薩仁格日樂 朝 魯 陳紅梅 奧·烏力吉 王秀蘭

(1．內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028041;2．內(nèi)蒙古蒙醫(yī)藥工程技術(shù)研究院，內(nèi)蒙古 通遼 028041；3．新疆博州蒙醫(yī)醫(yī)院，新疆 博樂 833400;4．內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028041)

HPLC測定蒙藥阿如健脾散中沒食子酸的含量Δ

薩仁格日樂1,2朝 魯3陳紅梅1奧·烏力吉2,4王秀蘭2,4

(1．內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 通遼 028041;2．內(nèi)蒙古蒙醫(yī)藥工程技術(shù)研究院，內(nèi)蒙古 通遼 028041；3．新疆博州蒙醫(yī)醫(yī)院，新疆 博樂 833400;4．內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028041)

目的：建立高效液相法測定蒙藥阿如健脾散沒食子酸含量的方法，為建立該藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)方法。方法：采用Inertsil-ODS-35um(250L×4.6)色譜柱，甲醇-水-乙腈-磷酸(20：480：10：2.5)為流動(dòng)相，流速1mL/min，柱溫25℃，在273nm處測定蒙藥阿如健脾散中沒食子酸的含量。結(jié)果：沒食子酸線性范圍為60～600μg，r=0.998，平均加樣回收率為98.86%，RSD=0.74%；結(jié)論：本方法簡便快速、準(zhǔn)確可靠，為該制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定提供可靠依據(jù)。

HPLC法；蒙藥阿如健脾散；沒食子酸

蒙藥阿如健脾散由訶子、五靈脂、寒水石(制)、土木香、胡黃連等5味藥組成的傳統(tǒng)蒙藥制劑。具有健脾和胃，理氣鎮(zhèn)痛功效，主要用于“赫依協(xié)日”、“寶日”、“巴達(dá)干”病引起的胃腕脹滿，上腹疼痛諸癥[1-2]。本文中筆者以訶子中主要成分沒食子酸為指標(biāo)，采用HPLC法測定其含量，為建立該藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)方法。

1 儀器與材料

1.1 儀器：LC-20A型高效液相色譜儀(日本島津)；SPD-20A型檢測器；KQ-100型超聲波清洗器(昆山市超聲波儀器有限公司)；AUX220型電子天(Max220gd=0.01mg)(日本島津)。

1.2 試藥：三批阿如健脾散：內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院蒙藥制劑室(20160409，20160410，20160411)；沒食子酸對照品()110831-201605：中國藥品生物制品檢定所，批號110713-200708；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余溶劑均為分析純。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 色譜條件[3]：LC-20AT泵，SPD-20A檢測器，SIL-20A全自動(dòng)進(jìn)樣器，Labsoiution工作站；以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的Inertsil-ODS色譜柱(250mm*4.6)；流動(dòng)相：甲醇：水：乙腈-磷酸(4：96：0.2：0.05)，流速1.0mL/min；柱溫25℃；檢測波長273nm；理論板數(shù)3000以上。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密稱取沒食子酸對照品適量，加甲醇制成每1mL含60ug的溶液。精密吸取沒食子酸對照品溶液1.0μL、2.0μL、4.0μL、6.0μL、8.0μL、10.0μL進(jìn)樣，測定其峰面積。按峰面積積分值對濃度進(jìn)行線型回歸計(jì)算，得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為A=58156C-40977,R=0.998。結(jié)果表明沒食子酸在60～600μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，結(jié)果見表1。

表1 沒食子酸進(jìn)樣量(μg)與峰面積(A)的關(guān)系

2.3 空白干擾實(shí)驗(yàn)：按阿如健脾散處方比例稱取除訶子以外的其它藥材適量，依照供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液，在相同的色譜條件下測定，陰性對照溶液在沒食子酸出峰位置上無干擾。結(jié)果見圖1～3。

圖1 沒食子酸對照品色譜圖

圖2 陰性對照品色譜圖 圖3 阿如健脾散色譜圖

2.4 精密度實(shí)驗(yàn)：取濃度為60μg/mL的對照品溶液及樣品液各1μL，分別進(jìn)樣，重復(fù)5次測定峰面積。結(jié)果為對照品RSD=0.57%，樣品RSD=1.11%。

2.5 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：取同一批號樣品5份，按樣品測定項(xiàng)下方法制備和測定，其RSD=1.05%。

2.6 回收率試驗(yàn)：精密稱取已知沒食子酸的樣品5份，分別加入一定量的沒食子酸對照品，按供試品處理方法處理后進(jìn)樣1μL測定，計(jì)算沒食子酸回收率，結(jié)果見表2。

表2 樣品回收率試驗(yàn)結(jié)果

3 供試品溶液的制備和測定[4]

3.1 供試品溶液的制備：稱取3個(gè)批號阿如健脾散約粉末1.50g，精密稱定，置加甲醇具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，超聲處理，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，過濾，加甲醇定容至50mL，搖勻，即得。

3.2 供試品溶液的測定：精密吸取供試品液1μL，注入液相色譜儀，測定峰面積，計(jì)算含量，結(jié)果見表3。

表3 阿如健脾散中沒食子酸的含量(n=3)

4 討論

訶子為阿如健脾散中的主藥之一，占組方的40.0%，沒食子酸為其主要活性成分之一。本文分別以水：甲醇：冰醋酸及甲醇：水：乙腈-磷酸為流動(dòng)相，采用HPLC法測定沒食子酸的含量，結(jié)果甲醇：水：乙腈-磷酸較好的分離效果較好，因此選定該流動(dòng)相進(jìn)行含量測定。實(shí)驗(yàn)表明本方法簡便易行，重現(xiàn)性好，為建立該藥物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究奠定了良好基礎(chǔ)。

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(蒙藥分冊)[S]．1998：149.

[2]內(nèi)蒙古自治區(qū)衛(wèi)生廳.內(nèi)蒙古蒙成藥標(biāo)準(zhǔn)[S]．1984：337.

[3]內(nèi)蒙古自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局.內(nèi)蒙古蒙藥制劑規(guī)范注釋(2007年版；第一冊下)[S]．呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社，2007:125.

[4]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[M]．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：1363.

2016年12月22日收稿

內(nèi)蒙古蒙醫(yī)藥科技重大專項(xiàng)項(xiàng)目子課題(GLY20150710)

薩仁格日樂(1968.9-)內(nèi)蒙古通遼科左后旗人，內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院工作， 主任蒙藥師，從事蒙藥制劑及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

R291.2

B

1006-6810(2017)04-0042-02