娜 麗

慢性丙型肝炎患者外周血I L-28B基因型多態(tài)性及其對持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答的影響

娜 麗

目的探討慢性丙型肝炎（CHC）患者白細(xì)胞介素28B（IL-28B）基因型位點(diǎn)多態(tài)性及其對持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）的影響。方法2011年3月～2016年3月收治的CHC患者285例，接受24～48周利巴林韋聯(lián)合聚乙二醇干擾素治療。采用雙色熒光TaqMan技術(shù)檢測患者外周血IL-28B rs12979860基因型位點(diǎn)多態(tài)性，常規(guī)檢測HCV基因型。結(jié)果在285例CHC患者中，發(fā)現(xiàn)HCV 1b型169例（59.29%），2a型 99例（34.74%），非1b/2a亞型 17例（5.96%）；IL-28B rs12979860基因型為CC基因型208例（72.98%），CT基因型64例（22.46%），TT基因型13例（4.56%）；CC型和CT/TT型感染患者血清HCV RNA水平無顯著相差（Z=0.260，P＞0.05）；獲得 SVR 183例（64.21%），其中 169例 HCV 1b型獲得 SVR 23例（13.61%），99例 2a亞型獲得 SVR 76例（76.77%），17例非1b/2a亞型獲得 SVR 7例（41.18%），組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=20.415，P＜0.05）；208例 IL-28B CC 基因型獲得SVR 192例（92.31%），64例CT基因型獲得SVR 12例（18.75%），13例TT基因型中獲得SVR 4例（30.77%），組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（（x2=15.294，P＜0.05）。結(jié)論CHC患者獲得SVR與IL-28B rs12979860基因位點(diǎn)多態(tài)性密切相關(guān)，CC基因型感染者可能更容易獲得更高的SVR。

慢性丙型肝炎；聚乙二醇干擾素；白細(xì)胞介素-28B；持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答

近年研究表明，慢性丙型肝炎（CHC）抗病毒治療CHC患者的效果受宿主IL-28B基因多態(tài)性的影響[1-3],IL-28B基因rs8099917位點(diǎn)和rs12979860位點(diǎn)與抗病毒的療效關(guān)系密切[4，5]。在不同種族，應(yīng)用利巴韋林聯(lián)合干擾素治療rs129798 60 C基因CHC患者容易獲得更高的持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答（SVR）[6，7]，歐洲裔和西班牙裔患者獲得SVR居?xùn)|亞裔和非洲裔之間，而非洲裔遠(yuǎn)低于東亞裔患者[8，9]。本文旨在探討并分析中國CHC患者IL-28B基因型位點(diǎn)多態(tài)性及其對SVR的影響。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年3月～2016年3月我科收治的CHC患者285例，男165例，女120例；平均年齡（42.1±8.7）歲。均接受24～28周利巴林韋聯(lián)合聚乙二醇干擾素-α治療。所有患者均符合《慢性丙型肝炎抗病毒治療專家共識》診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]，納入標(biāo)準(zhǔn):①年齡≥18歲；②至少兩次血清抗HCV和HCV RNA陽性。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠及哺乳期婦女；②酒精性肝病、自身免疫性肝病、代謝性肝??；③合并甲狀腺疾病、糖尿病及精神疾??；④惡性腫瘤、失代償期肝病及器官移植術(shù)后；⑤合并甲、乙、丁、戊型肝炎。

作者單位：010050內(nèi)蒙古自治區(qū)呼倫貝爾市內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院

1.2 療效評價根據(jù) 《丙型肝炎防治指南》（2015更新版）[11]，達(dá)到治療結(jié)束時病毒學(xué)應(yīng)答（ETVR），停藥隨訪24周仍維持HCV RNA水平低于檢測下限者為SVR。

1.3 外周血IL-28B rs12979860基因型和HCV基因型檢測參照GenBank中IL-28Brs129860基因序列，應(yīng)用Vector NTI 11.0軟件設(shè)計rs12979860 CT位點(diǎn)雙色（VIC和FAM）引物和特異性熒光探針，并構(gòu)造單管等位基因雙色熒光PCR體系。探針（T）為 5’-FAM-TGGTTCACGCCT-MGB-3’，探針（C） 為 5’-VIC-GGTTCGCGCCT-MGB-3’；上游引物（IL28 F）為 5’-GGGCGGAAGGAGCAG-3’，下游引物（IL28 R）為5’-GGGCGGAAGGAGCAGTTG-3’。取外周 EDTA 抗凝血，按照基因組DNA提取試劑盒（北京凱杰公司）要求進(jìn)行基因組DNA提取，PCR反應(yīng)體系由反應(yīng)液40μl和模板10μl構(gòu)成，使用SLAN96實(shí)時熒光定量PCR儀（上海宏石公司）。常規(guī)檢測HCV基因型。

1.4 血清HCV RNA檢測采用實(shí)時熒光定量PCR法（COBAS TaqMan 48）檢測。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，采用x2檢驗(yàn)或Fisher精確概率計算法檢驗(yàn)定性資料，采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)對計量資料進(jìn)行分析，計量資料因呈偏態(tài)分布，故以M（IQR）表示，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HCV基因型分型和IL-28B rs12979860基因型情況對285例患者進(jìn)行了HCV基因分型，結(jié)果HCV 1b型169例（59.29%），2a型 99例（34.74%），非 1b/2a亞型 17例（5.96%）；IL-28B rs12979860基因型為 CC基因型 208例（72.98%），CT基因型 64例（22.46%），TT基因型 13例（4.56%）。

2.2 不同IL-28B基因型患者臨床特征比較不同IL-28B基因型患者性別、年齡、病毒載量、AST、ALT水平無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05，表 1）。

表1 不同IL-28B基因型患者臨床資料[n,M(IQR）]比較

2.3 不同HCV基因型感染患者抗病毒療效的比較在285例患者中，獲得SVR 183例（64.21%），其中169例 HCV 1b型感染者獲得SVR 23例（13.61%），99例2a亞型感染者獲得SVR 76例（76.77%），17例非1b/2a亞型感染者獲得SVR 7例（41.18%），組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=20.415，P＜0.05），2a亞型感染患者獲得SVR最高。

2.4 不同IL-28B基因型患者SVR比較 在208例IL-28B CC基因型患者中，獲得SVR 192例（92.31%），64例CT基因型獲得SVR 12例（18.75%），13例TT基因型患者獲得SVR 4例（30.77%），組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=15.294，P＜0.05），CC基因型患者獲得SVR最高。

3 討論

聚乙二醇干擾素被作為標(biāo)準(zhǔn)的抗病毒治療應(yīng)用于CHC患者[12-15]。為探討IL-28B基因型位點(diǎn)多態(tài)性對SVR的影響，我們在接受24～48周利巴林韋聯(lián)合聚乙二醇干擾素治療的285例CHC患者，采用雙色熒光TaqMan技術(shù)對該基因型進(jìn)行了研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，CT基因型與TT基因型感染患者性別、年齡、病毒載量、AST、ALT水平比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。HCV 1b型獲得SVR為13.61%，2a亞型為76.77%，非1b/2a亞型為41.18%。IL-28B rs12979860基因CC基因型感染患者獲得SVR最高，表明對CHC患者抗病毒治療的效果受IL-28B rs12979860基因型的影響，與既往報道相似[16-18]。

由于本研究病例數(shù)量少于既往類似報道，所得數(shù)據(jù)與之亦有所偏差。對于IL-28B rs12979860基因型位點(diǎn)多態(tài)性測定，其特點(diǎn)在于結(jié)果可信，操作相對簡便。

CHC患者接受利巴林韋聯(lián)合聚乙二醇干擾素治療，其持續(xù)病毒學(xué)應(yīng)答與IL-28B rs12979860多態(tài)性位點(diǎn)基因型密切相關(guān)。由于TT基因型和CT基因型分布頻率顯著低于CC基因型，而CC基因型常見，也更容易獲得SVR。因此，在決定抗病毒治療前檢測該指標(biāo)可以預(yù)估療效。

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（收稿：2016-12-22）

（本文編輯：陳宗炳）

IL-28B genotype polymorphism and its impact on sustained viral response in patients with chronic hepatitis C receiving standardized antiviral therapy

Na Li.Affiliated Hospital，Inner Mongolia Medical University，Hulunbeier 010050，Inner Mongolia Autonomous Region，China

Hepatitis C；Interferon-α；Interleukin-28B；Sustained viral response

10.3969/j.issn.1672-5069.2017.05.024

娜 麗，女，40歲，大學(xué)本科，主治醫(yī)師。E-mail:luguangybj85@126.com