.01）。結論 血

清PCⅢ水平可以反映肝纖維化的活躍程度， 有助于肝細胞損傷程度的血清學分級；慢性重度乙肝患者較陳舊性肝纖維化的肝硬化患者， 其PCⅢ水平代謝更為活躍、肝纖維化進程更為敏感。

【關鍵詞】 Ⅲ型前膠原；肝纖維化；肝硬化

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.30.031

PCⅢ是正常肝纖維組織中膠原蛋白的主要類型， 與肝纖維化演變期間呈現(xiàn)出的膠原合成代謝表現(xiàn)出顯著的相關性。當患者肝臟受損后， 會出現(xiàn)肝纖維化， 同正常肝內(nèi)膠原蛋白比較， 增加程度在5～10倍范圍內(nèi)。諸多慢性肝病進展為肝硬化時會出現(xiàn)肝纖維化情況。對于肝臟表現(xiàn)出高度纖維化情況后呈現(xiàn)肝硬化現(xiàn)象[1-3]， 血清PCⅢ水平可以有效反映肝纖維化狀態(tài)。于肝硬化時期為較高水平， 但臨床檢測后發(fā)現(xiàn)， 單一通過血清PCⅢ針對慢性乙肝患者的疾病發(fā)展無法進行充分反映， 針對疾病中度、重度直至肝硬化整個過程無法進行顯示， 并且對部分肝硬化患者施以血清PCⅢ水平檢測， 最終發(fā)現(xiàn)未呈現(xiàn)出顯著升高[4]。對此， 本文針對血清PCⅢ與肝纖維化程度的相關性加以分析， 報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2013年1～12月本院傳染科住院138例慢性肝病患者作為研究對象， 根據(jù)患者病情程度分為原發(fā)性肝癌組（39例）、慢性中度乙肝組（32例）、肝炎肝硬化組（40例）、慢性重度乙肝組（27例）。其中肝炎肝硬化組患者男30例， 女10例， 年齡35～67歲；慢性重度乙肝組患者男22例， 女5例， 年齡28～67歲；慢性中度乙肝組患者男26例， 女6例， 年齡23～64歲；原發(fā)性肝癌組患者男30例， 女9例， 年齡36～73歲。

患者均符合中華醫(yī)學會2010年修訂的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標準。另選取70例體檢健康者作為正常對照組， 排除心血管疾病、肝腎疾病患者。其中男41例， 女29例，

年齡21～25歲。各組一般資料比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 所以患者在晨起空腹狀態(tài)下抽取5 ml靜脈血， 待血塊收縮后， 進行離心， 以離心轉速為3000 r/min， 分離血清待檢。檢測研究對象的肝功能指標， 選擇部分血清置入冰箱（-80℃）中， 之后檢測PCⅢ， 主要利用化學發(fā)光法有效

完成。

1. 3 儀器及試劑 肝功能指標測定儀器類型：羅氏MODULAR

P800生化分析儀。TBIL、DBIL、TBA、AST、ALP試劑均為儀器配套試劑。PCⅢ水平檢測：試劑盒由深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學工程有限公司提供， 儀器為MAGLUMI 2000 全自動化學發(fā)光免疫分析儀。

1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗；對結果進行單因素方差分析及相關性分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2. 1 血清PCⅢ水平情況 原發(fā)性肝癌組、慢性中度乙肝組、肝炎肝硬化組、慢性重度乙肝組血清PCⅢ均高于正常對照組， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）， 慢性重度乙肝組血清PCⅢ均高于原發(fā)性肝癌組、慢性中度乙肝組、肝炎肝硬化組， 差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 血清PCⅢ水平同肝功能指標相關性 肝炎肝硬化血清PCⅢ水平與TBIL、DBIL、TBA、ALP呈顯著正相關（r=0.482、0.494、0.424、0.451， P<0.01）；慢性重度乙肝血清PCⅢ水平與TBIL、DBIL、ALP呈顯著正相關（r=0.482、0.435、0.553， P<0.01）；慢性中度乙肝血清PCⅢ水平與AST、ALP呈顯著正相關（r=0.491、0.381， P<0.01）；原發(fā)性肝癌血清PCⅢ水平與TBIL、DBIL、TBA、AST、ALP呈顯著正相關（r=0.467、0.415、0.329、0.556、0.497， P<0.01）。見表2。

3 討論

肝纖維化是肝損傷后的修復機制， 肝星狀細胞（HSC）激活并轉化為肌纖維母細胞并分泌細胞外基質（ECM）成分是肝纖維化發(fā)生、發(fā)展的核心環(huán)節(jié)， 肝損傷是引發(fā)肝纖維化的始動環(huán)節(jié)。此外HSCs表現(xiàn)出遷移聚集的情況， 于組織修復區(qū)內(nèi)部會呈現(xiàn)出諸多ECM。針對ECM的降解可以進行有效調控， 針對肝纖維化的形成可以進行有效促進。HSC呈現(xiàn)出過度激活的情況后， 對于肝纖維的出現(xiàn)會加以促進。針對慢性肝病加以分析發(fā)現(xiàn)， 膠原蛋白的出現(xiàn)， HSC為主要原因。在患者肝損傷后對于枯否氏細胞（KC）， 其表現(xiàn)出的細胞因子會對HSC造成刺激， 會出現(xiàn)表型轉變， 進而激活， 從而使HSC表現(xiàn)出肌纖維母細胞特征情況。KC以及HSC會出現(xiàn)轉化生長因子-β（TGF-β）， 從而同細胞膜上的TGF-βⅠ型和Ⅱ型受體產(chǎn)生對應性作用[5-7]。TGF-β會使得體外培養(yǎng)大鼠HSC膠原合成總量增加的程度≥3倍。人HSC在受到外源性TGF-β刺激后， 纖維連接蛋白以及mRNA依賴性表現(xiàn)一定程度的增加。除此之外， TGF-β會使得ECM一定程度的減少， 使HSC表達血小板源生長因子受體一定程度增加， 血小板衍生生長因子（PDGF）以及HSC結合位點呈現(xiàn)一定程度提高， PDGF獲得有效增強， 針對HSC表現(xiàn)出的增殖作用獲得有效促進。因此慢性炎癥病變可以持續(xù)激活HSC， 促使其增殖并合成大量ECM， 形成肝纖維化。肝纖維化的實質是ECM在肝內(nèi)的異常沉積[8-10]。endprint

于細胞外側， 因為膠原肽酶的影響， 可以將N端以及C端前肽有效去除， 表現(xiàn)出三股螺旋結構原膠原的情況， 之后有效形成PCⅢ， 使得對應的生理作用得以充分發(fā)揮。

本次研究表明， PCⅢ含量與肝臟纖維化程度顯著相關， 能可靠地反映肝纖維化活動性和程度， 對該指標進行動態(tài)觀察其變化可用于評估慢性肝病的治療效果。

參考文獻

[1] Schiff ER， Lee SS， Chao YC， et al. Long-term treatment with entecavir induces reversal of advanced fibrosis or cirrhosis in patients with chronic hepatitis B. Clinical Gastroenterology & Hepatology the Official Clinical Practice Journal of the American Gastroenterological Association， 2011， 9（3）：274-276.

[2] Maxwell PR， Flisiak R. Changes in serological biomarkers of liver function and connective tissue turnover in chronic hepatitis B during lamivudine therapy. Biomarkers ： biochemical indicators of exposure， response， and susceptibility to chemicals， 2005， 10（6）：475.

[3] Cho SW， Cho YJ， Cheong JY， et al. Add on lamivudine to adefovir monotherapy for the treatment of lamivudine-resistant chronic hepatitis B patients. The Korean journal of gastroenterology = Taehan Sohwagi Hakhoe chi， 2010， 56（2）：83-89.

[4] 馬進. 200例慢性肝病患者血清學指標水平對診斷肝纖維化的臨床意義. 江蘇大學學報（醫(yī)學版）， 2005， 15（2）：156-157.

[5] 黃艷， 黃成， 李俊. 肝纖維化病程中Kupffer細胞分泌的細胞因子對肝星狀細胞活化增殖、凋亡的調控. 中國藥理學通報， 2010， 26（1）：9-13.

[6] 王輝， 惠小陽， 李聞捷， 等. 血清PCⅢ水平與肝纖維化活躍程度的相關性. 現(xiàn)代檢驗醫(yī)學雜志， 2006， 21（5）：68-70.

[7] 王學， 許育， 李聞捷， 等. 慢性肝病患者血清PCⅢ水平與肝纖維化程度的關系. 放射免疫學雜志， 2007， 20（3）：195-198.

[8] 李玲秀， 張成文， 梁國政. 慢性肝病患者血清TNFα、HA和PCⅢ的水平及其與肝纖維化的關系. 臨床內(nèi)科雜志， 1997（2）：

90-91.

[9] 馮玉奎， 張立營， 徐慧斌. 肝病患者血清PCⅢ檢測及臨床應用評價. 中國療養(yǎng)醫(yī)學， 2010， 19（9）：844-845.

[10] 龔再菊. 肝病患者血清HA、PCⅢ水平在肝纖維化診斷中的意義. 菏澤醫(yī)學專科學校學報， 2001， 13（1）：5-6.

[收稿日期：2017-06-20]endprint