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        加味五皮飲對(duì)卵巢過度刺激綜合征模型大鼠E2、VEGF和CFTR的影響研究

        2017-05-31 21:34:36陳瑾陳曉勇胡麗莎吳小華陳凌燕
        中國當(dāng)代醫(yī)藥 2016年36期
        關(guān)鍵詞:血管內(nèi)皮生長因子雌二醇

        陳瑾+陳曉勇+胡麗莎+吳小華+陳凌燕+許忠波+方芳

        [摘要]目的 探討加味五皮飲對(duì)卵巢過度刺激綜合征(OHSS)模型大鼠雌二醇(E2)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)器(CFTR)的影響。方法 將30只未成年雌性Wistar大鼠(SPF級(jí))隨機(jī)分為模型中藥組和模型對(duì)照組,每組15只。對(duì)兩組大鼠采用血清促性腺激素(PMSG)+人絨毛膜促性腺激素(HCG)的方式建立OHSS模型,同時(shí)給予加味五皮飲和生理鹽水灌胃。HCG注射48 h后,沿腹部中線切開腹腔,取出大鼠雙側(cè)卵巢稱重,采用免疫組化測(cè)定大鼠卵巢組織的VEGF和CFTR蛋白表達(dá),采用RIA檢測(cè)血清E2水平。結(jié)果 模型中藥組的卵巢VEGF蛋白表達(dá)、CFTR蛋白水平和血清E2水平分別為(62.20±11.71)、(57.20±19.82)、(26.91±7.63)pg/ml,模型對(duì)照組為(136.31±22.74)、(111.32±32.25)、(32.55±6.63)pg/ml,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=69.097,P=0.01;F=67.057,P=0.01;F=16.36,P=0.01)。結(jié)論 加味五皮飲可有效降低OHSS大鼠外周血E2水平和OHSS大鼠卵巢組織中的VEGF和CFTR蛋白表達(dá)。

        [關(guān)鍵詞]卵巢過度刺激綜合征;血管內(nèi)皮生長因子;雌二醇

        [中圖分類號(hào)] R-332 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721(2016)12(c)-0008-04

        Influence study of Jiawei Wupi Decoction on E2,VEGF and CFTR of ovarian hyperstimulation syndrome model rats

        CHEN Jin1 CHEN Xiao-yong1 HU Li-sha1 WU Xiao-hua1 CHEN Ling-yan1 XU Zhong-bo2 FANG Fang1

        1.Departmentof Traditional Chinese Medicine,Maternal and Child Health Care Hospital of Jiangxi Province,Nanchang 330006,China;2.Department of Emergency,Hospital of Traditional Chinese Medicine of Jiangxi Province,Nanchang 330006,China

        [Abstract]Objective To explore the influence of Jiawei Wupi Decoction on E2,VEGF and CFTR in rats with ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS).Methods 30 female Wistar rats (SPF grade) were randomly divided into the model traditional Chinese medicine group and the model control group,15 cases in each group.PMSG+HCG way were used on the rats of two groups to establish OHSS model,at the same time,Jiawei Wupi Decoction and normal saline were given.After 48 h of HCG injection,the abdominal cavity was cut along the midline of abdomen and the ovaries were weighed.The expression of VEGF and CFTR protein in the ovary of rats were detected by immunohistochemistry.Neutral serum E2 level was detected by RIA.Results The expression of VEGF protein,CFTR protein and serum E2 in model traditional Chinese medicine group were (62.20±11.71),(57.20±19.82),(26.91±7.63)pg/ml,the model control group were (136.31±22.74),(111.32±32.25),(32.55±6.63)pg/ml,the difference was statistically significant (F=69.097,P=0.01;F=67.057,P=0.01;F=16.36,P=0.01).Conclusion Jiawei Wupi Decoction can effectively decrease the level of E2 in OHSS rats and the expression of VEGF and CFTR protein in ovarian tissues of OHSS rats.

        [Key words]Ovarian hyperstimulation syndrome;Vascular endothelial growth factor;Estradiol

        作為超促排卵藥物誘發(fā)排卵治療過程中常出現(xiàn)的醫(yī)源性并發(fā)癥綜合征,卵巢過度刺激綜合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)的發(fā)生率約為20%。其發(fā)生原因可能與卵巢中多個(gè)卵泡同時(shí)發(fā)育、血清中的E2水平過高有關(guān),同時(shí)也可能與應(yīng)用人絨毛膜促性腺激素(HCG)有關(guān)。OHSS的發(fā)生與患者體內(nèi)雌、孕激素水平升高以及血管活性物質(zhì)異常表達(dá)和升高相關(guān),如與雌二醇(E2)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和白介素-6(IL-6)等有關(guān)[1-2]。還有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),在外源性促性腺激素藥物作用下,體內(nèi)高水平E2能導(dǎo)致囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)器(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)異常表達(dá)于卵巢及其他組織,最終導(dǎo)致OHSS的發(fā)生[3-4]。本研究通過對(duì)OHSS模型大鼠造模,同時(shí)給予五皮飲加減方干預(yù),采用免疫組化等方法觀察其對(duì)模型大鼠體內(nèi)E2、VGEF、CFTR的影響,為中藥在臨床上預(yù)防和治療OHSS提供理論基礎(chǔ),現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。

        1材料與方法

        1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

        選取未成年SPF級(jí)Wistar大鼠30只(雌性),22日齡,平均體重(49.2±4.5)g,購自于湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。所有大鼠在同樣環(huán)境下飼養(yǎng),自由飲食、飲水,相對(duì)濕度40%~60%,室溫20~22℃。

        1.2實(shí)驗(yàn)分組

        采用隨機(jī)數(shù)字表法將30只編號(hào)雌性Wistar大鼠分為模型中藥組和模型對(duì)照組,每組15只。

        1.3 主要試劑與儀器

        免疫組化一抗試劑(美國Santa Cruz公司);DAB顯色劑和PV-9000試劑(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司);IL-6檢測(cè)試劑盒購于武漢優(yōu)爾生;E2放免測(cè)定盒購于北京華英生物技術(shù)研究所;722型可見光分光光度計(jì)(上海光譜儀器有限公司);酶標(biāo)儀(丹麥RAYTO公司);r-911全自動(dòng)放免計(jì)數(shù)儀(中國科技大學(xué)實(shí)業(yè)總公司);高倍光學(xué)顯微(德國LEICA公司)。

        1.4 OHSS大鼠模型建立

        按改良的Ujioka方法[2]建立OHSS模型。每只大鼠從22~25日齡連續(xù)將0.1 ml生理鹽水[含10 IU血清促性腺激素(PMSG)]注入皮下,1次/d,末次注射PMSG 1 d后1次皮下注射0.1 ml生理鹽水(含100 IU HCG)。

        1.5中藥及給藥

        在五皮飲基礎(chǔ)方上加味,具體如下:白術(shù)12 g,黨參12 g,桑寄生15 g,菟絲子15 g,大腹皮、桑白皮、生姜皮、茯苓皮、陳皮各20 g,黃芪12 g,當(dāng)歸10 g,將上述藥用水中浸泡30 min,沸騰后調(diào)至小火煎煮30 min,過濾,使生藥含量為1 g/ml水煎劑。于造模同時(shí),模型中藥組、模型對(duì)照組分別給予加味五皮飲和生理鹽水2 ml灌胃進(jìn)行干預(yù),1次/d,連用7 d。空白組于22~26日齡皮下注射生理鹽水0.1 ml,1次/d,連用5 d。人用劑量(g)×5×0.018為大鼠等效劑量,計(jì)算得1.575 g/(100 g·d)。

        1.6標(biāo)本采集

        在HCG注射48 h后即28日齡時(shí),采用注射用苯巴比妥鈉(80 mg/kg)麻醉30只OHSS模型大鼠,20 min后股靜脈采血2 ml置于試管中,離心后-20℃保存?zhèn)錂z;脫頸處死大鼠,沿腹部正中線切開大鼠腹腔,取出卵巢組織并稱重,放入裝有甲醛的PE管內(nèi)固定,常規(guī)石蠟包埋、切片,用于免疫組化染色。

        1.7指標(biāo)測(cè)定

        血清中E2測(cè)定采用放射免疫法(RIA),檢測(cè)步驟按說明書操作。卵巢中VEGF和CFTR蛋白測(cè)定采用免疫組化PV二步法,應(yīng)用MIQAS醫(yī)學(xué)圖象定量分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析,每張切片中挑選5個(gè)視野,VEGF和CFTR陽性光密度值需在相同條件下測(cè)量,切片光密度值為平均值,同時(shí)測(cè)量陽性面積,陽性面積/總面積為陽性面積比,最后算出免疫組化陽性指數(shù)。免疫組化陽性指數(shù)=陽性面積比×平均光密度值。

        1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計(jì)量資料采用x±s表示;符合正態(tài)分布及方差齊性者采用t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2結(jié)果

        2.1兩組E2、VEGF免疫組化陽性指數(shù)、CFTR免疫組化陽性指數(shù)的比較

        模型中藥組大鼠血清中的E2含量低于模型對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。模型中藥組的免疫組化陽性指數(shù)低于模型對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。模型中藥組的免疫組化陽性指數(shù)低于模型對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

        2.2兩組的VEGF免疫組化分析

        各組大鼠卵巢組織中VEGF在黃體細(xì)胞、卵泡顆粒細(xì)胞胞漿中均有表達(dá),呈黃色(圖1)。

        2.3兩組的CFTR免疫組化分析

        各組大鼠卵巢組織中CFTR在黃體細(xì)胞有表達(dá),呈黃色(圖2)。

        3討論

        OHSS是采用超促排卵治療過程中常出現(xiàn)的醫(yī)源性并發(fā)癥,屬于多臟器功能障礙的一種全身性疾病,其主要臨床特點(diǎn)包括E2水平顯著升高、卵巢內(nèi)卵泡大量發(fā)育和體積增大等。既往研究顯示,HCG在誘發(fā)卵母細(xì)胞成熟過程中具有重要作用,是超排卵治療后誘發(fā)OHSS的先決條件[3]。其原因?yàn)镠CG可誘導(dǎo)卵泡發(fā)育成熟和排出,增加顆粒細(xì)胞中VEGF mRNA表達(dá),產(chǎn)生大量VEGF,進(jìn)而增加血管通透性[4-6]。

        相關(guān)報(bào)道顯示,在大多數(shù)預(yù)測(cè)OHSS發(fā)生的方法中,檢測(cè)患者血清中E2水平是最重要的指標(biāo)之一[7],因此E2與OHSS發(fā)生有著密切關(guān)系。有研究顯示,月經(jīng)期第9天患者血清E2>800 pg/ml會(huì)增加OHSS風(fēng)險(xiǎn)[8]。也有研究顯示,促排卵刺激第11天患者血清E2為3354 pg/ml時(shí)OHSS風(fēng)險(xiǎn)高達(dá)85%。如E2為3000 pg/ml且卵巢內(nèi)大量卵泡增長迅速,表明易出現(xiàn)OHSS,需給予干預(yù)治療[9]。血清中E2水平過高誘發(fā)OHSS機(jī)制可能與雌激素生物學(xué)效能相關(guān),將體內(nèi)E2控制至低水平有助于預(yù)防OHSS[10-12]。亦有學(xué)者指出,E2水平過高可在外源性促性腺激素作用下造成CFTR表達(dá)于卵巢及其他組織異常,導(dǎo)致OHSS發(fā)生,因此,不僅在促超排卵過程中會(huì)并發(fā)OHSS,同樣在妊娠早期也可合并發(fā)生OHSS。有研究報(bào)道顯示,妊娠可以加重OHSS癥狀,同時(shí)容易發(fā)生流產(chǎn),但是OHSS對(duì)妊娠結(jié)局未產(chǎn)生明顯不良影響[13-15]。

        近年來,廣大學(xué)者對(duì)OHSS的發(fā)生機(jī)制進(jìn)行了研究,但目前西醫(yī)缺乏OHSS的特效治療方法,僅給予對(duì)癥治療,同時(shí)以預(yù)防為主。輔助生殖中心對(duì)于可能發(fā)生OHSS的患者一般采取放棄取卵周期的移植,對(duì)于已妊娠并且出現(xiàn)輕度OHSS的患者,一般無需特殊處理,進(jìn)行門診隨訪;對(duì)于已妊娠并且出現(xiàn)中、重度的OHSS的患者,則需收入院治療,監(jiān)測(cè)患者24 h的出入量,主要糾正血容量及水電解質(zhì)紊亂,保護(hù)肝腎功能,同時(shí)防止因血液濃縮導(dǎo)致的血栓的形成,減少血管內(nèi)液體滲出,預(yù)防發(fā)生低血容量性休克。未妊娠的患者一般不會(huì)發(fā)生OHSS,即使發(fā)生也會(huì)很輕,不用特殊處理。

        OHSS是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展后產(chǎn)生的醫(yī)源性并發(fā)疾病,傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)未對(duì)OHSS進(jìn)行闡述,但其全身水腫、腹及胸腔積液、雙側(cè)卵巢增大等臨床癥狀和體征與中醫(yī)學(xué)理論中的癥瘕、臌脹、子腫等疾病相關(guān),因此歸于上述疾病范疇[16]。中醫(yī)理論認(rèn)為,其病變與肝、腎、脾、肺等臟器密切相關(guān)[17-18]。五皮飲方收載于華佗的《華氏中藏經(jīng)》,組方包括廣陳皮、茯苓皮、大腹皮、桑白皮、姜皮,常用于治療妊娠水腫和皮水。方中陳橘皮化濕濁、和胃氣,大腹皮消脹滿、行水氣,桑白皮調(diào)水道、調(diào)水道,生姜皮散水飲,茯苓皮補(bǔ)脾運(yùn)化、利水滲濕,上述諸藥共奏利氣健脾、利濕消腫功效。在上述方上加味黨參、當(dāng)歸、白術(shù)、黃芪、桑寄生、菟絲子,可發(fā)揮利濕消腫、理氣健脾作用。本研究結(jié)果顯示,加味五皮飲能夠有效抑制OHSS模型大鼠血清中的E2、IL-6水平,降低腹腔毛細(xì)血管通透性和VEGF蛋白在卵巢中的表達(dá),從而對(duì)OHSS的發(fā)生起到防治作用。

        綜上所述,本次研究為臨床上采用中藥加味五皮飲防治OHSS奠定了一定的理論基礎(chǔ),能夠更好地指導(dǎo)臨床用藥,值得推廣應(yīng)用。

        [參考文獻(xiàn)]

        [1]黃家佳,楊健之.卵巢過度刺激綜合征危險(xiǎn)因素及發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展[J].生殖與避孕,2011,31(4):283-287.

        [2]付永倫,林其德,仲汗威.卵巢過度刺激綜合征大鼠模型建立[J].上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2002,22(1):16-19.

        [3]靳鐳,湯瑞玲.囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)器在卵巢過度刺激綜合征模型大鼠卵巢中表達(dá)的變化[J].華中科林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2007,36(5):640-643.

        [4]鄧大慶,蔣軍松.滋陰抑亢調(diào)沖湯對(duì)卵巢過度刺激綜合征模型大鼠囊性纖維化跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子的影響[J].廣西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2015,18(3):1-4.

        [5]史曉明,祁秀娟,呂映頻,等.多囊卵巢綜合征患者血清VEGF及PEDF與卵巢過度刺激綜合征的關(guān)系[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展,2015,24(5):360-362.

        [6]藍(lán)肇熙,馬憶南,王萬智,等.中藥治療大鼠卵巢過度刺激綜合征模型VEGF和IL-6的相關(guān)性研究[J].四川中醫(yī),2008,26(11):15-17.

        [7]張祖威,姚書忠,陳玉清,等.參芪利水湯治療大鼠卵巢過度刺激綜合征模型的實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2009, 20(10):2449-2450.

        [8]程蕾,黃鵬,邱曉曉,等.滋陰抑亢調(diào)沖湯對(duì)卵巢過度刺激綜合征大鼠TNF-a、E2和腹腔毛細(xì)血管通透性的影響[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2016,40(7):76-77.

        [9]祝佩芹,米立國,李蓮,等.中西醫(yī)結(jié)合治療卵巢過度刺激綜合征的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國婦幼保健,2009,24(19):2628-2630.

        [10]蘇寧,張清學(xué),李予,等.45例中重度卵巢過度刺激綜合征臨床分析[J].中國婦幼保健,2007,22(8):1070-1072.

        [11]何曉霞,張學(xué)紅,魏清琳.初步探討針刺治療對(duì)卵巢過度刺激綜合征(OHSS)的影響[J].生殖與避孕,2011,31(12):817-821.

        [12]李燕,彭遜,林志雄,等.溫陽健脾中藥干預(yù)體外受精-胚胎移植周期卵巢過度刺激綜合征的臨床研究[J].浙江中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2013,37(10):1171-1176.

        [13]范燕宏,喬杰,陳貴安,等.132例中、重度卵巢過度刺激綜合征妊娠結(jié)局分析[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,10(6):4.

        [14]楊一,陸華.妊娠合并卵巢過度刺激綜合征的中西醫(yī)防治概述[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2012,32(1):83-84.

        [15]許浩麗,丘映,滕聯(lián)秧,等.發(fā)生中重度卵巢過度刺激綜合征危險(xiǎn)因素預(yù)測(cè)的相關(guān)分析[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2010,18(3):141-144.

        [16]葛明曉,陶莉莉,鄧偉民.卵巢過度刺激綜合征的中西醫(yī)診療研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2014,23(14):1587-1591.

        [17]滕依麗.從中醫(yī)學(xué)角度探析卵巢過度刺激綜合征[J].江西中醫(yī)藥,2010,41(27):8-10.

        [18]齊英華,張建偉,連方.卵巢過度刺激綜合征辨治體會(huì)[J].山東中醫(yī)雜志,2012,31(6):412-413.

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