楊槐，楊娜，劉智，夏勤，李林豐，崔麗娟，梁鵬，夏涌然，劉汝藝，劉祿

(遂寧市中心醫(yī)院，四川 遂寧 629000)

液基細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)在胸腔積液細(xì)胞學(xué)診斷中的應(yīng)用價值

楊槐，楊娜，劉智，夏勤，李林豐，崔麗娟，梁鵬，夏涌然，劉汝藝，劉祿*

(遂寧市中心醫(yī)院，四川 遂寧 629000)

目的：探討液基細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)在胸腔積液細(xì)胞學(xué)診斷中的應(yīng)用價值。方法：選取遂寧市中心醫(yī)院病理科胸腔積液細(xì)胞學(xué)標(biāo)本238 例，采用液基細(xì)胞薄層涂片檢測(TCT)法及傳統(tǒng)手工細(xì)胞學(xué)涂片法進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢測，檢測結(jié)果以病理活組織檢查為標(biāo)準(zhǔn)，并對兩種方法的檢出率進(jìn)行比較。結(jié)果：238 例胸腔積液標(biāo)本中，傳統(tǒng)涂片法檢出73 例(30.7%)，TCT法檢出97 例(40.8%)。238 例中共檢出肺癌80 例，兩種方法對腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、小細(xì)胞癌的檢出率比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：液基細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)在胸腔積液細(xì)胞學(xué)診斷中具有較高的病變檢出率，尤其對惡性腫瘤的檢出率具有重要臨床診斷價值。

液基細(xì)胞學(xué)；胸腔積液；細(xì)胞學(xué)；診斷

液基細(xì)胞薄層涂片檢測(TCT)是采用濾過膜或重力沉淀原理，利用特殊制片系統(tǒng)制作標(biāo)準(zhǔn)化優(yōu)良細(xì)胞學(xué)病理薄片的一項技術(shù)[1]。該技術(shù)是現(xiàn)代細(xì)胞病理學(xué)的一項重大革新，自1999年引進(jìn)我國，廣泛應(yīng)用于婦科宮頸癌的早期篩查，是女性宮頸疾病早診早治的重要檢查方法，為宮頸癌早診早治做出了重要貢獻(xiàn)。近年來，該技術(shù)在非婦科方面的應(yīng)用也逐漸普及。本文238 例胸腔積液標(biāo)本均采用TCT法與傳統(tǒng)手工細(xì)胞涂片法進(jìn)行檢測，對結(jié)果進(jìn)行比較。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月—2016年8月遂寧市中心醫(yī)院病理科胸腔積液標(biāo)本238 例，其中男178 例，女60 例，年齡21～76 歲，胸腔積液均進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查并行胸膜腔穿刺活組織檢查術(shù)或纖維支氣管鏡活組織檢查術(shù)，病理診斷結(jié)果以活組織檢查診斷為標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 試劑與儀器

巴氏染色液、TCT處理液及TCT制片機(jī)均購自泰普生物科技有限公司(福州，泰普)，無水乙醇、二甲苯、甲醛溶液均購自科隆試劑有限公司(成都，科隆)。

1.3 方法

238 例胸腔積液細(xì)胞學(xué)病理薄片制作采用傳統(tǒng)手工涂片法與TCT法同時進(jìn)行取材制片。標(biāo)本前期處理方法為：送檢標(biāo)本4 ℃靜置6～8 h，棄上清液，保留液體150～200 mL。傳統(tǒng)手工細(xì)胞涂片法：用移液管于前期處理后的標(biāo)本液體中層吸取3 mL進(jìn)行手工細(xì)胞涂片，保持液體均勻分布于載玻片，室溫下干燥，轉(zhuǎn)入75%乙醇固定4 h，進(jìn)行巴氏染色，染色步驟按操作手冊進(jìn)行。TCT法：將前期處理后標(biāo)本液體50 mL轉(zhuǎn)入TCT標(biāo)本處理液中，靜置1 h，置渦旋振蕩器5 min振蕩混勻，將標(biāo)本轉(zhuǎn)入帶有濾網(wǎng)的試管，以2 000 r/min離心10 min，棄上清液，加入10 mL Tris緩沖液再次振蕩混勻，將混勻液體轉(zhuǎn)入TCT制片機(jī)按操作進(jìn)行制片，染色。

1.4 分組依據(jù)

238 例胸腔積液病變在進(jìn)行細(xì)胞學(xué)病理診斷后，均行相應(yīng)活組織檢查，最終診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)活組織檢查的組織石蠟切片為準(zhǔn)。將胸腔積液檢測結(jié)果分為良性病變和惡性病變兩大類，其中良性病變分為肺炎組(A組，81 例)和肺結(jié)核組(B組，77 例)，惡性病變?yōu)榉伟┙M(C組，80 例)。肺癌組根據(jù)癌腫類型分為腺癌組(Ⅰ組，41 例)、鱗狀細(xì)胞癌組(Ⅱ組，27 例)、小細(xì)胞癌組(Ⅲ組，12 例)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 傳統(tǒng)涂片法與TCT法對胸腔積液細(xì)胞學(xué)總檢出率比較

傳統(tǒng)涂片法檢出73 例，檢出率為30.7%，TCT法檢出97 例，檢出率為40.8%，兩種方法比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。A組與B組兩種方法檢出率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，C組兩種方法檢出率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

表1 兩種方法對胸腔積液細(xì)胞學(xué)總檢出率比較例(%)

2.2 傳統(tǒng)涂片法與TCT法對胸腔積液細(xì)胞學(xué)中肺癌組檢出率比較

238 例研究對象中肺癌80 例，傳統(tǒng)涂片法檢出25 例，檢出率為31.2%，TCT法檢出43 例，檢出率為53.8%，兩種方法檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。將Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組傳統(tǒng)涂片法與TCT法檢出率進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

表2 兩種方法對胸腔積液細(xì)胞學(xué)中肺癌組檢出率比較

3 討 論

3.1 胸腔積液細(xì)胞學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)

3.1.1 炎癥

病理學(xué)診斷胸腔積液炎癥性病變的病理特征為胸腔積液細(xì)胞學(xué)涂片中可查見中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等炎癥性細(xì)胞，背景中有纖維素樣滲出物及壞死細(xì)胞碎片等，常見胸膜脫落的內(nèi)皮細(xì)胞，無異常腫瘤樣細(xì)胞[2]。

3.1.2 結(jié)核性病變

結(jié)核性胸腔積液具有典型渾濁特點，經(jīng)沉淀后胸腔積液可分層，表層為一層薄層的油脂樣膜，其下為澄清滲出液及脫落細(xì)胞，底層為壞死組織碎片沉淀[3]。在細(xì)胞學(xué)片上可見大量的淋巴細(xì)胞，并可見多核巨細(xì)胞，背景較多為干酪樣壞死。

3.1.3 腺癌

胸腔積液中腺癌細(xì)胞多為成團(tuán)分布，癌細(xì)胞團(tuán)的大小、形狀不一，極性消失。癌細(xì)胞常相互重疊擠壓，呈桑葚樣排列，形狀為卵圓形，細(xì)胞核明顯，核膜厚，核染色質(zhì)呈疏松顆粒樣，核仁大而明顯[4]。TCT法中癌細(xì)胞可呈單個分布或3～5個排列，胞漿常有分泌空泡。

3.1.4 鱗狀細(xì)胞癌

胸腔積液中鱗狀細(xì)胞癌多為單個散在分布，形態(tài)多樣，?？沙霈F(xiàn)不規(guī)則、多邊形等奇異性細(xì)胞，細(xì)胞背景有較多紅細(xì)胞及壞死樣不定形物質(zhì)，TCT法中癌細(xì)胞多均勻分散，平鋪于切片上，背景清晰，核染色質(zhì)呈塊狀或粗顆粒狀，深染，有的可呈墨水滴樣，分化差的可見明顯核仁，部分區(qū)域癌細(xì)胞呈巢團(tuán)狀分布，且具有一定極性，并在一定程度上表現(xiàn)為鱗狀上皮的排列特點[5]。

3.1.5 小細(xì)胞癌

胸腔積液中小細(xì)胞癌為惡性神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，惡性度極高。癌細(xì)胞起源于神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，體積較小，呈圓形、卵圓形或燕麥樣，細(xì)胞質(zhì)極少，以細(xì)胞核為主，該腫瘤細(xì)胞單個散在分布時極易與淋巴細(xì)胞相混淆，癌細(xì)胞大小約為淋巴細(xì)胞的1.5～2.0倍，核畸形明顯，染色質(zhì)濃集，細(xì)胞常成群出現(xiàn)。TCT法可收集較多量的細(xì)胞于切片上[6]，有助于較多異型性細(xì)胞的檢出，并且增加癌細(xì)胞與正常淋巴細(xì)胞的對比，可大大減少漏診及誤診率。

3.2 細(xì)胞病理學(xué)在病理學(xué)診斷中的地位

病理學(xué)由組織病理學(xué)、細(xì)胞病理學(xué)及尸檢病理學(xué)三大部分組成。其中，細(xì)胞病理學(xué)是臨床診斷病理學(xué)的一個重要組成部分[7]。目前，已經(jīng)發(fā)展到分子生物學(xué)水平，液基細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)的優(yōu)點[8]：第一，處理系統(tǒng)改變了標(biāo)本采集和處理的方法，能夠消除標(biāo)本中黏液及紅細(xì)胞，使背景清晰、無污染，保持細(xì)胞完整無損，更加清楚細(xì)膩地獲得了細(xì)胞核核質(zhì)及核仁的三維立體結(jié)構(gòu)。第二，取材標(biāo)本量較大，本研究中TCT法所取標(biāo)本為經(jīng)過靜置沉淀處理后的標(biāo)本，取材量達(dá)到近200 mL，大大提高了陽性標(biāo)本的檢出率，降低了漏檢比例。直接涂片法的陽性符合率較低及出現(xiàn)假陰性的原因為：第一，涂片中沒有具有診斷意義的細(xì)胞或涂片質(zhì)量差且厚薄不均勻。第二，過多黏液和(或)血液造成背景雜亂，干擾結(jié)果。第三，炎癥細(xì)胞、上皮細(xì)胞過度重疊使具有診斷意義的細(xì)胞被遮蓋，導(dǎo)致無法觀察而影響診斷。

3.3 液基細(xì)胞學(xué)在細(xì)胞病理學(xué)的地位

液基細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)的優(yōu)勢[9]：第一，能夠去除影響閱片的細(xì)胞同時還能夠保證有足夠的細(xì)胞數(shù)量供診斷參考，并避免了直接涂片過程中所引起的細(xì)胞過度干燥造成的假象[10]。第二，自動化程序制出的薄片分布均勻，濕潤固定的細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰易于觀察。第三，每張切片的細(xì)胞較為集中排列在固定區(qū)域內(nèi)，便于觀察，減少因疲勞造成的漏診情況。第四，程序化制片，具有高效率、高穩(wěn)定性、高規(guī)范化等特點，保證制片的細(xì)胞的效果，避免人工涂片造成人為細(xì)胞擠壓而出現(xiàn)腫瘤假象[11]。制片質(zhì)量高，使診斷細(xì)胞病理學(xué)提高到標(biāo)準(zhǔn)化自動化的階段，提高了非婦科細(xì)胞學(xué)診斷的準(zhǔn)確性與可靠性。對早期發(fā)現(xiàn)診斷腫瘤及腫瘤防治研究具有重要意義，液基細(xì)胞學(xué)技術(shù)作為一種改良的細(xì)胞學(xué)制片技術(shù)還可以用于免疫細(xì)胞化學(xué)和分子水平的研究[12]。本研究中，238 例胸腔積液標(biāo)本總檢出率、肺癌組檢出率及肺癌類型分型檢出率比較，TCT法均優(yōu)于傳統(tǒng)涂片法，顯示TCT技術(shù)在非婦科液基細(xì)胞學(xué)檢測中也具有較高的應(yīng)用價值。

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The value application of thin-prep cytology test in the diagnosis of pleural effusion cytology

YANG Huai，YANG Na，LIU Zhi，XIA Qin，LI Linfeng，CUI Lijuan，LIANG Peng，XIA Yongran，LIU Ruyi，LIU Lu

(Suining Central Hospital，Suining 629000，China)

Objective：To explore the value of liquid-based cytology in the diagnosis of pleural effusion cytology.Methods：All 238 cases of pleural effusion cytology were collected from Suining Central Hospital.The TCT method and traditional manual cytology smear were used for cytology.The detection results were based on pathologic biopsy and the detection rate of the two methods were compared.Results：In the 238 cases of pleural effusion，73 cases (30.7%) were detected by traditional smear，97 cases (40.8%) were detected by TCT method.In 238 cases，lung cancer in 80 cases，compared with the traditional smear detection rate，the difference was statistically significant.Conclusion：Thin-prep cytology test in the pleural effusion cytology diagnosis has higher detection rate of pathological changes，especially for malignant tumor detection rate with the clinical diagnostic value.

thin-prep cytology test；pleural effusion；cytology；diagnose

1671-8631(2017)06-0456-03

*本文通訊作者：劉祿

R561

B

2016-08-16

(本文編輯：王作利)

楊槐(1974— )，男，重慶市潼南縣人，副主任醫(yī)師。研究方向：細(xì)胞學(xué)病理診斷。