劉 婕，程祿山，荊成寶

EB病毒抗體及DNA聯(lián)合檢測對嬰幼兒傳染性單核細胞增多癥的診斷價值

劉 婕，程祿山，荊成寶

目的分析EB病毒(EBV)抗體及EBV-DNA聯(lián)合檢測在嬰幼兒傳染性單核細胞增多癥(infectious mononuleosis， IM)中的診斷價值。方法選擇我院兒科2014年1月—2016年5月診斷的120例IM患兒，分別于入院第1、2、3、4周采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測EBV-IgM，采用熒光定量法檢測EBV-DNA載量，以及EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測，比較3種檢測方法的陽性率。結(jié)果入院第1、2、3、4周EBV-IgM檢測及聯(lián)合檢測陽性率均高于EBV-DNA檢測陽性率，且第1、2周聯(lián)合檢測陽性率亦高于EBV-IgM檢測陽性率，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；入院第3、4周聯(lián)合檢測與EBV-IgM檢測陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論EBV-IgM檢測對于嬰幼兒IM早期診斷更為敏感，而早期EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測可進一步提高診斷率。

傳染性單核細胞增多癥；EB病毒抗體；EB病毒DNA

傳染性單核細胞增多癥(infectious mononuleosis， IM)是由EB病毒(EBV)感染所導(dǎo)致的一類傳染性疾病。IM不同地域發(fā)病率不盡相同，以學(xué)齡前兒童好發(fā)，研究表明我國IM好發(fā)于2～3歲兒童，而國外好發(fā)年齡稍大[1-2]。EBV可在體內(nèi)長期潛伏，大多數(shù)成年人均有EBV感染史[3-4]。盡管目前IM有明確的診斷標(biāo)準(zhǔn)，但是疾病早期臨床表現(xiàn)并無特異性，易被誤診[5]。本病若得不到及時的干預(yù)治療可發(fā)生脾破裂等嚴(yán)重并發(fā)癥，甚者可誘發(fā)嗜血細胞綜合征等危及患者生命，故IM的早期診斷尤為重要[6-7]。本研究通過分析EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測在嬰幼兒IM診斷中的價值，旨在為提高其早期診斷敏感性提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①表現(xiàn)為發(fā)熱、肝脾增大、淋巴結(jié)增大等臨床癥狀，符合IM的診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；②所有研究對象的監(jiān)護人均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天畸形及嚴(yán)重臟器功能不全者；②合并惡性腫瘤者；③資料欠缺或不能配合本研究的患兒。

1.2研究對象 選取我院兒科2014年1月—2016年5月收治的符合上述納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的120例IM患者，其中男70例，女50例；年齡為4個月～3歲，平均(15.25±7.56)個月。病程3～20(10.75±3.23)d。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)同意。

1.3檢測方法

1.3.1EBV-IgM檢測：所有患兒于入院后第1、2、3、4周清晨空腹抽取肘靜脈血5 ml，置入4℃冰箱中待測。應(yīng)用全自動酶免分析儀并采用酶聯(lián)免疫吸附法進行EBV-IgM檢測，試劑盒購自深圳亞輝龍公司，試驗操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書規(guī)范進行。

1.3.2EBV-DNA載量檢測：所有患兒采血時間和方法同EBV-IgM檢測。應(yīng)用7300實時定量PCR分析儀(美國ABI公司生產(chǎn))，并采用熒光定量法進行EBV-DNA檢測,試劑盒購自中山大學(xué)達安基因公司，試驗操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書規(guī)范進行。

1.4判定標(biāo)準(zhǔn) 觀察120例IM患兒分別采用單一EBV-IgM檢測、EBV-DNA檢測及二者聯(lián)合檢測結(jié)果。EBV-IgM以S/CO>1.000定義為陽性；EBV-DNA以>5.0E+02定義為陽性。以EBV-IgM或EBV-DNA任一陽性判定為聯(lián)合檢測陽性。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以率(%)表示，比較采用χ2檢驗。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

入院第1、2、3、4周EBV-IgM檢測及聯(lián)合檢測陽性率均高于EBV-DNA檢測陽性率，且第1、2周聯(lián)合檢測陽性率亦高于EBV-IgM檢測陽性率，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)；第3、4周聯(lián)合檢測與EBV-IgM檢測陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 120例嬰幼兒傳染性單核細胞增多癥患者EB病毒標(biāo)志物檢測陽性率比較[例(%)]

注：與EBV-DNA檢測相比，aP<0.05,bP<0.01;與EBV-IgM檢測相比，cP<0.05,dP<0.01

3 討論

IM在兒童中好發(fā)，特別是嬰幼兒，臨床無特征性表現(xiàn)，早期誤診較為多見，故借助實驗室指標(biāo)檢測EBV感染非常重要[9-11]。而EBV-IgM在IM疾病急性期有升高的特性，且近年來送檢的IM血清標(biāo)本大多是行嗜異性凝集試驗，該試驗可檢出一種暫時出現(xiàn)、凝集紅細胞的IgM型抗體即嗜異性抗體。但EBV-IgM檢測早期診斷的敏感性不足，故本研究觀察EBV-IgM聯(lián)合EBV-DNA檢測對于EBV的早期診斷價值。

本研究結(jié)果顯示，在IM患兒入院第1周時，EBV-IgM檢測陽性率為80.83%，表明患兒發(fā)病1周左右體內(nèi)已存在抗體；入院第2周時，患兒EBV-IgM檢測陽性率為89.17%，入院第3、4周EBV-IgM檢測陽性率分別為73.33%、47.50%，表明入院第2周時患兒體內(nèi)EBV-IgM含量已達最高峰，隨時間的延長，EBV-IgM檢測陽性率逐漸下降[12]，與既往其他研究報道結(jié)果相符[13]。故對IM患者在發(fā)病1～3周時，應(yīng)用EBV-IgM檢測可提高其早期診斷率。本組患兒在入院第1、2、3、4周行EBV-DNA檢測陽性率分別為63.33%、38.33%、36.67%、0，表明EBV-DNA檢測陽性率及載量呈逐漸降低的趨勢；其中1例從第1周開始EBV-DNA就轉(zhuǎn)為陰性，1例從第2周開始轉(zhuǎn)為陰性，還有1例一直檢測為陰性，表明部分患兒體內(nèi)檢測不到病毒DNA，與相關(guān)研究報道結(jié)果相符[14-15]。故對IM患者采用EBV-DNA檢測作為診斷標(biāo)準(zhǔn)是不合理的[16]。但因嬰幼兒各器官組織功能尚未發(fā)育完善，EBV-IgM和EBV-DNA在患兒體內(nèi)水平不高，故可能存在不易檢出的問題，而EBV-IgM和EBV-DNA聯(lián)合檢測可彌補其弊端，可使檢測結(jié)果更精準(zhǔn)[17]。本研究結(jié)果顯示：EBV-DNA聯(lián)合EBV-IgM檢測，在入院第1、2周檢測陽性率高于EBV-IgM檢測陽性率，表明早期聯(lián)合檢測較單一EBV-IgM檢測可明顯提高IM患者檢測陽性率及診斷敏感性[18]；而在入院第3、4周聯(lián)合檢測與EBV-IgM檢測陽性率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，可能和樣本的抽樣誤差相關(guān)，且第3、4周聯(lián)合檢測陽性率變化較小，故此時間段行聯(lián)合檢測無很大意義[19]。

綜上，在早期單獨應(yīng)用EBV-IgM和EBV-DNA檢測的情況下，EBV-IgM檢測對于嬰幼兒IM診斷更為敏感，而早期聯(lián)合檢測更可明顯提高診斷率，但是病程后期聯(lián)合檢測意義不大。

[1] 王曉亮,劉曉鶯.EB病毒抗體與DNA載量聯(lián)合檢測在兒童傳染性單核細胞增多癥中的診斷價值[J].國際病毒學(xué)雜志,2016,23(4):267-270.

[2] 孫志惠,劉鵬.EB 病毒血清學(xué)及 DNA 聯(lián)合檢測在嬰幼兒傳染性單核細胞增多癥臨床應(yīng)用研究[J].中國實驗診斷學(xué),2015,19(10):1696-1698.

[3] 馬印圖,馮謙,王更銀,等.孕婦IgM、IgG型抗-Ce聯(lián)合抗體致血型鑒定困難臨床分析[J].臨床誤診誤治,2016,32(2):80-83.

[4] 肖波,毛金娥,陳萬新,等.外周血細胞形態(tài)學(xué)檢查與EBV-DNA定量分析在小兒傳染性單核細胞增多癥早期診斷中的價值[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2016,31(3):114-116,120.

[5] 王惠霞.外周血單個核細胞EB病毒負荷的熒光定量PCR檢測在評估兒童傳染性單核細胞增多癥病情中的臨床意義[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2016,12(12):34-36.

[6] 唐云章,張銀美.兒童EB病毒感染相關(guān)重癥疾病的臨床分析[J].重慶醫(yī)學(xué),2015,34(3):387-389.

[7] 周建麗,郭志祥.傳染性單核細胞增多癥致多器官衰竭1例[J].武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1998,7(2):89.

[8] 劉雪萍,王愛蘭,李佳靜,等.EB病毒感染性兒童傳染性單核細胞增多癥80例臨床分析[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2016,45(5):532-533.

[9] 梁穎,周楠.EB病毒感染傳染性單核細胞增多癥114例并腎損害相關(guān)分析[J].中華實用兒科臨床雜志,2016,31(22):1710-1712.

[10] 梁少媛,唐敏賢,陳廣道,等.EB病毒致傳染性單核細胞增多癥患兒外周血病毒量與臨床特征的相關(guān)性[J].實用醫(yī)學(xué)雜志,2016,32(2):278-280.

[11] 夏妍,金茜,李興庫,等.黑龍江省兒童EB病毒的感染情況及疾病譜分析[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展,2016,16(18):3569-3573.

[12] 張玉枝,張金彪.白細胞計數(shù)分類聯(lián)合異型淋巴細胞診斷傳染性單核細胞增多癥的價值研究[J].中國實驗診斷學(xué),2015,19(5):788-789.

[13] 畢穎懷,鄢素琪,江治霞,等.芩柴抗毒合劑對小兒EB病毒感染傳染性單核細胞增多癥氣營兩燔型的作用分析[J].中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志,2015,22(1):18-22.

[14] 謝靜,王煥玲,邱志峰,等.成人傳染性單核細胞增多癥和慢性活動性EB病毒感染外周血淋巴細胞亞群分析[J].中華內(nèi)科雜志,2016,55(6):455-459.

[15] 洪淑君,潘靜,倪文泉,等.巨細胞病毒致兒童傳染性單核細胞增多綜合征81例臨床分析[J].中華全科醫(yī)學(xué),2016,14(10):1686-1688,1725.

[16] 張雪梅.兒童 EB 病毒感染的 EB 病毒相關(guān)血清學(xué)特征研究[J].中國實驗診斷學(xué),2016,20(7):1136-1137.

[17] 劉格,杜正強.EB病毒傳染性單核細胞增多癥合并川崎病一例[J].中國醫(yī)師雜志,2016,18(2):298-299.

[18] Nagata K, Okuno K, Ochi M,etal. Production of thyrotropin receptor antibodies in acute phase of infectious mononucleosis due to Epstein-Barr virus primary infection: a case report of a child[J].Springerplus， 2015,4:456.

[19] 朱亮華,金蕊,周國平,等.傳染性單核細胞增多癥患兒外周血IRF-3和Rta表達水平及其相關(guān)性分析[J].江蘇醫(yī)藥,2015,41(17):2023-2024.

ValueofCombinedDetectionofEBVirusAntibodyandItsDNAinDiagnosisofInfectiousMononucleosisSyndromeinInfantsandYoungChildren

LIU Jie, CHENG Lu-shan, JING Cheng-bao

(Department of Clinical Laboratory, Central Hospital of Ankang City, Ankang, Shaanxi 725000, China)

ObjectiveTo analyze value of combined detection of epstein-barr virus (EBV) antibodies and EBV-DNA in diagnosis of infectious mononucleosis syndrome (IMS) in infants and young children.MethodsA total of 120 infants and young children with IMS admitted during January 2014 and May 2016 were recruited in this study. In the 1st, 2nd, 3rdand 4thweeks after admission, EBV- immunoglobulin M (IgM) levels were detected using enzyme linked immunosorbent assay; EBV-DNA values was detected using fluorescent quantitation; combined detection of EBV-IgM and EBV-DNA were also performed. Positive rates of 3 methods were compared.ResultsPositive rates in the 1st, 2nd, 3rdand 4thweeks after admission by EBV-IgM and combined detections were significantly higher than those of EBV-DNA, and the positive rates of combined detection in the 1stand 2ndweeks after admission were significantly higher than those of EBV-IgM detection (P<0.05 orP<0.01). There were no statistically significant differences in the 3rdand 4thweeks after admission between combined detection and EBV-IgM detection (P>0.05).ConclusionEBV-IgM detection is more sensitive for early diagnosis of infants and young children with IMS, and early combined detection of EBV-IgM and EBV-DNA can further increase diagnostic rate.

Infectious mononucleosis; Epstein-Barr virus antibodies; Epstein-Barr virus DNA

陜西省科技計劃項目(2014JM4177)

725000 陜西 安康，安康市中心醫(yī)院檢驗科

R512.7

A

1002-3429(2017)10-0088-03

10.3969/j.issn.1002-3429.2017.10.029

2017-03-10 修回時間：2017-05-24)