劉京運(yùn),金世祿,劉寶珍,張建

(1.濱州醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院,山東 煙臺(tái) 264003;2.濱州醫(yī)學(xué)院附屬濱州市人民醫(yī)院消化內(nèi)科;3.濱州醫(yī)學(xué)院附屬濱州市人民醫(yī)院病理科,山東 濱州 256610)

CD147和S100P在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義

劉京運(yùn)1,金世祿2,劉寶珍2,張建3

(1.濱州醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院,山東 煙臺(tái) 264003;2.濱州醫(yī)學(xué)院附屬濱州市人民醫(yī)院消化內(nèi)科;3.濱州醫(yī)學(xué)院附屬濱州市人民醫(yī)院病理科,山東 濱州 256610)

目的：探討CD147和S100P在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法：采用免疫組織化學(xué)法分別檢測(cè)CD147和S100P在36例胃癌組織、35例慢性胃炎組織及35例正常胃組織中的表達(dá)情況，分析CD147、S100P表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系以及兩者在胃癌組織中的相關(guān)性。結(jié)果：CD147、S100P在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為83.3%和50.0%，與慢性胃炎組織和正常胃組織比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而慢性胃炎組織和正常胃組織比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。CD147、S100P在胃癌組織中的表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、侵及漿膜和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)。Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，CD147、S100P表達(dá)在胃癌組織中呈明顯負(fù)相關(guān)(r=0.708，P<0.05)。結(jié)論：胃癌組織中CD147表達(dá)升高，S100P表達(dá)降低，均與腫瘤分化程度、TNM分期、侵及漿膜和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示兩者可能共同參與了胃癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

CD147;S100P;胃癌;慢性胃炎;臨床病理特征

胃癌為消化道常見(jiàn)惡性腫瘤之一，其發(fā)病率、死亡率均較高，且近年來(lái)逐漸呈年輕化趨勢(shì)[1]。其早期癥狀不典型，當(dāng)出現(xiàn)明顯癥狀時(shí)多數(shù)已處于中晚期，晚期胃癌患者5年生存率仍不足20%，預(yù)后往往較差[2]。研究[3]發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和基底膜(BM)降解在腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用，其中基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)是降解ECM和BM的關(guān)鍵酶。作為MMP-9的上游調(diào)控因子，CD147可誘導(dǎo)其釋放，且在多種腫瘤組織中高表達(dá)，已成為腫瘤治療的一個(gè)新靶點(diǎn)[4]。作為一種腫瘤標(biāo)志物，S100鈣結(jié)合蛋白(S100P)參與了細(xì)胞異常增生、細(xì)胞惡變、腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)力增強(qiáng)等腫瘤發(fā)生、發(fā)展的病理過(guò)程，且與部分腫瘤分期、預(yù)后密切相關(guān)[5]。本研究通過(guò)分析CD147、S100P在不同TNM分期胃癌組織中的表達(dá)情況，以期為臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年7月至2016年7月在濱州市人民醫(yī)院經(jīng)術(shù)后病理確診并存檔的胃癌組織標(biāo)本36例，所有病例均有完整資料，排除取組織前接受放化療或激素治療者。其中男性24例，女性12例；年齡32～75歲，平均(57.2±8.2)歲；腫瘤部位：胃食管連接處24例，胃部12例；分化程度：低分化19例，中分化10例，高分化7例；TNM分期：I期7例，II期15例，III期8例，IV期6例。另選同期慢性胃炎組織標(biāo)本和正常胃組織標(biāo)本各35例。慢性胃炎組織患者男性21例，女性14例；年齡29～73歲，平均(56.8±7.9)歲。正常胃組織患者男性22例，女性13例；年齡31～74歲，平均(56.4±8.1)歲。3種組織來(lái)源患者性別、年齡比較無(wú)顯著差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

采用免疫組織化學(xué)法分別檢測(cè)CD147和S100P在胃癌組織、慢性胃炎組織及正常胃組織中的表達(dá)，方法如下：經(jīng)10%甲醛固定液固定所有標(biāo)本，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，厚度4 μm；在恒溫干燥箱中烘烤石蠟切片，過(guò)夜，常規(guī)脫蠟、水化后采用高壓鍋熱修復(fù)法修復(fù)抗原；依次滴加一抗、二抗孵育，采用3，3-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水，二苯甲透明，中性樹(shù)脂封片。分別用已知陽(yáng)性切片、磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陽(yáng)性、陰性對(duì)照。

CD147一抗為小鼠抗人CD147單抗，S100P一抗為小鼠抗人S100P單抗，均購(gòu)于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。二抗試劑生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgG，以及即用型快速免疫組化MaxVisionTM試劑盒均購(gòu)于福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。以上所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

比較CD147和S100P在胃癌組織、慢性胃炎組織及正常胃組織中的陽(yáng)性表達(dá)率，分析CD147、S100P表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系以及兩者在胃癌組織中的相關(guān)性。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

所有切片均由2名病理科醫(yī)生在未知患者臨床資料的情況下獨(dú)立進(jìn)行觀察判斷。隨機(jī)選擇5個(gè)不同視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，所得平均值即為染色結(jié)果，以陽(yáng)性細(xì)胞比例和染色強(qiáng)度評(píng)分為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)算。陽(yáng)性細(xì)胞比例<5%、5%～25%、26%～50%、>50%分別記為0～3分；細(xì)胞染色強(qiáng)度未著色、中度著色、高度著色分別記為0～2分。陽(yáng)性細(xì)胞比例和染色強(qiáng)度評(píng)分的乘積即為染色結(jié)果評(píng)分，0～1分、2～3分、3～4分、5～6分依次表示陰性(﹣)、弱陽(yáng)性(+)、中等陽(yáng)性(++)、強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料比較采用四格表資料χ2單側(cè)檢驗(yàn)，以例數(shù)(%)表示；采用Spearman等級(jí)相關(guān)性檢驗(yàn)分析CD147、S100P表達(dá)在胃癌組織中相關(guān)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3種組織中CD147、S100P的表達(dá)

CD147主要定位于細(xì)胞膜，在癌旁正常腺體及間質(zhì)細(xì)胞表達(dá)較少，而在腫瘤浸潤(rùn)邊緣部位表達(dá)較多，見(jiàn)圖1。S100P主要定位于胞質(zhì)和胞核，見(jiàn)圖2。

CD147在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為83.3%，顯著高于慢性胃炎組織的25.7%和正常胃組織的8.6%；S100P在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為50.0%，顯著低于慢性胃炎組織的82.6%和正常胃組織的94.3%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。CD147、S100P在慢性胃炎組織和正常胃組織中的陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 CD147、S100P表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系

在36例不同TNM分期胃癌患者中，CD147和S100P在腫瘤組織中的表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、侵及漿膜和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)(P<0.05)，而與性別、年齡、腫瘤部位等無(wú)關(guān)(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表1 3種組織中CD147、S100P的表達(dá)

表2 CD147、S100P表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的關(guān)系

2.3 胃癌組織中CD147和S100P表達(dá)的相關(guān)性

36例胃癌患者中，CD147表達(dá)陽(yáng)性30例，其中S100P表達(dá)陽(yáng)性13例，表達(dá)陰性17例。Spearman等級(jí)相關(guān)性分析結(jié)果顯示，胃癌組織中CD147與S100P表達(dá)呈明顯負(fù)相關(guān)(r=0.708，P<0.05)。

3 討論

目前，臨床采用根治性胃切除術(shù)聯(lián)合化療治療胃癌雖顯示出較好療效，但術(shù)后仍有17%～51%患者會(huì)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，6%～21%會(huì)出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)，且復(fù)發(fā)患者1年內(nèi)生存率非常低[6]。因此，尋求有效的分子生物學(xué)標(biāo)志物對(duì)于胃癌的診治及預(yù)后評(píng)估至關(guān)重要。

CD147既是一種分類(lèi)于免疫超家族的橫跨膜糖蛋白，又是一種細(xì)胞表面黏附分子，通過(guò)調(diào)控及介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞之間、腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)之間的關(guān)系，來(lái)調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的各種行為，如浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移與侵襲等[7-8]。研究[9-10]已證實(shí)，胃癌組織中CD147表達(dá)明顯上調(diào)，其表達(dá)程度與TNM分期、浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，且在胃癌中的表達(dá)與癌胚抗原(CEA)具有協(xié)同作用，可協(xié)調(diào)促進(jìn)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示，CD147在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)83.3%，顯著高于慢性胃炎組織的25.7%和正常胃組織的8.6%，且其表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、侵及漿膜和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

作為鈣離子結(jié)合蛋白超家族，S100家族由21個(gè)成員組成，通過(guò)鈣離子的介導(dǎo)與靶蛋白相結(jié)合來(lái)發(fā)揮維持細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)、調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)磷酸化等多種生物學(xué)功能。S100家族成員在多種腫瘤中表達(dá)異常，其中S100P可通過(guò)多種途徑加速腫瘤增殖，促進(jìn)血管生成和腫瘤轉(zhuǎn)移[11]。例如，S100P通過(guò)影響鈣離子依賴(lài)信號(hào)傳導(dǎo)通路來(lái)改變靶蛋白的構(gòu)象，從而進(jìn)一步改變腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)，影響腫瘤細(xì)胞的增殖、浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移[12]；S100P通過(guò)與糖基化終末產(chǎn)物、埃茲蛋白等靶蛋白結(jié)合來(lái)參與腫瘤細(xì)胞的增殖、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過(guò)程[13]。目前，關(guān)于S100P在胃癌組織中的表達(dá)情況仍存在一定爭(zhēng)議。Ge等[14]研究表明，S100P在胃癌組織中表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)程度與胃癌的TNM分期有關(guān)。賈淑芹等[15]認(rèn)為，S100P在胃癌組織中表達(dá)下調(diào)，其表達(dá)與腫瘤大小、侵襲深度及轉(zhuǎn)移有關(guān)。但Joghetaei等[16]通過(guò)cDNA微陣列技術(shù)對(duì)胃癌組織中基因表達(dá)譜進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)胃癌組織中未見(jiàn)S100P表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，S100P在胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為50.0%，顯著低于慢性胃炎組織的82.6%和正常胃組織的94.3%，且其表達(dá)與腫瘤分化程度、TNM分期、侵及漿膜和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。通過(guò)進(jìn)一步分析CD147和S100P的相關(guān)性，本研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織中CD147與S100P表達(dá)呈明顯負(fù)相關(guān)，表明CD147過(guò)表達(dá)可能會(huì)使S100P表達(dá)受抑，從而促進(jìn)加劇胃癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，但具體作用機(jī)制尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。

綜上所述，胃癌組織中CD147表達(dá)升高，S100P表達(dá)降低，均與腫瘤分化程度、TNM分期、侵及漿膜和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示兩者可能共同參與了胃癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，這些結(jié)果有待今后進(jìn)一步研究證實(shí)。

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(學(xué)術(shù)編輯：賀國(guó)斌)

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Expression of CD147 and S100P in gastric cancer tissues and its clinical significance

LIU Jing-yun1,JIN Shi-lu2,LIU Bao-zhen2,ZHANG Jian3

(1.SchoolofClinicalMedicine,BinzhouMedicalUniversity,Yantai264003;2.DepartmentofGastroenterology,BinzhouPeople’sHospitalAffiliatedtoBinzhouMedicalUniversity,Binzhou256610;3.DepartmentofPathology,BinzhouPeople’sHospitalAffiliatedtoBinzhouMedicalUniversity,Binzhou256610,Shandong,China)

Objective：To explore the expression of CD147 and S100P in gastric cancer tissues and its clinical significance.Methods：Immunohistochemical method was used to detect the expression of CD147 and S100P in tissues from 36 patients with gastric cancer,35 with chronic gastritis and 35 with normal stomach,respectively,so as to analyze the relationship between the expression of CD147 and S100P with the clinical pathological characteristics of patients with gastric cancer as well as their relevance in gastric cancer tissues.Results:The positive expression rates of CD147 and S100P were 83.3% and 50.0% in gastric cancer tissues,and there were significant differences when compared with the rates in tissues of chronic gastritis and normal stomach (P<0.01).However,there was insignificant difference in the rates between tissues of chronic gastritis and normal stomach (P>0.05).The expression of CD147 and S100P in gastric cancer tissues were closely related with tumor differentiation degree,TNM stages, and presence of invasion to serosa and lymph node metastasis (P<0.05).Spearman correlation analysis results showed that CD147 and S100P had significantly negative association in gastric cancer tissues (r=0.708,P<0.05).Conclusion:CD147 expression increases while S100P expression decreases in gastric cancer tissues,which has close association with tumor differentiation degree,TNM stages,and presence of invasion to serosa and lymph node metastasis,indicating that both CD147 and S100P have participated in the infiltration and metastasis of gastric cancer.

CD147;S100P;Gastric cancer;Chronic gastritis;Clinical pathological characteristics

10.3969/j.issn.1005-3697.2017.04.029

2017-01-15

劉京運(yùn)(1990-)，男，碩士研究生。E-mail:1367323868@qq.com

金世祿，E-mail:jinshiluluck@163.com

時(shí)間：2017-8-15 11∶26 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170815.1126.058.html

1005-3697(2017)-04-0583-04

R735.2

A