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        不同硒源栽培模式下紫芝的富硒研究

        2017-05-30 16:24:17鐘劍鋒陳喜蓉林芳能
        安徽農業(yè)科學 2017年27期
        關鍵詞:紫芝微波消解栽培模式

        鐘劍鋒 陳喜蓉 林芳能

        摘要[目的]研究不同硒源栽培模式下紫芝的富硒情況。[方法]微波消解-ICP-MS法對不同栽培模式富硒紫芝中的Mg、Ca、Fe、Cr、Co、Cu、Zn、As、Cd、Pb、Se、Ag、Hg 13種元素進行測定和基質中的Se檢測。通過添加無機硒元素(亞硒酸鈉、活化硒礦)富硒栽培和天然富硒原料富硒栽培,研究不同硒源栽培模式下紫芝的富硒情況。[結果]14個富硒樣品中檢測出Mg、Ca、Fe、Cr、Co、Cu、Zn、As、Cd、Pb、Se,未檢出Ag、Hg這2種元素。添加亞硒酸鈉為硒源時,當基質中硒含量為41.00 mg/kg,富硒效果最佳;當基質中硒含量大于110.00 mg/kg,富硒效果較差。在添加活化硒礦為硒源時,富硒效果較差。其他元素含量較接近。[結論]添加亞硒酸鈉硒源比添加活化硒礦硒源的富硒效果較好。

        關鍵詞 微波消解-ICP-MS法;栽培模式;硒源;紫芝;生物富硒

        中圖分類號 S188 文獻標識碼 A 文章編號 0517-6611(2017)27-0146-02

        Abstract [Objective] The research aimed to study the seleniumenriched condition of Ganoderma lucidum under different selenium cultivation models.[Method]The contents of Mg, Ca, Fe, Cr, Co, Cu, Zn, As, Cd, Pb, Se, Ag and Hg of seleniumenriched Ganoderma lucidum under different cultivation models were determined, and the selenium in the matrix was detected by microwave digestionICPMS method.The selenium enriched condition of Ganoderma lucidum was studied by adding inorganic selenium (sodium selenite, activated selenium ore) and natural selenium enriched raw material seleniumenriched cultivation.[Result]Mg, Ca, Fe, Cr, Co, Cu, Zn, As, Cd, Pb and Se were detected in 14 seleniumenriched samples.Ag and Hg were not detected.When selenium selenite was added as selenium source, the selenium content was 41.00 mg/kg and the seleniumenriched effect was the best.When the content of selenium in the matrix was more than 110.00 mg/kg,the seleniumenriched effect was poor.When the activated selenium ore was selenium, the seleniumenriched effect was poor.Other elements were closer.[Conclusion]The seleniumenriched effect of adding selenite selenium source was better than that of selenium source of adding activated selenium ore.

        Key words Microwave digestionICPMS method;Cultivation model;Selenium source;Ganoderma lucidum;Bioenriched selenium

        紫芝是真菌的一種,似靈芝,是我國名貴中草藥之一。紫芝可以改善和提高人體免疫力,促進核酸、蛋白質的合成,保肝、解毒,延緩細胞衰老,治療高血壓和高血脂癥[1]。紫芝的有效成分十分豐富,含有豐富的多糖、甾類、氨基酸、蛋白質、維生素及其他活性物質外, 還具有很強的富硒能力[2],所富集的硒主要以蛋白硒、多糖硒、核酸硒等有機態(tài)硒存在[3]。硒是人體必需的微量營養(yǎng)元素[4-5]。研究表明, 補充有機態(tài)硒具有易于吸收利用、穩(wěn)定性良好等優(yōu)點[6]。筆者通過添加無機硒元素(亞硒酸鈉、活化硒礦)富硒栽培和天然富硒原料富硒栽培,研究不同硒源栽培模式下紫芝的富硒情況,得到富硒紫芝栽培的最佳模式, 開發(fā)有機形態(tài)、成本低廉的富硒紫芝產品,為開發(fā)有機富硒靈芝產品提供理論依據。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        1.1.1 不同硒源栽培模式紫芝。通過添加無機硒元素(亞硒酸鈉、活化硒礦)富硒栽培和天然富硒原料富硒栽培得到富硒紫芝(由海南省林業(yè)科學研究所提供)。

        1.1.2 無機富硒紫芝子實體。在保亭縣紫芝栽培的基質料中,分別添加不同量的亞硒酸鈉和活化硒礦(配制成分別5、10、15、20、30 μg/g 基質料),通過靈芝菌在生長過程中對無機硒的吸收、富集,然后轉化為含有機態(tài)硒的生物富硒紫芝子實體材料。

        1.1.3 天然富硒紫芝子實體。以富硒地區(qū)三門坡的基質和富硒地區(qū)萬寧興隆的基質為富硒源種植的紫芝,通過紫芝菌在生長過程中對天然富硒源的吸收、富集,然后轉化為含有機態(tài)硒的生物富硒紫芝子實體材料。

        1.2 儀器和試劑

        Agilent 7700X ICP-MS,安捷倫科技有限公司;ETHOSOME微波消解化學系統(tǒng), MILESTONE公司;METTLER TOLEDO XS205電子天平,美國梅特勒—托利多公司;純化水系統(tǒng)Cascada RO WATER,美國頗爾公司;去離子水系統(tǒng)Cascada AN WATER,美國頗爾公司;玻璃儀器氣流烘干器C-30,上海越眾儀器有限公司;數控超聲波清洗器KQ 300 DB,上海越眾儀器有限公司;調溫加熱板(TWJR-B280×280),上海越眾儀器有限公司;微型植物粉碎機,天津市泰斯特儀器有限公司;遠紅外快速恒溫干燥箱,上海躍進醫(yī)療器械廠;硝酸(分析純),廣州東紅化工廠;過氧化氫(30%),天津大茂化學試劑廠。

        1.3 試驗方法

        1.3.1 富硒紫芝子實體的制備。將不同硒源栽培模式紫芝50 ℃下烘干, 粉碎成粉過70~100目為原料,置于干燥的廣口瓶中放置于低溫冰箱中冷凍保存,分析用時將其解凍后使用。

        1.3.2 微波消解法[7-8]測定富硒紫芝中微量元素的含量。該方法分為8個步驟:①用自來水洗凈后再用去離子水洗2~3次;

        ②植物樣品在60~65 ℃干燥箱中烘4~5 h,取出后置于干燥器中冷卻;③稱取干燥樣品0.1 g(精確到0.000 1),放入對應編號的內襯杯中;④向消化罐中加入5.0 mL HNO3和3.0 mL H2O2;⑤將加蓋密封的裝有樣品的內襯杯置于微波消解儀,并按照設定的消解程序進行消解反應。升溫180 ℃,反應25 min,后冷卻;⑥將冷卻后的樣品溶液轉移到50 mL容量瓶中進行定容,搖勻,待測;

        ⑦同法制備樣品空白溶液,上機測定。⑧每個樣品及空白樣品平行做3份,測定平行樣中各元素的含量并計算RSD值。

        1.3.3 ICP-MS工作參數的設定[8-9]。通過調諧,ICP-MS儀器的靈敏度、背景、氧化物、雙電荷穩(wěn)定性等指標達到要求。具體工作參數為:功率為1 200 W,Plasma Gas、Aux Gas、Carrier Gas、MU/Dil Gas分別為15.0、1.0、1.0、1.0 L/min;采樣深度、采樣錐孔徑、截取錐孔徑分別為7.0、1.0、0.4 mm;分析模式為全定量模式;同位素平均積分時間為0.3 s,氧化物含量<0.3%。

        1.3.4 標準曲線的繪制。

        精密吸取各標準儲備液,用5%硝酸稀釋,配制成相應元素質量濃度的混合系列溶液。以5%硝酸作為空白,在優(yōu)化的試驗條件下,使用ICP-MS儀器采集空白及標準溶液系列,儀器自動繪制標準曲線。標準曲線的線性相關系數均在0.999 5以上。然后再測標準物質,發(fā)現標準物質中各元素含量的測定值與標準值吻合。

        2 結果與分析

        從表1可以看出,14個富硒樣品中檢測出Mg、Ca、Fe、Cr、Co、Cu、Zn、As、Cd、Pb、Se,未檢出Ag、Hg這2種元素。在基質中添加亞硒酸鈉硒源和添加活化硒礦硒源富硒時,都存在最大添加量。在添加亞硒酸鈉為硒源時,當基質中硒含量為41.00 mg/kg、紫芝富硒含量為83.50 mg/kg,富硒效果可以達到200%以上;當基質中硒含量為85.00~110.00 mg/kg,富硒效果不明顯,在100%左右;當基質中硒含量大于110.00 mg/kg,富硒效果較差。在添加活化硒礦為硒源時,富硒效果較差,不足5%??梢?,添加亞硒酸鈉硒源比添加活化硒礦硒源富硒效果較好。富硒地區(qū)三門坡的基質中硒含量為0.41 mg/kg,三門坡富硒紫芝中硒含量為0.19 mg/kg,富硒效果在50%左右。其他元素含量較接近。

        3 結論

        通過微波消解-ICP-MS法對不同硒源栽培模式紫芝中微量元素進行測定,通過添加無機硒元素(亞硒酸鈉、活化硒礦)富硒栽培和天然富硒原料富硒栽培,研究不同硒源栽培模式下紫芝的富硒情況。結果表明,14個富硒樣品中檢測出Mg、Ca、Fe、Cr、Co、Cu、Zn、As、Cd、Pb、Se,未檢出Ag、Hg這2種元素。在基質中添加亞硒酸鈉和添加活化硒礦硒源富硒時,都存在最大添加量。在添加亞硒酸鈉為硒源時,當基質中硒含量為41.00 mg/kg,富硒效果可以達到200%以上;當基質中硒含量大于110.00 mg/kg,富硒效果較差。在添加活化硒礦為硒源時,富硒效果較差,不足5%??梢?,添加亞硒酸鈉硒源比添加活化硒礦硒源富硒效果好。其他元素含量較接近。

        參考文獻

        [1]曾祥麗,包海鷹.靈芝三萜類成分與藥理學研究進展[J].菌物研究,2004,2(1):68-77.

        [2] 尚德靜, 王關林.四種食用菌富硒能力的比較研究[J].食用菌學報, 1999, 6(3): 17-20.

        [3] 姚敏.富硒靈芝中硒含量分布和賦存形態(tài)研究[J].上海大學學報(自然科學版), 1997, 3(5):485-491.

        [4] 佐橋佳一.日本農藝化學會志[M].東京:日本農藝化學會,1988.

        [5] 徐輝碧.生物微量元素:硒[M].武漢:華中工學院出版社,1983:20-35.

        [6] 陸利霞, 沈愛光.食用菌富集微量元素的研究與進展[J].中國食用菌, 1999,18(4):10-12.

        [7] 伏簫諾,趙志忠,吳丹,等.海南島八門灣紅樹林沉積物重金屬有效態(tài)空間分異特征[J].江蘇農業(yè)科學,2017,45(12):241-245.

        [8] 余天虹,趙志忠,李勇,等.海南十大功勞、大戟和鳳仙花的化學元素含量研究[J].江西師范大學學報(自然科學版),2016,40(6):574-577.

        [9] 吳丹,趙志忠,季一諾,等.海南島八門灣紅樹林濕地表層沉積物重金屬分布特征及污染評價[J].海南師范大學學報(自然科學版),2015,28(4):432-437.

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