王瑞珩，張魯忠，徐志清，馮 佩，張瑞霞，劉秋虹，邵愛華

（上海市奉賢區(qū)奉城醫(yī)院泌尿外科，上海 201411）

·基礎(chǔ)研究·

環(huán)氧化酶2在腺性膀胱炎中的表達(dá)及其臨床意義

王瑞珩，張魯忠，徐志清，馮 佩，張瑞霞，劉秋虹，邵愛華

（上海市奉賢區(qū)奉城醫(yī)院泌尿外科，上海 201411）

目的研究腺性膀胱炎組織中環(huán)氧化酶（COX2）的表達(dá)，探討其臨床意義。方法運(yùn)用免疫組織化學(xué)SP法對37例腺性膀胱炎組織、37例正常膀胱粘膜組織以及13例移行細(xì)胞癌組織進(jìn)行環(huán)氧化酶2的檢測。結(jié)果膀胱移行細(xì)胞癌組織COX2陽性表達(dá)率為76.97%，標(biāo)記指數(shù)為48±5；腺性膀胱炎組織COX2陽性表達(dá)率為21.62%，標(biāo)記指數(shù)為17±4；正常膀胱組織未見COX2陽性表達(dá)，2例發(fā)現(xiàn)陽性細(xì)胞，標(biāo)記指數(shù)為3.2和1.6。結(jié)論COX2在腺性膀胱炎組織中表達(dá)強(qiáng)度明顯高于正常組織，可以作為反映病變組織向癌癥轉(zhuǎn)化能力的指標(biāo)。

腺性膀胱炎；環(huán)氧化酶2；免疫組織化學(xué)；COX2

研究表明，在膀胱癌的惡性進(jìn)程中，普遍存在環(huán)氧化酶2（COX2）的過度表達(dá)，在膀胱腫瘤的分化、生長、轉(zhuǎn)移過程中扮演著重要角色。人們普遍認(rèn)為腺性膀胱炎是一種癌前病變，與膀胱腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。為進(jìn)一步研究腺性膀胱炎向腫瘤演變過程中的分子生物學(xué)特點(diǎn)，為臨床控制其向腫瘤轉(zhuǎn)化提供實驗室依據(jù)，我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法研究了腺性膀胱炎組織中COX2的表達(dá)情況，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2005年1月～2015年12月膀胱鏡活檢或經(jīng)尿道電切所活標(biāo)本的石蠟塊。其中膀胱腫瘤13例，男10例，女3例，平均年齡59歲；腺性膀胱炎37例，同患者正常膀胱粘膜組織37例，男性13例，女性23例，平均年齡47.4歲。病理標(biāo)本由病理科統(tǒng)一證實，切片取材以5 μm為標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 試劑和方法

采用免疫組織化學(xué)SP法對標(biāo)本進(jìn)行染色。兔抗人COX2多克隆抗體為美國Santacruz公司產(chǎn)品，免疫組化試劑盒為美國DAKO公司產(chǎn)品。用已知膀胱腫瘤陽性標(biāo)本作陽性對照，用PBS代替一抗作陰性對照。用微波進(jìn)行抗原修復(fù)。按試劑盒說明進(jìn)行實驗操作。

1.3 結(jié)果判定

經(jīng)免疫組化染色后制備好的組織玻片在400倍光學(xué)顯微鏡下觀察。細(xì)胞漿內(nèi)或核膜上呈棕黃色者為COX2陽性細(xì)胞，每例標(biāo)本隨機(jī)觀察10個視野，每個視野計算100個細(xì)胞中陽性細(xì)胞所占百分比，平均后即為標(biāo)記指數(shù)。標(biāo)記指數(shù)≥5者為COX2陽性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計量資料采用t檢驗；計數(shù)資料采用x2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

膀胱腫瘤組10例可見COX2陽性表達(dá)，陽性率為76.97%，標(biāo)記指數(shù)為48±5；腺性膀胱炎組COX2陽性表達(dá)8例，陽性率為21.62%，標(biāo)記指數(shù)為17±4；正常膀胱組織僅2例弱陽性，其病理切片顯示標(biāo)記指數(shù)分別為3.2%和1.6%。統(tǒng)計學(xué)分析顯示：COX2表達(dá)強(qiáng)度程度以腫瘤組織最強(qiáng)，腺性膀胱炎組織次之，正常組織最弱。COX2表達(dá)在三組之間存在顯著性差異，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。COX2在腫瘤組織中的表達(dá)主要在細(xì)胞漿，呈棕黃色，近似彌漫分布，少許核膜著色，不同標(biāo)本之間差異很大。腺性膀胱炎組織陽性細(xì)胞染色程度較腫瘤組織低，可見局灶性陽性細(xì)胞，且主要發(fā)生于腺體細(xì)胞及鄰近上皮細(xì)胞，結(jié)締組織細(xì)胞罕見陽性表達(dá)。正常組織僅2例標(biāo)本見散在陽性染色上皮細(xì)胞。

A：膀胱癌COX2高表達(dá)×200

B：腺性膀胱炎COX2高表達(dá)×200

3 討 論

COX2是前列腺素合成過程中重要的限速酶，在細(xì)胞受到刺激后迅速合成，參與多種病理生理過程，包括炎癥過程及腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。它是一種膜結(jié)合蛋白，定位于核膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)[1]。腺性膀胱炎被認(rèn)為是在慢性炎癥、梗阻、結(jié)石等刺激因素長期作用下，經(jīng)歷Brunn巢、腺體形成、不典型增生等系列變化進(jìn)而可能惡變?yōu)榘┑囊环N癌前病變[2]。一般認(rèn)為這一變化需要5年的時間[3]。本組37例病例中，有3例出現(xiàn)了明顯不典型增生，有2例發(fā)現(xiàn)了散在的腫瘤細(xì)胞。因為病理較少，未能對腺性膀胱炎不同發(fā)展階段的COX2表達(dá)情況進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。但直接分析結(jié)果顯示含不典型增生組織的陽性表達(dá)強(qiáng)度相對較高。提示膀胱粘膜上皮在不良刺激下其組織學(xué)特性和生物學(xué)特性都發(fā)生了變化。研究表明COX2催化的前列腺素之一PGE2通過活化磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B途徑促進(jìn)細(xì)胞的生長和運(yùn)動。已證實PGE2在促進(jìn)生長因子和癌基因的形成中有決定性作用[4]。另據(jù)研究報導(dǎo)，COX2通過防止凋亡中下游信號通路而抑制組織細(xì)胞發(fā)生凋亡；COX2通過誘導(dǎo)Bcl2表達(dá)或清除花生四烯酸酶而實現(xiàn)這一作用。COX2的表達(dá)可以顯著誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子的產(chǎn)生，其催化產(chǎn)物（PGE2、PGF2）還可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的遷移及管樣結(jié)構(gòu)的形成，而新血管的形成則被公認(rèn)為是腫瘤生長、轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)[5]?；谝陨涎芯拷Y(jié)果，部分學(xué)者應(yīng)用COX2抑制劑在實驗室水平達(dá)到了抑制多種腫瘤形成的目的。腺性膀胱炎作為一種癌前病變，其病變進(jìn)展晚期可以發(fā)現(xiàn)多種癌相關(guān)基因的變化。本組結(jié)果顯示COX2表達(dá)強(qiáng)度明顯高于正常組織也與之相符。鑒于腺性膀胱炎的癌變過程非常漫長，因此，有理由相信，在此期間對腺性膀胱炎患者，特別是COX2陽性表達(dá)的患者積極應(yīng)用COX2抑制劑治療，可以終止其惡變。[6]該類藥物如諾福丁、布洛芬等。通過調(diào)解COX2來防治腫瘤已成為目前醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)之一，但仍還有許多工作值得人們深入研究。如腺性膀胱炎不同發(fā)展階段之間的環(huán)節(jié)變化，COX2表達(dá)水平的變化是上皮細(xì)胞生物學(xué)特性變化的結(jié)果，還是炎癥刺激等誘導(dǎo)因素使上皮細(xì)胞產(chǎn)生的生理反應(yīng)？腺性膀胱炎患者應(yīng)用COX2抑制劑的療程及其停藥指標(biāo)等?？傊?，應(yīng)用COX2抑制劑預(yù)防腺性膀胱炎向腫瘤發(fā)展是一個值得關(guān)注的研究方向。

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R979.5

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ISSN.2095-8242.2017.48.9316.02

本文編輯：趙小龍