梁家林，劉良明，李 濤

(1.空軍杭州航空醫(yī)學(xué)鑒定訓(xùn)練中心醫(yī)學(xué)療養(yǎng)部，杭州 310013；2.第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所二室/創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400042)

IL-1β下調(diào)Rho激酶活性介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣失敏的機(jī)制研究*

梁家林1，劉良明2△，李 濤2

(1.空軍杭州航空醫(yī)學(xué)鑒定訓(xùn)練中心醫(yī)學(xué)療養(yǎng)部，杭州 310013；2.第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所二室/創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400042)

目的探討白細(xì)胞介素(IL)-1β下調(diào)Rho激酶活性介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣失敏的機(jī)制。方法SD大鼠32只，按隨機(jī)數(shù)字表完全隨機(jī)分為假手術(shù)組、盲腸結(jié)扎穿孔(CLP) 3 h組、CLP 6 h組、CLP 12 h組，每組8只。經(jīng)CLP復(fù)制膿毒癥大鼠模型，檢測(cè)不同時(shí)點(diǎn)血漿IL-1β濃度及腸系膜上動(dòng)脈(SMAs)鈣敏感性，分析二者之間的相關(guān)性。培養(yǎng)SMAs來源的血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)并與不同濃度重組人IL-1β孵育24 h，觀察IL-1β對(duì)其肌球蛋白輕鏈(MLC20)磷酸化水平、Rho激酶活性、G蛋白表達(dá)水平及RhoGEFs活性的影響。結(jié)果經(jīng)CLP 3 h后SMAs鈣敏感性開始下降(P<0.05)，而血漿IL-1β在CLP 6 h后開始上升(P<0.05)，SMAs鈣敏感性變化趨勢(shì)與血漿IL-1β濃度變化呈明顯負(fù)相關(guān)(P<0.05)。IL-1β可降低VSMCs MLC20磷酸化水平及Rho激酶活性(P<0.05)，上調(diào)Gα11表達(dá)而下調(diào)Gα12表達(dá)(P<0.05)，但對(duì)Gαq和Gα13表達(dá)無明顯作用(P>0.05)。IL-1β可明顯降低RhoGEF和PDZ-RhoGEF活性(P<0.05)，升高p63 RhoGEF活性(P<0.05)。結(jié)論IL-1β通過下調(diào)Gα12表達(dá)，引起PDZ-RhoGEF和Rho激酶的活性下降，導(dǎo)致MLC20磷酸化水平下降從而介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣失敏的發(fā)生；另外也能通過上調(diào)Gα11表達(dá)，引起p63 RhoGEF活性增加而介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣敏感性增加，但總效應(yīng)是使鈣敏感性降低。

膿毒癥；白細(xì)胞介素1β；鈣失敏；G蛋白；RhoGEF

膿毒癥、膿毒性休克是重癥監(jiān)護(hù)室最常見的并發(fā)癥之一，盡管對(duì)其研究投入了大量的人力、物力，但其病死率始終居高不下[1]。血管低反應(yīng)性(即血管對(duì)血管活性藥物的反應(yīng)性下降甚至不反應(yīng))是導(dǎo)致其高病死率的重要原因[2]。目前認(rèn)為血管低反應(yīng)性的發(fā)生機(jī)制主要有：(1)受體失敏，血管舒、縮相關(guān)受體如血管腎上腺素能受體[3]等表達(dá)下降和(或)親和力下降；(2)膜超極化，鉀通道的過度激活使得血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)膜的超極化[4]；(3)鈣失敏假說，即VSMCs肌肉收縮相關(guān)蛋白對(duì)鈣的敏感性降低，引起力/鈣比下降[5]。

膿毒癥伴隨著細(xì)胞因子如腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL)-1β、IL-6等的瀑布式釋放，體內(nèi)、外研究均證實(shí)IL-1β能夠介導(dǎo)膿毒癥血管收縮反應(yīng)性降低，作用機(jī)制有NO依賴性和NO非依賴性機(jī)制[6]，但是針對(duì)以上機(jī)制進(jìn)行矯治卻只能部分逆轉(zhuǎn)IL-1β介導(dǎo)的血管低反應(yīng)性，提示還存在著其他重要機(jī)制[7]。

基礎(chǔ)研究顯示，Rho激酶能磷酸化CPI-17和肌球蛋白輕鏈磷酸酯酶(myosin light chain phosphatase，MLCP)，磷酸化的CPI-17和MLCP均能抑制MLCP的活性，使得肌球蛋白輕鏈激酶(myosin light chain kinase，MLCK)和MLCP的活性比值上升，使肌球蛋白輕鏈(MLC20)磷酸化水平增加，使VSMCs收縮增加[8]。Rho激酶的活性受RhoA調(diào)控，RhoA又主要受RhoGEFs調(diào)控，而RhoGEFs的活性受Gαq/11和Gα12/13兩大家族調(diào)節(jié)[9]。VSMCs主要存在的RhoGEFs有PDZ-RhoGEF、p115 RhoGEF、p63 RhoGEF和LARG，Gαq/11調(diào)節(jié)LARG和p63 RhoGEF的活性，而Gα12/13調(diào)節(jié)PDZ-RhoGEF、LARG和p115 RhoGEF的活性[10]。IL-1β是否通過Rho激酶介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管的鈣失敏發(fā)生？如果是，它又是通過調(diào)節(jié)哪種或哪幾種G蛋白的活性進(jìn)而引起下游相應(yīng)的RhoGEF活性改變，進(jìn)而引起Rho激酶活性下降而導(dǎo)致血管鈣失敏。筆者前期研究顯示，IL-1β通過下調(diào)PKC、Rho激酶活性引起血管鈣失敏，從而介導(dǎo)內(nèi)毒素休克家兔血管低反應(yīng)性的發(fā)生，而且發(fā)現(xiàn)Rho激酶較PKC發(fā)揮更重要的作用[11]。本研究重點(diǎn)探索IL-1β是如何調(diào)節(jié)Rho激酶活性，但因?yàn)樯唐坊目雇每乖豢购茈y獲得，難以開展分子機(jī)制研究，而抗大鼠抗原的一抗卻很豐富，因此,本研究以膿毒癥大鼠為動(dòng)物模型研究IL-1β調(diào)節(jié)Rho激酶活性的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用通過第三軍醫(yī)大學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)并嚴(yán)格按規(guī)定執(zhí)行。SPF級(jí)成年健康雌性SD大鼠，體質(zhì)量(210±10)g，由第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2主要試劑與儀器 大鼠IL-1β ELISA試劑盒(NeoBioscience公司)，重組大鼠IL-1β(PeproTech公司)，兔抗大鼠p63 RhoGEF抗體(Proteintech公司)，山羊抗大鼠PDZ-RhoGEF抗體(Santa Cruz公司)，兔抗大鼠Gα12、Gα13、Gαq抗體及小鼠抗大鼠Gα11抗體(Santa Cruz公司)，兔抗大鼠MYPT1抗體及磷酸化MYPT1抗體 (Thr850，Millipore公司)，小鼠抗人β-actin抗體(Pierce公司)，RhoGEF exchange assay biochem 試劑盒(Cytoskeleton公司)，逆轉(zhuǎn)錄試劑盒及PCR反應(yīng)混合試劑(Promega公司)，DMEM/F12 1∶1及新西蘭胎牛血清(Hyclone公司)，配制Krebs-Henseleit重碳酸鹽緩沖液(K-H液)的試劑均為國產(chǎn)分析純。Power lab八道生理記錄儀及壓力傳感器(AD Instrument公司)，恒溫離體器官灌流槽(Letica公司)，垂直板狀電泳儀(Bio-Rad公司)，多功能讀板機(jī)(Bio-TEDSynergy HT)，CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱(SHEL/JB)。

1.3方法

1.3.1膿毒癥模型的復(fù)制及標(biāo)本獲取 SD大鼠32只，按隨機(jī)數(shù)字表完全隨機(jī)分為假手術(shù)組、盲腸結(jié)扎穿孔(CLP) 3 h組、CLP 6 h組、CLP 12 h組，每組8只。采用CLP復(fù)制膿毒癥模型，參考文獻(xiàn)[12]，并適當(dāng)調(diào)整：(1)1 mL/kg 3%戊巴比妥鈉腹腔麻醉；(2)開腹(從腹白線處)，切口長約3.0 cm，找到盲腸，清除腸系膜(注意避免損傷血管)，用4號(hào)線在離盲端1.5 cm處結(jié)扎盲腸，再用三棱錐在結(jié)扎盲端中央處穿孔，使成前端大小約0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm而后端大小約0.4 cm×0.4 cm×0.4 cm的三角形孔；(3)依次用4號(hào)線和1號(hào)線關(guān)腹。假手術(shù)組大鼠只進(jìn)行麻醉和開、關(guān)腹操作。在CLP手術(shù)后3、6、12 h(補(bǔ)適量3%戊巴比妥鈉麻醉大鼠)，開腹經(jīng)腹主動(dòng)脈取1.5 mL動(dòng)脈血，加1 U肝素抗凝，離心(3 000 g×10 min，4 ℃)，取上清液，即為血漿，分裝保存于-80 ℃冰箱用于IL-1β測(cè)定；小心游離出腸系膜上動(dòng)脈(SMAs)主干，用角膜剪剪除周圍結(jié)締組織(一定要注意保護(hù)血管內(nèi)皮完整)，制成長2～3 mm的血管環(huán)，用于Ca2+反應(yīng)性測(cè)定。另取各組SMAs分支，用RIPA裂解液提取各組總蛋白。

1.3.2IL-1β體外單因素處理及標(biāo)本獲取 按文獻(xiàn)[13]所述培養(yǎng)SMAs來源的VSMCs。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、1 ng/mL IL-1β組、10 ng/mL IL-1β組和100 ng/mL IL-1β組，每組各6瓶細(xì)胞。待VSMCs傳代細(xì)胞(第三代)生長100%融合后，磷酸鹽緩沖液(PBS)洗2次，加入DMEM/F12每瓶2 mL饑餓細(xì)胞12 h后，加入等體積生理鹽水(對(duì)照組)或使終濃度為上述濃度的IL-1β溶液孵育24 h。用RIPA裂解液提取各組細(xì)胞的總蛋白。

1.3.3膿毒癥大鼠血管鈣敏感性、血漿IL-1β水平變化及相關(guān)性分析 取1.3.1制備的血管環(huán)，分別測(cè)定各組血管環(huán)對(duì)Ca2+的敏感性，方法同文獻(xiàn)[5]。以張力(收縮力/血管環(huán)重量)為量化標(biāo)準(zhǔn)，用最大張力(Emax)來評(píng)價(jià)血管鈣敏感性。將1.3.1所得的血漿從-80 ℃冰箱中取出，按大鼠IL-1β ELISA試劑盒操作說明，測(cè)量各組在450 nm處吸光度(A)值。用CurveExpert 1.3軟件進(jìn)行曲線擬合，得出標(biāo)準(zhǔn)曲線和公式，求出各組血漿的IL-1β濃度。用各組的Emax值和IL-1β濃度進(jìn)行相關(guān)性分析，得出二者之間是否存在相關(guān)性。

1.3.4IL-1β對(duì)大鼠VSMCs MLC20磷酸化水平及Rho激酶活性的影響 取 1.3.2處理好的總蛋白(每組n=3)，用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測(cè)，以磷酸化MLC20(MLC20-p)/非磷酸化MLC20(MLC20)表示MLC20磷酸化水平，以磷酸化MYPT1(Rho激酶底物，MYPT1-p)/非磷酸化MYPT1(MYPT1)表示Rho激酶活性。

1.3.5IL-1β對(duì)大鼠VSMCs的Gα11、Gαq、Gα12、Gα13的表達(dá)影響 取1.3.2處理好的總蛋白(每組n=3)，用Western blot檢測(cè)各組的Gα11、Gαq、Gα12、Gα13表達(dá)。

1.3.6IL-1β對(duì)大鼠VSMCs的RhoGEF、PDZ-RhoGEF和p63 RhoGEF活性的影響 取1.3.2處理好的總蛋白(每組n=3)，應(yīng)用RhoGEF exchange assaybiochem kit檢測(cè)各組的RhoGEF、PDZ-RhoGEF和p63-RhoGEF活性。RhoGEF活性用總蛋白直接檢測(cè)。p63 RhoGEF和PDZ-RhoGEF活性檢測(cè)如下：(1)免疫沉淀，聯(lián)合總蛋白、Protein A/G 20 μL、PDZ-RhoGEF或p63 RhoGEF一抗1 μg，在 4 ℃孵育24 h,離心(3 000 g×5 min，4 ℃)，去上清液得沉淀，用1 mL RIPA裂解液洗沉淀，離心(3 000 g×5 min，4 ℃)，去上清液，重復(fù)2次，得到的沉淀即為與磁珠結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物；(2)洗脫，沉淀中加入30～50 μL洗脫緩沖液(0.2 mol/L甘氨酸，pH 2.5)，輕輕地蓋上蓋子并混勻，立即離心(3 000 g×3 min，4 ℃)，小心的轉(zhuǎn)移上清液 (避免轉(zhuǎn)移任何免疫介質(zhì))，立即在每20 μL上清液中加入1 μL 1.5 mol/L Tris,pH 9.0 以中和洗脫液；(3)按照試劑盒操作步驟進(jìn)行活性檢測(cè)，以測(cè)得的熒光值-基底熒光值代表RhoGEF的活性。

2 結(jié) 果

2.1膿毒癥大鼠血管鈣敏感性及血漿IL-1β濃度變化 在CLP后3、6和12 h，大鼠SMAs對(duì)Ca2+敏感性的量-效曲線均出現(xiàn)右移，Emax均降低(P<0.05)，見圖1A。血漿IL-1β水平在CLP后6 h和12 h均明顯升高(P<0.05)，見圖1B。血漿IL-1β水平與同時(shí)期SMAs的鈣敏感性呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.821，P<0.05)。

a:P<0.05，與假手術(shù)組比較
圖1膿毒癥大鼠血管鈣敏感性及血漿IL-1β濃度變化

2.2IL-1β對(duì)大鼠VSMCs MLC20磷酸化水平及Rho激酶活性的影響 與對(duì)照組相比，IL-1β能明顯降低大鼠VSMCs MLC20-p/MLC20及MYPT1-p/MYPT1 (P<0.05)。見圖2。

a:P<0.05，與對(duì)照組比較
圖2 IL-1β對(duì)大鼠VSMCs MLC20磷酸化水平及Rho激酶活性的影響

2.3IL-1β對(duì)大鼠VSMCs的Gαq、Gα11、Gα12、Gα13表達(dá)水平的影響 以G蛋白/內(nèi)參β-actin表示各G蛋白的表達(dá)水平。與對(duì)照組相比，VSMCs的Gα11表達(dá)水平在各濃度IL-1β孵育后明顯升高(P<0.05)，Gα12表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)，Gα13和Gαq表達(dá)水平無明顯改變(P>0.05)。見圖3。

*:P<0.05，與對(duì)照組比較
圖3 IL-1β對(duì)大鼠VSMCs的Gαq、Gα11、Gα12、Gα13表達(dá)水平的影響

2.4IL-1β對(duì)大鼠VSMCs的RhoGEF、p63 RhoGEF和PDZ-RhoGEF活性的影響 與對(duì)照組相比，VSMCs的RhoGEF和PDZ-RhoGEF活性在各濃度IL-1β組明顯降低(P<0.05)，p63 RhoGEF活性卻明顯升高(P<0.05)。見圖4。

a:P<0.05，與對(duì)照組比較
圖4 IL-1β對(duì)大鼠VSMCs的RhoGEF及p63 RhoGEF和PDZ-RhoGEF活性的影響

3 討 論

研究顯示，Rho激酶是調(diào)節(jié)血管鈣敏感性的重要作用分子，Rho激酶是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶，其調(diào)節(jié)機(jī)制為：(1)直接磷酸化MLC20；(2)磷酸化CPI-17從而抑制MLCP進(jìn)而抑制MLC20去磷酸化；(3)直接抑制MLCP，最終使MLC20的Ser-19位點(diǎn)磷酸化，增加肌球蛋白與肌動(dòng)蛋白結(jié)合，使粗肌絲橫橋上的ATP酶活性得到提高，啟動(dòng)橫橋擺動(dòng)，增強(qiáng)肌絲滑行能力使血管平滑肌收縮[14]。

筆者前期研究結(jié)果提示，IL-1β能通過下調(diào)Rho激酶活性介導(dǎo)內(nèi)毒素休克家兔血管鈣失敏的發(fā)生，為進(jìn)一步探索其調(diào)節(jié)機(jī)制，結(jié)合實(shí)際，本研究利用膿毒癥大鼠模型及大鼠SMAs來源的VSMCs重點(diǎn)研究了IL-1β是如何下調(diào)Rho激酶活性從而介導(dǎo)膿毒癥血管鈣失敏發(fā)生的。盡管前期實(shí)驗(yàn)提示IL-1β能通過下調(diào)Rho激酶活性介導(dǎo)內(nèi)毒素休克家兔血管鈣失敏發(fā)生，但首先還是要驗(yàn)證IL-1β是否通過下調(diào)Rho激酶活性介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣失敏的發(fā)生，結(jié)果得到了驗(yàn)證。值得注意的是，CLP 3 h后血管鈣敏感性開始下降，而血漿IL-1β卻在CLP 6 h后開始升高，這是因?yàn)槟摱景Y后血漿IL-1β升高晚于TNF-α等其他細(xì)胞因子升高，而TNF-α等其他細(xì)胞因子對(duì)血管鈣敏感性也可能有調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示在血漿IL-1β水平升高后血管鈣敏感性進(jìn)一步降低，相關(guān)性分析顯示二者呈明顯負(fù)相關(guān)，在整體水平提示IL-1β可能介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣敏感性下降。為排除膿毒癥時(shí)其他細(xì)胞因子的影響，進(jìn)一步確認(rèn)其介導(dǎo)作用，筆者在離體水平培養(yǎng)SMAs來源的VSMCs，并利用IL-1β單獨(dú)作用于它們，結(jié)果顯示IL-1β能明顯降低VSMCs的MLC20磷酸化水平及Rho激酶活性，而MLC20磷酸化水平及Rho激酶活性是反映鈣敏感性的重要指標(biāo)，從而在離體水平驗(yàn)證了IL-1β能通過下調(diào)Rho激酶活性介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣失敏發(fā)生。

那么IL-1β是如何調(diào)節(jié)Rho激酶活性而介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣失敏發(fā)生的呢？本研究檢測(cè)了VSMCs上調(diào)節(jié)RhoGEF活性的G蛋白的表達(dá)水平，并通過檢測(cè)其下游的相應(yīng)RhoGEF活性來反映其自身的活性水平。結(jié)果顯示，IL-1β對(duì)G蛋白的表達(dá)調(diào)控存在差異性：下調(diào)Gα12的表達(dá)，上調(diào)Gα11的表達(dá)，對(duì)Gα13和Gαq表達(dá)卻無明顯作用。不難理解的是下調(diào)Gα12的表達(dá)，因?yàn)镮L-1β能介導(dǎo)膿毒癥血管鈣失敏發(fā)生，而G蛋白表達(dá)水平與鈣敏感性是正相關(guān)的。對(duì)于上調(diào)Gα11的表達(dá)就不好解釋了，有報(bào)道TNF-α能上調(diào)VSMCs Gαq家族表達(dá)[15]，Gα11是Gαq家族成員，TNF-α與IL-1β在功能上存在相似性，故IL-1β上調(diào)Gα11的表達(dá)是有可能的。檢測(cè)了G蛋白表達(dá)水平，但不知其活性狀態(tài)，目前對(duì)于G蛋白活性狀態(tài)的檢測(cè)較困難，為此筆者檢測(cè)了其下游相應(yīng)RhoGEF(PDZ-RhoGEF、p63 RhoGEF活性)和總RhoGEF活性以反映G蛋白活性狀態(tài)，結(jié)果其活性水平與其相應(yīng)的上游G蛋白表達(dá)變化方向一致，且總RhoGEF活性下降，提示IL-1β通過Gα12/PDZ-RhoGEF/RhoA/Rho激酶介導(dǎo)血管鈣失敏的發(fā)生，另外通過Gα11/p63 RhoGEF/RhoA/Rho激酶上調(diào)血管鈣敏感性。

綜上所述，IL-1β可通過下調(diào)Rho激酶的活性介導(dǎo)膿毒癥大鼠血管鈣敏感性降低，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，IL-1β一方面通過下調(diào)Gα12表達(dá)，下調(diào)PDZ-RhoGEF活性而下調(diào)Rho激酶活性；另一方面通過上調(diào)Gα11表達(dá)，上調(diào)p63 RhoGEF活性而上調(diào)Rho激酶活性，但兩方面途徑的總效用使總RhoGEF活性下降，進(jìn)而使Rho激酶活性下降而介導(dǎo)膿毒癥血管鈣失敏的發(fā)生。

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StudyonmechanismofIL-1βmediatingvascularcalciumdesensitizationinsepticratsthroughdown-regulatingRhokinaseactivity*

LiangJialin1,LiuLiangming2△,LiTao2

(1.DepartmentofMedicalRehabilitation,HangzhouAeromedicalIdentificationandTrainingCenterofAirForce,Hangzhou,Zhejiang310013,China;2.SecondDepartment,InstituteofFieldSurgeryResearch/StateKeyLaboratoryofTrauma,BurnsandCombinedInjury,DapingHospital,ThirdMilitaryUniversity,Chongqing400042,China)

ObjectiveTo investigate the mechanism of interleukin-1β(IL-1β) mediating the vascular calcium desensitization of septic rats by down-regulating Rho kinase activity.MethodsThirty-two SD rats were randomly divided into the sham operation group,cecal ligation and puncture (CLP) 3 h group,CLP 6 h group and CLP 12 h group,8 cases in each group.The septic rat was duplicated by CLP.Then the plasma IL-1β level and calcium sensitivity of superior mesenteric arteries (SMAs) were detected at different time points.Their correlation was analyzed.VSMCc derived from SMAs were cultured and incubated with different concentrations of human recombinant IL-1β for 24 h.Then the influences of IL-1β on the MLC20phosphorylation level,Rho kinase activity,G protein expression level and RhoGEF activity were observed.ResultsThe calcium sensitivity of SMAs after CLP 3 h began to decrease(P<0.05),while plasma IL-1β level began to increase after CLP 6 h (P<0.05),the change trend of SMAs calcium sensitivity was negatively correlated with plasma IL-1β level change(P<0.05).IL-1β could decrease the phosphorylation level of VSMCs myosin light chain(MLC20) and Rho kinase activity(P<0.05),up-regulate Gα11 expression and down-regulate Gα12 expression,but had no obvious effect on Gαq and Gα13 expression(P>0.05).IL-1β could significantly reduce RhoGEF and PDZ-RhoGEF activity(P<0.05) but significantly increase p63 Rho GEF activity(P<0.05).ConclusionIL-1β induces the decrease of PDZ-RhoGEF and Rho kinase activity by down-regulating Gα12 expression,causes the decrease of MLC20phosphorylation level,thus mediates the occurrence of calcium desensitization in septic rat;in addition,IL-1β may cause the increase of p63 RhoGEF activity by up-regulating Gα11 expression,thus mediates the increase of vascular calcium sensitivity in septic rats,but the total effect is the decrease of calcium sensitivity.

sepsis;interleukin-1 beta;calcium desensitization;G protein;RhoGEF

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.28.001

國家杰出青年科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30625037)。

梁家林(1982-)，主治醫(yī)師，博士，主要從事膿毒癥血管低反應(yīng)性發(fā)生機(jī)制的研究?！?/p>

，E-mail：liangmingliu@yahoo.com。

R631+.2

A

1671-8348(2017)28-3889-04

2017-03-02

2017-04-28)