孫建瑞,王大紅,邱智軍,原江鋒*
(河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,洛陽市微生物發(fā)酵工程技術(shù)研究中心,河南 洛陽 471023)
連翹葉中連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷提取純化工藝優(yōu)化
孫建瑞,王大紅,邱智軍,原江鋒*
(河南科技大學(xué)食品與生物工程學(xué)院,洛陽市微生物發(fā)酵工程技術(shù)研究中心,河南 洛陽 471023)
對(duì)連翹葉提取液中同時(shí)分離連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷的提取純化工藝進(jìn)行優(yōu)化。以連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的質(zhì)量濃度為指標(biāo),采用高效液相色譜法分析檢測(cè),比較不同型號(hào)的大孔吸附樹脂和不同工藝條件對(duì)這3 種活性成分的分離純化能力。最佳工藝條件為:以AB-8大孔吸附樹脂為吸附劑,藥材-樹脂比1.5∶1(g/g),上樣流速2 BV/h,先用8 BV的水洗脫,再用6 BV的30%乙醇溶液和6 BV的50%乙醇溶液分別洗脫,洗脫流速3 BV/h;進(jìn)一步采用C18-硅膠柱反相層析法純化連翹酯苷A,靜置沉淀的方法純化連翹苷和蘆丁,純化后連翹酯苷A和蘆丁的純度可達(dá)到97%以上,連翹苷純度可達(dá)到95%以上。此工藝條件能得到高純度的3 種有效成分,為連翹葉資源的充分綜合利用和產(chǎn)業(yè)化開發(fā)提供了參考。
連翹葉;連翹酯苷A;蘆?。贿B翹苷;提取工藝
連翹葉為木犀科(Oleacaae)植物連翹(Forsythia sμspensa (Thunb.) Vahl)的干燥葉[1],《中藥大辭典》、《中華本草》等現(xiàn)代典籍記載“連翹莖葉,味苦,性寒,功能主治清熱解毒,主治心肺積熱”[2]。在連翹資源豐富的地區(qū),連翹葉在我國(guó)民間常作為滋補(bǔ)調(diào)理飲料應(yīng)用,且已有較長(zhǎng)歷史,也有將連翹葉作為保健茶飲用的習(xí)慣,普遍認(rèn)為連翹葉有較好的保健價(jià)值[3-4]。而且有研究已經(jīng)證實(shí),連翹葉茶飲料具有抗衰老、抗油脂氧化、保肝、增強(qiáng)免疫及抗應(yīng)激作用[5-9];連翹葉提取物中的苷類成分有極強(qiáng)的抗氧化、清除自由基、降血脂及抗疲勞作用[10-13]。
連翹葉中的主要活性成分與連翹果實(shí)類似,而連翹葉中連翹酯苷A、連翹苷的含量高于河南、山西、陜西、山東等地連翹果實(shí)的含量,其中連翹葉中連翹酯苷A的含量是連翹果實(shí)的5~10 倍[14-15],連翹葉中連翹苷的含量與連翹果實(shí)中的含量較為接近[16];在河北、陜西的連翹葉中蘆丁含量也較高[17]。由于連翹葉沒有進(jìn)入《中華人民共和國(guó)藥典》,其連翹葉相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)受到了很大的限制。根據(jù)已有文獻(xiàn),有從連翹果實(shí)中同時(shí)分析和測(cè)定連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的報(bào)道[18-19];有從連翹中提取連翹酯苷A的工藝研究報(bào)道[20-21]和從連翹果實(shí)和連翹葉中提取連翹苷的工藝研究[22-25],而鮮有關(guān)于連翹果實(shí)或連翹葉中蘆丁提取工藝的報(bào)道。目前,鮮有從連翹葉中復(fù)合提取純化連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷的報(bào)道。
本研究使用大孔吸附樹脂吸附和解吸附,從連翹葉中同時(shí)分離連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁,并用反相硅膠純化連翹酯苷A,用靜置沉淀純化蘆丁和連翹苷。該方法制備連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁純度較高,工藝條件簡(jiǎn)單,對(duì)連翹葉資源的充分利用和深入開發(fā)提供理論依據(jù),適合工業(yè)化生產(chǎn)。
1.1 材料與試劑
連翹葉(2014年9月采自河南豫西伏牛山地區(qū))經(jīng)河南科技大學(xué)農(nóng)學(xué)院侯小改教授鑒定。
NKA-2、D101、DA201、DM130、HPD450A、HPD600、HPD826、AB-8、聚酰胺30-100、聚酰胺14-30、聚酰胺30-60大孔吸附樹脂 河北滄州寶恩化工有限公司;連翹酯苷A對(duì)照品(批號(hào):A0590-20 mg)、連翹苷對(duì)照品(批號(hào):A0272-20 mg) 成都曼斯特公司;蘆丁對(duì)照品 美國(guó)Sigma公司;其他試劑為分析純。
1.2 儀器與設(shè)備
20A vp型高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)系統(tǒng) 日本島津公司;Milli-QG超純水制備儀 美國(guó)Millipore公司;BS 124S型萬分之一天平 賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;KQ-300DE型數(shù)控超聲清洗器 昆山市超聲儀器有限公司;RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠;QT-88A智能核酸蛋白檢測(cè)儀、玻璃層析柱 上海琪特分析儀器有限公司;BSZ-100自動(dòng)部分收集器 上海滬西分析儀器有限公司;HH-S6數(shù)顯電熱恒溫水浴鍋 常州國(guó)華電器有限公司。
1.3 方法
1.3.1 連翹葉樣品預(yù)處理工藝流程
連翹葉→洗凈干燥→粉碎→過40目篩得到連翹葉粉末。
1.3.2 上樣溶液的制備
準(zhǔn)確稱取過40 目篩的連翹葉粉末10 g,在74 ℃條件下,液料比30∶1,53%乙醇溶液水浴浸提53 min,得提取液;在74 ℃條件下,液料比20∶1,53%乙醇溶液水浴浸提50 min,合并提取液,過濾,減壓濃縮回收乙醇,濃縮至約含生藥0.05 g/mL濃縮液,每100 mL的濃縮液中添加5 mL乙醇,備用。
1.3.3 樹脂預(yù)處理
將11 種大孔吸附樹脂用95%乙醇溶液浸泡24 h充分溶脹后,用無水乙醇洗至洗出液加適量蒸餾水無白色渾濁,再用去離子水洗至無醇味,然后用3% NaOH溶液浸泡4 h,去離子水洗至中性,再用3% HCl溶液浸泡4 h,去離子水洗至中性后,濾取,備用。
1.3.4 樹脂種類選擇
分別精密稱取預(yù)處理好的濕樹脂2 g于具塞錐形瓶中,加入上樣溶液20 mL,室溫振蕩24 h至吸附平衡,測(cè)定吸附前后溶液中連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的質(zhì)量濃度,計(jì)算室溫條件下的吸附率。將吸附平衡后的樹脂抽濾,用適量蒸餾水淋洗,使流出液無色,精密加入80%乙醇溶液20 mL,同等條件下解吸附,濾過,測(cè)定濾液中連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的質(zhì)量濃度,計(jì)算解吸率。
式中:A為吸附率/%;R為解吸率/%;C0為上樣溶液中化合物的質(zhì)量濃度/(mg/mL);V0為上樣溶液體積/mL;C1為吸附后化合物的質(zhì)量濃度/(mg/mL);V1為吸附后流出液體積/mL;C2為解吸液中化合物的質(zhì)量濃度/(mg/mL);V2為解吸液體積/mL。
1.3.5 樹脂的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)
稱取AB-8濕樹脂2 g于具塞錐形瓶中,加入上樣溶液20 mL,不時(shí)振蕩,不同時(shí)間取樣,測(cè)定連翹酯苷A的含量,繪制AB-8樹脂的吸附動(dòng)力學(xué)曲線。
1.3.6 樹脂的動(dòng)態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)
將提取液以3 BV/h的流速加入AB-8大孔吸附樹脂柱(5 g,徑高比1∶25)中,每個(gè)流分收集10 mL(0.5 BV),共處理12 BV,從4 BV開始測(cè)定連翹酯苷A的質(zhì)量濃度,繪制吸附-穿透曲線。
1.3.7 吸附流速的考察
將生藥含量0.05 g/mL的提取液以藥材-樹脂比1.5∶1(g/g)上AB-8大孔吸附樹脂,上樣流速設(shè)為1、2、3、4、5 BV/h,計(jì)算不同流速條件下連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的吸附率。
1.3.8 洗脫劑乙醇體積分?jǐn)?shù)的考察
將經(jīng)樣品吸附飽和的AB-8樹脂用水洗至澄清,再依次用10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%的乙醇溶液洗脫,每個(gè)體積分?jǐn)?shù)梯度50 mL,分別測(cè)定洗脫液中連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的質(zhì)量濃度,繪制洗脫曲線。1.3.9 洗脫劑用量的考察
裝AB-8樹脂柱,按藥材-樹脂比1.5∶1(g/g)設(shè)定上樣量,先用水洗脫雜質(zhì),洗至洗脫液澄清,再依次用7 BV的30%乙醇溶液和7 BV的50%乙醇溶液洗脫,流速為3 BV/h,每10 mL收集一份,測(cè)定洗脫液中連翹酯苷A和連翹苷的質(zhì)量濃度,繪制洗脫曲線。
1.3.10 洗脫流速的考察
按藥材-樹脂比1.5∶1(g/g)上樣,先以8 BV的水洗脫,再依次用6 BV的30%乙醇溶液和6 BV的50%乙醇溶液洗脫,洗脫流速分別為2、3、4、5、6 BV/h。分別收集30%和50%洗脫液,計(jì)算連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的洗脫率和純度。
1.3.11 活性成分的分離
用6 BV的30%乙醇溶液和6 BV的50%乙醇溶液洗脫分別得到的流分Ⅰ和流分Ⅱ,分別濃縮回收乙醇,濃縮液體積為原洗脫液的1/10,室溫靜置,流分Ⅰ濃縮液靜置8 h后有蘆丁結(jié)晶沉淀,流分Ⅱ濃縮液靜置2 h即有連翹苷沉淀,沉淀完全后離心,分別得到蘆丁和連翹苷粗品。流分Ⅰ濃縮液離心后的上清液用水-飽和正丁醇1∶1室溫萃取2 次,棄去水層,合并每次萃取所得正丁醇相,50 ℃減壓濃縮,經(jīng)干燥得到連翹酯苷A粗品。分別測(cè)定連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷洗脫前后的純度。
1.3.12 活性成分的純化
室溫用玻璃棒將甲醇充分浸泡的C18勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入徑高比為1∶30柱內(nèi),裝成Φ12 mm×350 mm的層析柱,以1.0 mL/min甲醇沖洗2~3 BV,再用2~3 BV的30%甲醇溶液平衡柱子。將制備的連翹酯苷A粗品溶于30%的甲醇溶液后上樣,用30%甲醇-0.2%冰乙酸溶液作為洗脫劑,分段洗脫洗下樣品組分,收集對(duì)應(yīng)物質(zhì)峰的流出液,低溫回收有機(jī)溶劑,冷凍干燥,HPLC測(cè)定純度。
將蘆丁粗品放入具塞三角瓶中,添加盡量少的乙醇于80 ℃溶解,若不溶解,再添加少量乙醇,直到結(jié)晶全部溶解,過濾除去不溶性雜質(zhì),室溫靜置,即有黃色針狀晶體析出,重復(fù)操作3 次,HPLC測(cè)定純度。
將連翹苷粗品配制質(zhì)量濃度100 mg/mL的連翹苷甲醇溶液,加熱溶解,用0.45 μm的濾膜過濾除雜。室溫將此溶液迅速加入裝有20 倍體積去離子水的離心管中混合,進(jìn)行重結(jié)晶,離心重復(fù)操作3次,HPLC測(cè)定純度。
1.3.13 色譜條件[26]
色譜柱Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流動(dòng)相為甲醇(A)-水(含0.2%冰醋酸)(B),梯度洗脫:0~3 min,32%~32% A;3~25 min,32%~55% A;25~30 min,55%~55% A,測(cè)定波長(zhǎng)235 nm,流速l mL/min,柱溫30 ℃,進(jìn)樣量10 μL。
2.1 連翹葉中活性成分提取結(jié)果
連翹葉樣品采用醇水系統(tǒng)進(jìn)行提取后,經(jīng)HPLC檢測(cè),連翹葉中連翹酯苷A的平均含量為7.16%,連翹苷2.47%,蘆丁1.81%;連翹酯苷A提取率為87.61%,連翹苷提取率為83.37%,蘆丁提取率為80.57%。
樣品使用醇水系統(tǒng)進(jìn)行提取,同時(shí)兼顧到3 種有效成分的結(jié)構(gòu)和活性,且能把有效活性成分提取完全。連翹葉中的連翹苷為非極性化合物,易溶于甲醇、乙醇等有機(jī)溶劑,難溶于水;連翹酯苷A為極性化合物,易溶于水、甲醇、乙醇等;蘆丁易溶于甲醇、熱乙醇,不易溶于水,綜合考慮,連翹葉的提取溶劑選擇乙醇溶液,提取溶劑安全無毒,又可以回收利用。同時(shí),在提取實(shí)驗(yàn)的預(yù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),當(dāng)浸提溫度高于75 ℃時(shí),連翹酯苷A提取率開始降低,而連翹苷提取率逐漸增加,推測(cè)其原因可能是連翹酯苷A分子中具有酯鍵,較高溫度易水解,從而影響提取率[26]。
2.2 樹脂篩選
以連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷3 種活性成分的吸附率和解吸率為指標(biāo),篩選11 種樹脂,結(jié)果如表1所示,AB-8和D101樹脂對(duì)3 種活性成分的吸附率和解吸率都比較大,但考慮到連翹酯苷A為極性化合物,連翹苷和蘆丁為非極性化合物的理化性質(zhì),而D101為非極性樹脂,AB-8為弱極性樹脂,為更好地把物質(zhì)分開,選擇AB-8樹脂進(jìn)行分離純化工藝研究。
2.3 樹脂的靜態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)
圖1 AB-8樹脂的靜態(tài)吸附曲線Fig. 1 Static adsorption curve of AB-8 resin
AB-8樹脂的吸附動(dòng)力學(xué)曲線見圖1,初始階段吸附速度較快,30 min后吸附率增加緩慢,60 min后已基本達(dá)最大吸附率。
蘆丁的極性介于連翹酯苷A和連翹苷之間,而且根據(jù)HPLC的檢測(cè)結(jié)果,連翹酯苷A的含量最高,是連翹苷的2.9 倍,是蘆丁的4 倍。所以,本研究主要目的是從富含連翹酯苷A的連翹葉中得到活性化合物,在保證連翹酯苷A含量最高的同時(shí)獲得連翹苷和蘆丁,以降低生產(chǎn)成本。
2.4 樹脂的動(dòng)態(tài)吸附動(dòng)力學(xué)
圖2 AB-8樹脂的動(dòng)態(tài)吸附曲線Fig. 2 The curve of dynamic adsorption of AB-8 macroporous resin
從4 BV開始測(cè)定連翹酯苷A的質(zhì)量濃度,吸附-穿透曲線見圖2。由圖2可知,當(dāng)上樣8 BV時(shí),過柱液中連翹酯苷A的質(zhì)量濃度開始陡然增大,為不損失太多的連翹酯苷A,又考慮到連翹苷和蘆丁的飽和吸附率,故藥材-樹脂比定為1.5∶1(g/g)。
2.5 吸附流速的選擇
不同上樣流速對(duì)吸附率的影響結(jié)果如表2所示,上樣流速為1~5 BV/h時(shí),連翹酯苷A和蘆丁的吸附率隨流速的增大而下降,連翹苷一直未泄漏,上樣流速為2 BV/h時(shí),雖然連翹酯苷A和蘆丁的吸附率小于上樣流速1 BV/h,但考慮到吸附效率和吸附效果,上樣流速采用2 BV/h較為合適。
表2 上樣流速對(duì)吸附率的影響Table 2 Effects of sample loading flow rate on adsorption rate
2.6 洗脫劑體積分?jǐn)?shù)的選擇
圖3 AB-8樹脂洗脫劑體積分?jǐn)?shù)的考察Fig. 3 Effect of eluant concentration on desorption efficiency from AB-8 resin
AB-8樹脂洗脫劑體積分?jǐn)?shù)的考察結(jié)果見圖3,連翹酯苷A和蘆丁主要集中在30%乙醇洗脫液中,連翹苷主要集中50%乙醇洗脫液中,故選擇30%乙醇溶液和50%乙醇溶液作為洗脫劑。
2.7 洗脫劑用量的選擇
圖4 AB-8樹脂洗脫曲線Fig. 4 Elution curves from AB-8 resin
用8 BV的水洗脫,可洗去水溶性雜質(zhì),然后用30%乙醇溶液洗脫,洗至7 BV時(shí),連翹苷的質(zhì)量濃度開始高于連翹酯苷A的質(zhì)量濃度,改用50%乙醇溶液洗脫繼續(xù)洗脫7 BV時(shí),連翹苷被洗脫完全(圖4)。故在工業(yè)生產(chǎn)中,從經(jīng)濟(jì)方面考慮可以用6 BV的30%乙醇溶液和6 BV的50%乙醇溶液作為洗脫劑。
2.8 洗脫流速的選擇
隨著洗脫流速的增加,連翹酯苷A和蘆丁的洗脫率逐漸減小,連翹苷的洗脫率逐漸增大,而純度都是逐漸變小的(表3)。故綜合考慮三者的洗脫率、純度以及洗脫效率,洗脫流速設(shè)定為3 BV/h。
表3 不同洗脫流速的考察結(jié)果Table 3 Effect of elution flow rate on the purification and recovery of target compounds
2.9 活性成分的分離
用6 BV的30%乙醇溶液和6 BV的50%乙醇溶液洗脫分別得到的流分Ⅰ和流分Ⅱ,分別有兩個(gè)主要的峰,其他雜質(zhì)基本都被除去(圖5)。洗脫前連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷的含量分別為7.80%、1.97%和3.02%,洗脫后連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷的含量分別為51.43%、13.13%和59.17%。洗脫后連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷的純度明顯比洗脫前高,大孔吸附樹脂可有效提高有效成分的含量,說明該分離純化工藝效果好,重復(fù)性好,本工藝可行。
圖5 不同體積分?jǐn)?shù)乙醇洗脫的HPLC圖Fig. 5 HPLC Chromatograms of mixed standards and eluates with different concentrations of ethanol
利用連翹酯苷A和蘆丁在水中溶解度的差異以及連翹苷不易溶于水的特點(diǎn),采用簡(jiǎn)單的濃縮、靜置、結(jié)晶的方法即可實(shí)現(xiàn)連翹酯苷A和蘆丁的分離以及獲得較高純度的連翹苷,沉淀分離后的上清液用水飽和正丁醇萃取的方法進(jìn)行精制,就能得到純度50%以上的連翹酯苷A粗品,方法簡(jiǎn)單,正丁醇還可以回收利用,降低了生產(chǎn)成本。
2.10 活性成分的純化
圖6 三混標(biāo)與制得的單體HPLC圖Fig. 6 Chromatograms of mixed reference substances and purified individual components
純化后連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷的純度如圖6所示,經(jīng)純化后連翹酯苷A和蘆丁的純度可達(dá)到97%以上,連翹苷的純度可達(dá)到95%以上,回收率大于85%。從連翹葉提取液中初分離的連翹酯苷A粗品,因此進(jìn)一步純化是至關(guān)重要的,由于粗品中仍含有與連翹酯苷A的化學(xué)結(jié)構(gòu)和極性等性質(zhì)相似的化合物,常需采用制備HPLC手段才能純化精制,但對(duì)于大規(guī)模制備而言,HPLC過程的設(shè)備投資和介質(zhì)費(fèi)用很高。為降低連翹酯苷A的生產(chǎn)成本和提高回收率,在C18-硅膠柱上用常壓反相層析法對(duì)其進(jìn)行了純化精制,對(duì)C18-硅膠層析純化連翹酯苷A的操作條件進(jìn)行優(yōu)化,純化連翹酯苷A所用的反相硅膠雖然價(jià)格稍高,但使用時(shí)粗品中連翹酯苷A的純度已經(jīng)很高,帶進(jìn)的雜質(zhì)很少,經(jīng)過少量的甲醇沖洗,就可以重復(fù)利用。
本研究涉及一種從連翹葉中復(fù)合制備連翹酯苷A、連翹苷和蘆丁的方法,采用連翹葉為原料,先用乙醇水浴提取、濃縮、過濾得到連翹葉提取液;然后含有少量乙醇的連翹葉提取液上AB-8大孔吸附樹脂,用不同體積分?jǐn)?shù)乙醇分段洗脫,得到流分Ⅰ和流分Ⅱ;流分Ⅰ回收乙醇,靜置沉淀、乙醇重結(jié)晶得到純度大于97%的蘆丁產(chǎn)品,上清液用水飽和正丁醇萃取、濃縮、干燥后得到純度大于55%的連翹酯苷A粗品,經(jīng)反相硅膠純化純度可大于97%的連翹酯苷A產(chǎn)品;流分Ⅱ回收乙醇,靜置沉淀,甲醇重結(jié)晶得到純度高達(dá)95%的連翹苷產(chǎn)品,回收率大于85%。連翹傳統(tǒng)以果實(shí)入藥,連翹苷和連翹酯苷A是連翹的主要活性成分,也是其質(zhì)控指標(biāo),而連翹葉中的連翹苷和連翹酯苷A的含量均比果實(shí)中的含量高,卻被大量廢棄,造成資源的嚴(yán)重浪費(fèi)[27-28]?,F(xiàn)有技術(shù)大多針對(duì)一種或兩種有效活性成分,制備方法沒有綜合利用連翹資源[29-30]。本實(shí)驗(yàn)方法充分利用天然植物資源,從連翹葉中同時(shí)制備連翹苷、連翹酯苷A和蘆丁3 種產(chǎn)品,最大限度利用了資源,而且本工藝簡(jiǎn)單,適合工業(yè)化生產(chǎn)。
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Simultaneous Extraction Purification of Forsythoside A, Rutin and Phillyrin from Forsythia suspensa Leaves
SUN Jianrui, WANG Dahong, QIU Zhijun, YUAN Jiangfeng*
(Luoyang Engineering and Technology Research Center of Microbial Fermentation, College of Food and Bioengineering, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471023, China)
In this study, we optimized the simultaneous separation and purification of forsythiaside A, phillyrin and rutin from an ethanolic extract of Forsythia suspensa leaves. These target compounds were quantitatively determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Different types of macroporous adsorption resin were compared for their abilities to separate and purify three active components from Forsythia suspensa leaves. AB-8 resin was selected as the best one, and the optimum chromatographic conditions on this adsorbent were obtained as follows: sample-to-resin ratio, 1.5:1 (g/g); sample loading flow rate, 2 bed volumes (BV)/h; sequential elution with 8 BV of deionized water, 6 BV of 30% ethanol and 6 BV of 50% ethanol at a flow rate of 3 BV/h. Further purification of forsythiaside A was carried out using a C18-silica gel column by reversed-phase chromatography, while purified phillyrin and rutin were obtained by precipitation after standing. After purification, the purity of forsythiaside A and rutin was more than 97%, and that of phillyrin was over 95%. In conclusion, under the optimized conditions, three effective components of high purity were obtained from Forsythia suspensa leaves. This study may be helpful for the comprehensive utilization and industrialization exploitation of Forsythia suspensa leaves.
Forsythia suspensa leaves; forsythoside A; rutin; phillyrin; extraction conditions
10.7506/spkx1002-6630-201714031
R284.2
A
1002-6630(2017)14-0200-06
孫建瑞, 王大紅, 邱智軍, 等. 連翹葉中連翹酯苷A、蘆丁和連翹苷提取純化工藝優(yōu)化[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(14): 200-205.
10.7506/spkx1002-6630-201714031. http://www.spkx.net.cn
SUN Jianrui, WANG Dahong, QIU Zhijun, et al. Simultaneous extraction purification of forsythoside A, rutin and phillyrin from Forsythia suspensa leaves[J]. Food Science, 2017, 38(14): 200-205. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/ spkx1002-6630-201714031. http://www.spkx.net.cn
2016-08-10
國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31401672);國(guó)家自然科學(xué)基金聯(lián)合基金項(xiàng)目(U1404307);
河南省科技廳重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目(162102110056);洛陽市科技攻關(guān)項(xiàng)目(1401076A)
孫建瑞(1987—),男,講師,博士,研究方向?yàn)樘烊淮x產(chǎn)物、微生物發(fā)酵。E-mail:dasheng@hauet.edu.cn
*通信作者:原江鋒(1977—),女,副教授,博士,研究方向?yàn)閼?yīng)用生物化學(xué)。E-mail:jiangfengyuan@163.com