湯 巧，夏夢寧，李 霞，劉國瑞

(1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，南京 210036；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院超聲診斷科，南京210029；3.江蘇大學(xué)醫(yī)技學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，江蘇鎮(zhèn)江 212013；4.解放軍南京總醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究所，南京 210002)

南京地區(qū)9種呼吸道病原體感染的流行病學(xué)分析

湯 巧1，夏夢寧2△，李 霞3，劉國瑞4

(1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，南京 210036；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院超聲診斷科，南京210029；3.江蘇大學(xué)醫(yī)技學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，江蘇鎮(zhèn)江 212013；4.解放軍南京總醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)研究所，南京 210002)

目的了解南京地區(qū)呼吸道感染人群的病原學(xué)流行現(xiàn)狀，分析其趨勢與特點(diǎn)。方法使用9項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒對2013年5月至2015年4月就診于南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院、南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院、南京軍區(qū)南京總醫(yī)院的25 057例呼吸道感染患者的血清進(jìn)行IgM抗體檢測。結(jié)果共檢出病原體陽性8 575例(34.22%)，其中肺炎支原體(MP)抗體陽性率最高，為23.77%；其次為呼吸道合胞病毒(RSV)5.19%、腺病毒(ADV) 4.56%、副流感病毒1、2和3型(PIVS) 4.02%、乙型流感病毒(INFB)2.28%。RSV、ADV感染季節(jié)性分布明顯，在冬、春季節(jié)(12月至4月)高發(fā)，夏季較低。嬰幼兒到學(xué)齡前患者陽性例數(shù)最多(5 274例)；MP抗體陽性率隨著患者年齡增長逐漸下降。結(jié)論南京地區(qū)呼吸道感染病原體主要為MP，病原體感染與年齡組有相關(guān)性且有季節(jié)流行趨勢。

呼吸道感染；流行病學(xué)；病原體；感染率；肺炎，支原體；南京

呼吸道疾病有多種類型，可引起呼吸道感染的病原體也有多種，臨床癥狀無特異性，很難進(jìn)行針對性治療，容易造成抗生素濫用。因此，同時(shí)檢測多種病原體對于簡單、快速、特異、準(zhǔn)確診斷呼吸道感染性疾病，為臨床提供用藥指導(dǎo)有重要意義。呼吸道感染性疾病年幼、體弱者多發(fā)，常見于兒童和老年人。本研究中3家單位均采用相同廠家的9項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒對呼吸道感染患者進(jìn)行常見呼吸道病原體IgM抗體聯(lián)合檢測，并對檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以期對臨床診斷和治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 2013年5月至2015年4月就診于南京市第一醫(yī)院、南京醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院及南京軍區(qū)總醫(yī)院的呼吸道感染就診患者25 057例，年齡小于或等于98歲，平均(21.4±29.2)歲。所選病例排除自身免疫性疾病等基礎(chǔ)疾病。

1.2試劑與儀器 統(tǒng)一采用西班牙VIRCELL,S.L公司的9項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒(PNEUMOSLIDE IgM)，可同時(shí)檢測嗜肺軍團(tuán)菌血清1型(LP1)、肺炎支原體(MP)、Q熱立克次體(COX)、肺炎衣原體(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)和副流感病毒1、2和3型(PIVS)等9種病原體。儀器均為LEICA DM500熒光顯微鏡。

1.3方法 采用間接免疫熒光法檢測。抽取靜脈血4.0 mL，離心分離后吸取上清液立即檢測。操作人員統(tǒng)一培訓(xùn)合格后嚴(yán)格按照說明書及制訂的標(biāo)準(zhǔn)操作程序完成。

1.4結(jié)果判斷 可以觀察到ADV、INFA、INFB或PIVS對陽性血清的1%～15%細(xì)胞的細(xì)胞核、胞漿或胞膜出現(xiàn)蘋果綠色熒光(在PIVS和RSV中能同時(shí)觀察到著色的合胞)；LPI、CP或COX中所有的細(xì)菌呈現(xiàn)出蘋果綠色熒光；MP對陽性血清在細(xì)胞外圍呈現(xiàn)蘋果綠色熒光。陰性結(jié)果：可觀察到LPI、CP和COX無熒光，MP、ADV、INFA、INFB、RSV和PIVS的細(xì)胞呈現(xiàn)紅色，所有的陽性結(jié)果均經(jīng)過雙人復(fù)核，以防個(gè)體偏差，確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

表1 9種病原體抗體陽性檢測結(jié)果分布情況[n(%)]

表2 各年齡段患者呼吸道病原體IgM抗體的陽性分布[n(%)]

*：P<0.05

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分?jǐn)?shù)表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1呼吸道感染患者病原體IgM抗體陽性率分布情況 在25 057例標(biāo)本中共檢測出IgM抗體陽性8 575例(34.22%)，其中MP陽性最高，5 957例(23.77%)；ADV陽性1 143例(4.56%)；RSV陽性1 300例(5.19%)；INFB陽性572例(2.28%)；PIVS陽性1 007例(4.02%)；LP1、COX、CP、INFA陽性率分別為0.26%、0.004%、0.05%、0.13%。

2.2各病原體感染時(shí)間分布 患者呼吸道感染的主要病原體為MP、ADV、RSV、PIVS和INFB；INFA感染例數(shù)較少，主要集中在春季；MP和INFB感染率隨季節(jié)變化不大；RSV、ADV感染季節(jié)性分布明顯，主要集中在冬、春季節(jié)(12月至4月)，夏季較低；PIVS檢測陽性率不同季節(jié)變化不明顯。見表1、圖1。

2.3呼吸道病原體陽性率與年齡分布情況 對8 575例陽性病例按年齡分組，分為嬰兒組(<1歲)、幼兒組(1～3歲)、學(xué)齡前組(3～7歲)、學(xué)齡組(7～18歲)、成人組(18～60歲)、中老年組(>60歲)，見表2、圖2。8 575例陽性病例中，幼兒組、學(xué)齡前組和學(xué)齡組 MP抗體陽性率在組中所占比例分別為45.41%、44.22%、33.42%，高于其他組(P<0.05)；嬰兒組、幼兒組和學(xué)齡前組RSV抗體陽性率高于其他組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.4兩種及以上病原體混合感染分析 8 575例陽性病例中有1 498例(17.50%)為兩種及以上病原體混合感染。兩種病原體混合感染率為98.87%(1 481/1 498)，3種病原體混合感染率為1.13%(17/1 498)，其中混合感染率最高的是MP，混合感染病例中PIVS陽性者為436例，占到所有PIVS陽性病例中的43.30%，遠(yuǎn)高于其他病原體。對發(fā)生三重感染的17例標(biāo)本進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，16例為1歲以內(nèi)，1例為31歲男子；MP+ADV+RSV陽性12例，MP+RSV+PIVS陽性4例，MP+ADV+PIVA陽性1例。見表3。

圖1 5種主要病原體抗體陽性分布情況

圖2 各年齡段患者主要呼吸道病原體IgM抗體陽性率患者

表3 主要病原體混合感染分析

3 討 論

呼吸道疾病好發(fā)于兒童和年老體弱者，在急性感染性疾病中占首位。呼吸道疾病臨床癥狀不典型，大部分診斷依靠實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果，主要方法有組織細(xì)胞培養(yǎng)法、病原體分離培養(yǎng)、血清學(xué)檢測、間接免疫熒光法、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等[1-2]。以前常將病毒分離培養(yǎng)作為“金標(biāo)準(zhǔn)”，但其操作復(fù)雜、培養(yǎng)時(shí)間長、陽性率低。近年來，PCR技術(shù)因其高特異度和高靈敏度而在呼吸道感染中被廣泛使用，但此項(xiàng)技術(shù)對操作人員素質(zhì)及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備要求相當(dāng)高，難以在基層醫(yī)院普及。目前，9項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒(間接免疫熒光法)被各大醫(yī)院廣泛使用，文獻(xiàn)也表明，9項(xiàng)呼吸道感染其是一種可靠性很高的檢測多種呼吸道病原體和非典型病原體的方法，靈敏度高、特異度強(qiáng)、簡單高效、成本低廉，適合臨床篩查[3]。

本項(xiàng)研究顯示，9項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體的陽性檢出率為34.22%，與蔣松柏[4]報(bào)道的32.71%一致，但低于廖冰潔等[5]報(bào)道的39.23%，高于謝紅梅等[6]報(bào)道的24.9%。其中以MP的感染率23.77%最高，其余依次為RSV 5.19%、ADV 4.56%、PIVS 4.02%，與廖兵等[7]研究不一致，可能由于地域差異性的原因。在本研究中，INFB的檢出率超過INFA，與通常認(rèn)為INFA的感染率高于INFB的觀點(diǎn)不符[5]，究竟是地區(qū)特有的現(xiàn)象，還是其他原因?qū)е?，尚需要進(jìn)一步研究。

呼吸道感染具有一定的季節(jié)分布性。本研究顯示，MP感染率與季節(jié)變化相關(guān)性不明顯，與Chen等[8]報(bào)道的夏季流行不相符。而ADV、RSV檢出率在12月至4月(冬、春季)較高，與成守金等[9]報(bào)道的在冬季檢出率偏高有差別。筆者認(rèn)為春季高發(fā)可能是因?yàn)闅鉁剡m中，適合細(xì)菌、病毒生長繁殖，且春季氣溫上升、天氣干燥，出現(xiàn)皮膚干燥等，人的抵抗力下降，從而導(dǎo)致呼吸道免疫功能下降，感染率增高。有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)軍團(tuán)菌屬夏季檢出率高于冬季[10]。認(rèn)為軍團(tuán)菌屬發(fā)病率增高與供水系統(tǒng)中軍團(tuán)菌屬檢出率升高有一定關(guān)系。夏季供水系統(tǒng)中軍團(tuán)菌屬檢出率升高可能間接導(dǎo)致軍團(tuán)菌屬的增加[11-12]。筆者的數(shù)據(jù)因陽性結(jié)果較少，對上述結(jié)論無法做出判斷。

陽性患者在不同年齡組分布有一定差異，在8 575例陽性病例中，從嬰兒到學(xué)齡段比例最高，達(dá)到61.50%(5 274/8 575)，這可能因?yàn)榛颊咛幱趯W(xué)習(xí)階段，每天活動(dòng)在人群密集處，感染概率較高，也有年幼者免疫系統(tǒng)還未健全的因素。從理論上說中老年人隨著年齡增加，身體機(jī)能下降，免疫力降低，感染率可能升高，但筆者的統(tǒng)計(jì)結(jié)果否定了這種判斷。不同呼吸道病原體在不同年齡組分布也有一定差異性，幼兒組、學(xué)齡前組和學(xué)齡組患者M(jìn)P抗體陽性率分別為45.41%、44.22%、33.42%，高于其他組；嬰兒組、幼兒組和學(xué)齡前組患者RSV抗體陽性率高于其他組，具體原因尚待進(jìn)一步分析。

綜上所述，本研究為南京地區(qū)呼吸道感染提供了可靠的流行病學(xué)和病原學(xué)資料，同時(shí)9項(xiàng)病原體檢測對呼吸道疾病的診斷及臨床治療有指導(dǎo)意義。

[1]彭賢慧，劉琪琦，陳蘇紅．呼吸道病毒核酸檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]．醫(yī)學(xué)綜述，2012，18(10)：1545-1548．

[2]王凱.常見呼吸道病毒高靈敏度快速檢測方法的研究[D].西安：陜西師范大學(xué),2013.

[3]詹前美．呼吸道感染9項(xiàng)病原體IgM抗體檢測分析[J]．臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，12(9)：662-663．

[4]蔣松柏．兒童急性呼吸道感染患者病原體的臨床檢驗(yàn)分析[J]．中國醫(yī)學(xué)工程，2014，22(6)：159．

[5]廖冰潔，周迎春，李翠，等．呼吸道病原體IgM抗體聯(lián)合檢測在呼吸道感染診斷中的應(yīng)用[J]．國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35(10)：1339-1340．

[6]謝紅梅，胡必杰，馬艷，等．1 647例呼吸道感染病原體的IgM抗體檢測結(jié)果分析[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2012，22(12)：2696-2698．

[7]廖兵，張雙慶，徐育云．9種病原體所致兒童呼吸道感染的流行病學(xué)分析[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2014，22(14)：1918-1920．

[8]Chen ZR,Yan YD,Wang YQ,et al.Epidemiology of community-acquired Mycoplasma Pneumoniae respiratory tract infections among hospitalized Chinese children,including relationships with meteorological factors[J].Hippokratia,2013,17(1):20-26.

[9]成守金，馮光安，陳文潔．間接免疫熒光法測定呼吸道9種病原體IgM結(jié)果分析[J]．中國臨床研究，2014，27(7)：866-868．

[10]Ren L,Gonzalez R,Wang Z,et al.Prevalence of human respiratory viruses in adults with acute respiratory tract infections in Beijing,2005-2007[J].Clin Microbiol Infect,2009,15(12):1146-1153.

[11]陶黎黎，胡必杰，于玲玲，等．上海市多家醫(yī)院供水系統(tǒng)中分離的嗜肺軍團(tuán)菌血清1型基因多態(tài)性分析[J]．中華結(jié)核和呼吸雜志，2011，34(2)：100-103．

[12]周昭彥，胡必杰，于玲玲，等．3種方法對供水系統(tǒng)嗜肺軍團(tuán)菌,阿米巴原蟲及生物膜消毒效果的比較[J]．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2010，20(12)：1657-1660．

Epidemiologicalanalysison9kindsofrespiratorytractpathogeninfectioninNanjingarea

TangQiao1,XiaMengning2△，LiXia3，LiuGuorui4

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedNanjingHospital,NanjingMedicalUniversity,Nanjing,Jiangsu210036,China;2.DepartmentofUltrasoundDiagnosis,AffiliatedChildren′sHospital,Nanjing,Jiangsu210036,China;3.FacultyofLaboratoryMedicine,MedicalTechnicalCollege,JiangsuUniversity,Zenjiang,Jiangsu212013,China;4.InstituteofClinicalLaboratoryMedicineofPLA,NanjingGeneralHospitalofNanjingMilitaryCommand,Nanjing,Jiangsu210002,China)

ObjectiveTo understand the pathogenic epidemiological status quo among populations with respiratory tract infectious in Nanjing area.MethodsThe IgM antibody detection reagent kit against 9 kinds of respiratory tract pathogen was used to conduct the IgM antibody detection in 25 057 patients with respiratory tract infection in the Affiliated Nanjing Hospital of Nanjing Medical University,Affiliated Children′s Hospital of Nanjing Medical University and Nanjing General Hospital of Nanjing Military Region from May 2013 to April 2015.ResultsA total of 8 575 cases(34.22%) of pathogen positive were detected out,in which Pneumonia mycoplasma (MP) antibody had the highest positive rate(23.77%);followed by respiratory syncytial virus (RSV,5.19%),adenovirus (ADV,4.56%),Parainfluenza virus type 1,2 and 3 (PIVS,4.02%) and influenza B virus(INFB,2.28%).The seasonal distribution of RSV,ADV and PIVS was significant and had high onset in winter and spring,but low onset in summer and autumn.Infants and young children had maximal positive cases in preschool period,which were 5 274 cases;as a whole,MP IgM antibody positive rate was gradually decreased with the age increase.ConclusionMP is the main pathogen causing respiratory tract infections in Nanjing area,followed by RSV.The pathogenic infection has a correlation with the age group,moreover which demonstrates the seasonal epidemic trend.

respiratorytract infections;epidemiology;pathogens;infection rates;pneumonia,mycoplasma;Nanjing

湯巧(1971-)，主任技師，碩士，主要從事免疫學(xué)疾病的臨床診斷與研究?！?/p>

，E-mail:13952042488@163.com。

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.28.023

R446.62

A

1671-8348(2017)28-3959-03

2017-04-10

2017-06-06)